基于相分離的方法,利用聚電解質(zhì)分離蛋白質(zhì)是一種簡(jiǎn)單,高效且具有高選擇性的純化蛋白質(zhì)的方法,它具備現(xiàn)存的蛋白質(zhì)分離方法所不具有的一些特性,如具有更加高效和更大規(guī)模的分離能力,是一種十分有潛力的新技術(shù)。當(dāng)聚電解質(zhì)與蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用時(shí),由于蛋白質(zhì)表面電荷的各向異性,在一定條件下聚電解質(zhì)能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)產(chǎn)生選擇性吸附,實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的分離純化。這種相互作用本質(zhì)是靜電作用,受到溶液中pH和離子強(qiáng)度等因素的影響,可以通過調(diào)節(jié)這些變量實(shí)現(xiàn)分離過程的優(yōu)化。本文分別研究了單一的納米球形聚電解質(zhì)刷(SPB)與各種蛋白質(zhì)之間的相互作用及含有相反電荷的兩種聚電解質(zhì)和蛋白質(zhì)組成的三元體系之間的相互作用,并探究了pH和離子強(qiáng)度對(duì)相互作用的影響,驗(yàn)證了利用蛋白質(zhì)電荷的各向異性分離蛋白質(zhì)的可能,主要的研究?jī)?nèi)容如下:1.在本文中,我們證明了蛋白質(zhì)在陽(yáng)離子型聚(2-甲基丙烯酰氧乙基)三甲基氯化銨刷PDMC-SPB上的結(jié)合行為會(huì)受蛋白質(zhì)電荷各向異性的影響。與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí),強(qiáng)陽(yáng)離子SPB可以獲得比弱陽(yáng)離子SPB更高的結(jié)合親和力,因此蛋白質(zhì)在強(qiáng)陽(yáng)離子SPB上的選擇性吸附更強(qiáng),可以獲得更好的分離效率。利用濁度滴定法和等溫量熱滴定...

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
符號(hào)說(shuō)明
第1章 緒論
    1.1 蛋白質(zhì)分離方法簡(jiǎn)介
    1.2 利用聚電解質(zhì)分離蛋白質(zhì)的方法
        1.2.1 聚電解質(zhì)-蛋白質(zhì)凝聚的成因
        1.2.2 影響聚電解質(zhì)-蛋白質(zhì)凝聚的因素
        1.2.3 利用聚電解質(zhì)分離蛋白質(zhì)的有關(guān)研究
    1.3 利用球形納米聚電解質(zhì)刷( SPB)分離蛋白質(zhì)的方法
        1.3.1 SPB的制備及表征
        1.3.2 SPB和蛋白質(zhì)的相互作用
        1.3.3 SPB在分離純化蛋白質(zhì)上的應(yīng)用
    1.4 蛋白質(zhì)和聚電解質(zhì)相互作用的表征方式
        1.4.1 濁度滴定
        1.4.2 動(dòng)態(tài)光散射(DLS)
        1.4.3 等溫滴定量熱法(ITC)
        1.4.4 其它的表征方式
    1.5 本文的創(chuàng)新點(diǎn)及研究?jī)?nèi)容
        1.5.1 本文創(chuàng)新點(diǎn)
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
第2章 利用球形聚電解質(zhì)刷選擇性分離等電點(diǎn)相近蛋白質(zhì)的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        2.2.2 球形聚電解質(zhì)刷的合成
        2.2.3 濁度滴定
        2.2.4 動(dòng)態(tài)光散射(DLS)
        2.2.5 蛋白質(zhì)的熒光標(biāo)記
        2.2.6 SPB-蛋白質(zhì)復(fù)合物的制備
        2.2.7 紫外-可見分光光度法
        2.2.8 等溫量熱滴定法(ITC)
        2.2.9 DelPhi建模
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 球形納米聚電解質(zhì)刷的合成
        2.3.2 熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.3 BSA和BLG的分離
    2.4 本章小結(jié)
第3章 利用球形聚電解質(zhì)刷選擇性分離分子量相近蛋白質(zhì)的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        3.2.2 SPB-蛋白質(zhì)復(fù)合物的制備
        3.2.3 分析與測(cè)試方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 BSA和HB的分離
    3.4 本章小結(jié)
第4章 利用球形聚電解質(zhì)刷選擇性分離復(fù)雜蛋白質(zhì)體系的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        4.2.2 SPB-蛋白質(zhì)復(fù)合物的制備
        4.2.3 陰離子色譜法
        4.2.4 分析與測(cè)試方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 BSA,BLG和HB的分離
        4.3.2 BLG-A和BLG-B的分離
    4.4 本章小結(jié)
第5章 利用聚電解質(zhì)復(fù)合物分離蛋白質(zhì)的研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        5.2.2 三元體系中聚電解質(zhì)-蛋白質(zhì)凝聚物的制備
        5.2.3 三元體系聚電解質(zhì)-蛋白質(zhì)凝聚物粒徑測(cè)量
        5.2.4 蛋白質(zhì)的熒光標(biāo)記
        5.2.5 三元體系對(duì)于蛋白質(zhì)的分離
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 體系中兩種聚電解質(zhì)的比例對(duì)吸附蛋白質(zhì)的影響
        5.3.2 聚電解質(zhì)體系在Fopt-時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)的吸附極限
        5.3.3 離子強(qiáng)度對(duì)聚電解質(zhì)體系吸附蛋白質(zhì)的影響
        5.3.4 pH對(duì)聚電解質(zhì)體系吸附蛋白質(zhì)的影響
        5.3.5 利用聚電解質(zhì)復(fù)合物分離純化蛋白質(zhì)
    5.4 本章小結(jié)
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 全文總結(jié)
    6.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間論文發(fā)表情況



本文編號(hào)：3768181