發(fā)布時間：2023-03-19 20:54

　　目的:沉香是瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含有樹脂的木材,是一種具有悠久藥用歷史的傳統(tǒng)名貴中藥材。現(xiàn)有文獻報道的主要是直接用菌株促進白木香樹結香,尚未見利用沉香內生真菌產(chǎn)生的總酶對沉香白木直接進行催化的相關報道。本論文運用現(xiàn)代分離分析策略及生物技術方法,通過對沉香內生真菌的分離與純化,以催化沉香白木最終化學成分的改變?yōu)橹笜?研究內生真菌對沉香白木的催化效果。方法:從沉香木中分離純化沉香內生真菌,并發(fā)酵培養(yǎng),制備總酶,用總酶對沉香白木進行催化,采用HPLC檢測內生真菌產(chǎn)總酶對沉香白木催化后產(chǎn)物的變化。結果:分離純化出21株沉香內生真菌并對其進行發(fā)酵制備總酶,各菌分別在25℃下100 r/min搖床發(fā)酵培養(yǎng)3⁵ d,發(fā)酵量為24 L,結果表明,產(chǎn)酶最多的是YZ-8菌株,為384.257 g;最少的是BL(3)菌株,為32.906 g。運用HPLC分析總酶對沉香白木催化前后的乙醇提取物,結果表明,菌株YZ-8、YZ-9產(chǎn)總酶催化后,白木中的化學成分前后變化顯著,另外,菌株BL3(3)1(1)、ML-1、YZ-1、YZ-3、YZ...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮略詞表
第1章 前言
    1.1 沉香的概述
        1.1.1 沉香提取方法
        1.1.2 沉香化學成分
        1.1.3 沉香內生菌
        1.1.4 沉香內生菌發(fā)酵產(chǎn)物
        1.1.5 沉香生物誘導結香
        1.1.6 沉香結香機制
        1.1.7 沉香藥理作用
    1.2 研究目的、內容及意義
        1.2.1 研究目的
        1.2.2 研究內容
        1.2.3 研究意義
第2章 沉香內生真菌的分離純化
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 實驗樣品
        2.2.2 培養(yǎng)基
        2.2.3 主要試劑與儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 沉香木塊組織消毒
        2.3.2 沉香內生真菌分離純化
        2.3.3 沉香內生真菌斜面保存
    2.4 實驗結果
    2.5 本章小結
第3章 酶的制備
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 菌株
        3.2.2 培養(yǎng)基
        3.2.3 主要試劑與儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 21株內生真菌的液體發(fā)酵
        3.3.2 21株內生真菌的酶制備
    3.4 實驗結果
    3.5 本章小結
第4章 總酶對沉香白木的催化
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 菌株
        4.2.2 培養(yǎng)基
        4.2.3 實驗樣品
        4.2.4 主要試劑與儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 總酶催化
        4.3.2 催化后提取物分析
        4.3.3 活性菌株總酶催化條件優(yōu)化
        4.3.4 菌株自身發(fā)酵
        4.3.5 發(fā)酵后提取物分析
    4.4 實驗結果
        4.4.1 催化后提取物分析
        4.4.2 活性菌株總酶催化條件優(yōu)化
        4.4.3 發(fā)酵后提取物分析
    4.5 本章小結
第5章 內生真菌對沉香白木的催化
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 菌株
        5.2.2 培養(yǎng)基
        5.2.3 主要試劑與儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 菌株活化
        5.3.2 制備菌懸液
        5.3.3 內生真菌催化
        5.3.4 催化后提取物分析
    5.4 實驗結果
        5.4.1 催化后提取物分析
    5.5 本章小結
第6章 活性菌株的鑒定
    6.1 引言
    6.2 實驗材料
        6.2.1 菌株
        6.2.2 主要試劑與儀器
    6.3 實驗方法
        6.3.1 基因組DNA提取
        6.3.2 PCR擴增
        6.3.3 PCR產(chǎn)物測序
    6.4 實驗結果
        6.4.1 沉香內生真菌菌株BL3③1①的鑒定
        6.4.2 沉香內生真菌菌株YZ-1的鑒定
        6.4.3 沉香內生真菌菌株YZ-8的鑒定
        6.4.4 沉香內生真菌菌株YZ-9的鑒定
    6.5 本章小結
結論與展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間的研究成果、參加學術會議及獲獎
致謝



本文編號：3765958