我國是全球最大的蘋果生產(chǎn)國之一,然而,蘋果在貯藏階段易受病原菌侵染而腐爛。其中,擴展青霉（Penicillium expansum）引起的蘋果腐爛已經(jīng)造成了嚴重的經(jīng)濟損失,同時,其次級代謝產(chǎn)物展青霉素（patulin,PAT）對人體健康具有嚴重威脅。目前控制蘋果真菌病害的普遍方法是使用化學(xué)殺菌劑,然而,化學(xué)殺菌劑的長期濫用給環(huán)境、人體健康帶來的負面影響日益顯現(xiàn)。多年來,研究者們積極尋找可以替代化學(xué)殺菌劑的方法,生物防治在近年來已取得了突破性的進展,并且被認為是最有希望可以替代化學(xué)殺菌劑的方法。其中,拮抗酵母更是研究的熱點,然而,拮抗酵母單獨使用時的防治效力仍然比不上化學(xué)殺菌劑。因此,迫切需要提高拮抗酵母的生防效力以推進其商業(yè)化應(yīng)用進程。β-葡聚糖無毒無害,目前,β-葡聚糖主要用于各類食品的生產(chǎn)、藥品加工的原料及化妝品的原料等。本論文以課題組篩選的隱球酵母（Cryptococcus podzolicus）為研究對象,通過在培養(yǎng)基中添加β-葡聚糖對酵母進行誘導(dǎo)培養(yǎng),研究β-葡聚糖對C.podzolicus控制蘋果采后青霉病效果的影響,從酵母生理、果實抗性等方面分析相關(guān)生理機制,并利用蛋白質(zhì)... 

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 蘋果采后損失現(xiàn)狀
        1.1.1 蘋果產(chǎn)業(yè)狀況
        1.1.2 蘋果主要采后病害
    1.2 蘋果采后病害主要控制方法
        1.2.1 傳統(tǒng)方法—使用化學(xué)殺菌劑
        1.2.2 非化學(xué)殺菌劑控制采后病害的探索
    1.3 拮抗酵母防治水果采后病害的機制
        1.3.1 拮抗酵母防治水果采后病害的生理機制
        1.3.2 拮抗酵母防治水果采后病害的分子機制
    1.4 增強拮抗酵母生防效力的措施
        1.4.1 與物理方法、化學(xué)物質(zhì)結(jié)合使用
        1.4.2 多種拮抗菌混合使用
        1.4.3 利用分子生物技術(shù)改造生防酵母
        1.4.4 調(diào)控酵母生理
    1.5 β-葡聚糖的性質(zhì)及其應(yīng)用
        1.5.1 β-葡聚糖的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
        1.5.2 β-葡聚糖的應(yīng)用
    1.6 本課題研究的目的及意義
第二章 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果青霉病的防治效果
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 主要儀器與設(shè)備
        2.2.2 供試水果
        2.2.3 酵母菌
        2.2.4 病原菌
        2.2.5 主要試劑及培養(yǎng)基
        2.2.6 不同濃度β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果采后青霉病的防治效力
        2.2.7 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果自然病害發(fā)生及貯藏品質(zhì)的影響
        2.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 不同濃度β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果采后青霉病的防治效力
        2.3.2 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果自然病害發(fā)生及貯藏品質(zhì)的影響
    2.4 討論
第三章 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)提高C.podzolicus生防效力的生理機制
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要儀器與設(shè)備
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 供試水果
        3.2.4 酵母菌
        3.2.5 病原菌
        3.2.6 C.podzolicus在蘋果傷口處的生長動態(tài)
        3.2.7 掃描電鏡觀察C.podzolicus及P.expansum在蘋果傷口處的生長情況
        3.2.8 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)對C.podzolicus生理指標的影響
        3.2.9 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果抗病相關(guān)酶活及脂質(zhì)過氧化作用的影響
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 C.podzolicus在蘋果傷口處的生長動態(tài)
        3.3.2 掃描電鏡觀察C.podzolicus及P.expansum在蘋果傷口處的生長情況
        3.3.3 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)對C.podzolicusβ-1,3-葡聚糖酶活性的影響
        3.3.4 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)對C.podzolicusCAT活性的影響
        3.3.5 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)對C.podzolicusMDA含量的影響
        3.3.6 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果PPO活性的影響
        3.3.7 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果POD活性的影響
        3.3.8 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果PAL活性的影響
        3.3.9 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果CAT活性的影響
        3.3.10 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus對蘋果脂質(zhì)過氧化作用的影響
    3.4 討論
第四章 β-葡聚糖誘導(dǎo)培養(yǎng)C.podzolicus的蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 主要儀器與設(shè)備
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 酵母菌
        4.2.4 總蛋白的提取
        4.2.5 雙向電泳
        4.2.6 凝膠圖譜分析
        4.2.7 質(zhì)譜操作流程
        4.2.8 蛋白鑒定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 C.podzolicus蛋白質(zhì)雙向電泳圖
        4.3.2 β-葡聚糖誘導(dǎo)C.podzolicus差異蛋白點質(zhì)譜鑒定結(jié)果
        4.3.3 差異蛋白的GO分類
    4.4 討論
第五章 β-葡聚糖誘導(dǎo)C.podzolicus的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 主要儀器與設(shè)備
        5.2.2 主要試劑
        5.2.3 酵母菌
        5.2.4 酵母菌總RNA的提取
        5.2.5 上機測序
        5.2.6 C.podzolicus轉(zhuǎn)錄組生物信息學(xué)分析
        5.2.7 RT-qPCR驗證相關(guān)差異基因
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 測序質(zhì)量檢測及數(shù)據(jù)統(tǒng)計
        5.3.2 差異表達基因的GO分類
        5.3.3 差異表達基因的COG富集分析
        5.3.4 差異表達基因的KEGG注釋
    5.4 RT-qPCR驗證
        5.4.1 引物設(shè)計及驗證
        5.4.2 差異基因驗證結(jié)果與分析
    5.5 討論
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間學(xué)術(shù)成果



本文編號：3650941