肝臟是機(jī)體參與解毒與代謝的重要器官,具有排毒、新陳代謝、蛋白質(zhì)的分泌與類維生素A的儲(chǔ)存等重要的生理功能。急性肝損傷是由活性氧（ROS）的產(chǎn)生與代謝不平衡誘發(fā)氧化應(yīng)激、細(xì)胞氧化還原狀態(tài)紊亂從而引起的毒性作用�？诜f送系統(tǒng)可提高疏水性物質(zhì)的生物利用度,制備緩釋劑保護(hù)包封藥物免受p H環(huán)境、酶降解和藥物外排泵的影響以及靶向釋放藥物。為了減少氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的化學(xué)性肝損傷等生理異常的發(fā)展,探索傳統(tǒng)天然產(chǎn)物的新型納米顆粒作為抗氧化劑來保護(hù)肝臟免尤為重要。本文從傳統(tǒng)中藥材川木瓜中分離純化保肝活性物質(zhì)齊墩果酸（Oleanolic acid,OA）,制備口服齊墩果酸納米顆粒（DCA NPs）,研究其在小鼠CCl₄急性肝損傷中的防護(hù)作用并揭示其潛在機(jī)制,為川木瓜在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供新策略。川木瓜齊墩果酸提取分離方法及工藝參數(shù)優(yōu)化。采用川木瓜作為原料,通過單因素試驗(yàn)、Plackett-Burman試驗(yàn)與響應(yīng)面正交試驗(yàn)對(duì)川木瓜中齊墩果酸的提取進(jìn)行優(yōu)化,齊墩果酸最佳得率為4.16%;通過考察固定相介質(zhì)與流動(dòng)相的吸附層析優(yōu)化齊墩果酸分離純化工藝參數(shù),經(jīng)硅膠二次純化后齊墩果酸純度達(dá)到54.6... 

【文章來源】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 課題來源及研究的目的和意義
        1.1.1 課題來源
        1.1.2 研究背景和意義
    1.2 川木瓜研究進(jìn)展
        1.2.1 川木瓜活性成分及生理功能
        1.2.2 齊墩果酸提取純化方法研究現(xiàn)狀
    1.3 齊墩果酸保肝作用研究現(xiàn)狀
        1.3.1 抗化學(xué)性急性肝損傷
        1.3.2 抗缺血再灌注性肝損傷
        1.3.3 抗肝纖維化
    1.4 納米�？诜f送系統(tǒng)研究進(jìn)展
        1.4.1 口服遞送系統(tǒng)屏障
        1.4.2 納米粒制備方法研究現(xiàn)狀
    1.5 目前存在問題與展望
    1.6 主要研究內(nèi)容及研究方案
        1.6.1 研究內(nèi)容
        1.6.2 研究路線
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.2 川木瓜齊墩果酸提取分離方法及工藝參數(shù)優(yōu)化
        2.2.1 原料預(yù)處理
        2.2.2 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
        2.2.3 川木瓜齊墩果酸含量測定
        2.2.4 單因素試驗(yàn)
        2.2.5 Plackett-Burman試驗(yàn)
        2.2.6 Box-Behnken試驗(yàn)
        2.2.7 齊墩果酸HPLC檢測
        2.2.8 固定相介質(zhì)篩選
        2.2.9 固定相介質(zhì)對(duì)齊墩果酸的動(dòng)態(tài)吸附/解析工藝影響
        2.2.10 硅膠層析二次純化齊墩果酸
        2.2.11 制備型高效液相色譜法分離齊墩果酸單體
    2.3 齊墩果酸納米粒制備及結(jié)構(gòu)表征
        2.3.1 齊墩果酸納米粒制備
        2.3.2 齊墩果酸納米粒制備工藝優(yōu)化
        2.3.3 齊墩果酸納米粒結(jié)構(gòu)表征
    2.4 DCA NPs對(duì) CCl_4 誘導(dǎo)肝損傷的防護(hù)作用
        2.4.1 DCA NPs體外毒性試驗(yàn)
        2.4.2 DCA NPs釋放行為試驗(yàn)
