聚蘋果酸（Poly malic acid,PMLA）是以蘋果酸為單體通過酯鍵連接形成的高分子聚合物。聚蘋果酸獨(dú)特的性質(zhì)結(jié)構(gòu)賦予其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域、食品領(lǐng)域、化妝品領(lǐng)域廣泛的應(yīng)用前景。通過生物發(fā)酵法生產(chǎn)聚蘋果酸全部為β型,其單體全部為L-蘋果酸,應(yīng)用范圍更廣,更加適合用于制作各種生物材料。短梗霉（Aureobasidium spp.）是主要的聚蘋果酸產(chǎn)生菌,本文從自然界中分離篩選短梗霉菌株,應(yīng)用分子生物學(xué)方法對(duì)菌株進(jìn)行鑒定,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。對(duì)出芽短梗霉ipe-1菌株發(fā)酵生產(chǎn)聚蘋果酸的主要代謝途徑進(jìn)行研究。本論文的主要研究結(jié)果如下:（1）經(jīng)亞甲基藍(lán)培養(yǎng)基初篩共獲得18株野生菌落,經(jīng)搖瓶復(fù)篩,獲得產(chǎn)聚蘋果酸的菌株2株,分別命名為ipe-3、ipe-5。經(jīng)分子生物學(xué)鑒定,ipe-3為出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）,ipe-5為短梗霉。并將ipe-3、ipe-5的ITS序列提交到GenBank。ipe-5為首次發(fā)現(xiàn)的短梗霉新菌種,與GenBank數(shù)據(jù)庫中ITS序列同源性為96%。（2）對(duì)ipe-3、ipe-5菌株進(jìn)行了發(fā)酵性能測定,ipe-3聚蘋果酸產(chǎn)量為10.0... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 出芽短梗霉概述
    1.2 聚蘋果酸
        1.2.1 聚蘋果酸概述
        1.2.2 聚蘋果酸的合成方法
        1.2.3 出芽短梗霉合成聚蘋果酸的研究現(xiàn)狀
    1.3 短梗霉合成聚蘋果酸的代謝途徑
        1.3.1 Aureobasidium spp.合成β-PMLA的代謝途徑
        1.3.2 Aureobasidium spp.合成β-PMLA的關(guān)鍵酶系及基因
    1.4 Aureobasidium spp.合成β-PMLA的代謝調(diào)控
        1.4.1 溶氧、pH及氧化還原電位的影響
        1.4.2 代謝抑制物及中間體的調(diào)控
    1.5 課題的研究意義與研究內(nèi)容
        1.5.1 課題的研究意義
        1.5.2 課題的研究內(nèi)容
第2章 短梗霉菌種的分離篩選研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)菌種及樣品
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.4 培養(yǎng)基
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 菌種的篩選及培養(yǎng)
        2.3.2 菌種的鑒定
        2.3.3 菌體濃度的測定
        2.3.4 PMLA濃度的測定
        2.3.5 葡萄糖濃度的測定
        2.3.6 細(xì)胞粒徑的測定
        2.3.7 溶氧(DO)濃度的測定
        2.3.8 pH的測定
        2.3.9 發(fā)酵參數(shù)計(jì)算
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 蘋果酸檢測條件的建立
        2.4.2 短梗霉菌株的篩選鑒定
        2.4.3 基于ITS序列分析的系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        2.4.4 發(fā)酵性能的比較
        2.4.5 形態(tài)學(xué)觀察
    2.5 本章小結(jié)
第3章 溶氧及丙酮酸對(duì)聚蘋果酸產(chǎn)量的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 培養(yǎng)基
        3.3.2 培養(yǎng)方法
        3.3.3 分析方法
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 溶氧對(duì)ipe-3發(fā)酵的影響
        3.4.2 溶氧對(duì)ipe-5發(fā)酵的影響
        3.4.3 溶氧對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
        3.4.4 溶氧對(duì)聚蘋果酸合成關(guān)鍵酶活的影響
        3.4.5 丙酮酸對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
        3.4.6 72h補(bǔ)糖對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
    3.5 本章小結(jié)
第4章 NaF、三氟乙酸、ATP對(duì)聚蘋果酸發(fā)酵的影響
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 培養(yǎng)基
        4.3.2 培養(yǎng)方法
        4.3.3 分析方法
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 NaF對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
        4.4.2 三氟乙酸對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
        4.4.3 ATP對(duì)ipe-1發(fā)酵的影響
        4.4.4 三氟乙酸與ATP對(duì)發(fā)酵的共同影響
    4.5 本章小結(jié)
第5章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間主要科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3663688