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
        2.4.4 DCA NPs對(duì)臟器損傷的保護(hù)作用
        2.4.5 肝組織相關(guān)指標(biāo)檢測
        2.4.6 DCA NPs肝損傷防護(hù)作用機(jī)制的研究
    2.5 數(shù)據(jù)處理
第3章 川木瓜齊墩果酸提取分離方法及工藝參數(shù)優(yōu)化
    3.1 引言
    3.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果分析
        3.2.1 乙醇濃度對(duì)川木瓜中齊墩果酸得率的影響
        3.2.2 料液比對(duì)川木瓜齊墩果酸得率的影響
        3.2.3 超聲時(shí)間度對(duì)川木瓜齊墩果酸得率的影響
        3.2.4 超聲溫度對(duì)川木瓜齊墩果酸得率的影響
        3.2.5 超聲功率對(duì)川木瓜中齊墩果酸提取的影響
    3.3 Plackett- Burman試驗(yàn)結(jié)果分析
    3.4 Box-Behnken試驗(yàn)結(jié)果分析
    3.5 基于吸附層析的固定相介質(zhì)篩選
        3.5.1 固定相介質(zhì)靜態(tài)吸附率及解吸率測定
        3.5.2 固定相介質(zhì)靜態(tài)吸附曲線
        3.5.3 固定相介質(zhì)靜態(tài)解析曲線
    3.6 固定相介質(zhì)對(duì)齊墩果酸的動(dòng)態(tài)吸附/解析工藝影響
        3.6.1 固定相介質(zhì)X-5樹脂泄露曲線
        3.6.2 流動(dòng)相的動(dòng)態(tài)洗脫曲線
        3.6.3 流動(dòng)相流速對(duì)齊墩果酸純度的影響
        3.6.4 流動(dòng)相濃度對(duì)齊墩果酸純度的影響
        3.6.5 徑長比對(duì)齊墩果酸純度的影響
        3.6.6 上樣液濃度對(duì)齊墩果酸純度影響
    3.7 硅膠層析二次純化齊墩果酸
    3.8 制備型高效液相色譜法分離純化齊墩果酸
    3.9 本章小結(jié)
第4章 齊墩果酸納米粒制備及結(jié)構(gòu)表征
    4.1 引言
    4.2 齊墩果酸納米粒制備
        4.2.1 兩親性納米載體DCS制備
        4.2.2 齊墩果酸納米粒制備
    4.3 齊墩果酸納米粒制備工藝優(yōu)化
        4.3.1 制備方法對(duì)DCA NPs包封率和載藥量的影響
        4.3.2 壁材對(duì)DCA NPs包封率和載藥量的影響
        4.3.3 DCS濃度對(duì)DCA NPs包封率和載藥量的影響
    4.4 DCS載體結(jié)構(gòu)表征
        4.4.1 FT-IR表征分析
        4.4.2 ~1HNMR分析
    4.5 DCA NPs結(jié)構(gòu)表征
        4.5.1 粒徑、PDI和 Zeta電位
        4.5.2 透射電鏡(TEM)分析
    4.6 本章小結(jié)
第5章 DCA NPs對(duì) CCl_4 誘導(dǎo)肝損傷的防護(hù)作用
    5.1 引言
    5.2 DCA NPs細(xì)胞毒理學(xué)分析
    5.3 DCA NPs在模擬胃腸環(huán)境中釋放行為分析
    5.4 DCA NPs對(duì)臟器損傷的保護(hù)作用
        5.4.1 DCA NPs對(duì)小鼠體重及臟器指數(shù)的影響
        5.4.2 DCA NPs對(duì)肝臟組織病理學(xué)的影響
        5.4.3 DCA NPs對(duì)肝損傷標(biāo)志物的影響
    5.5 DCA NPs對(duì)氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)作用
        5.5.1 DCA NPs對(duì)抗氧化酶活性的影響
        5.5.2 DCA NPs對(duì)肝臟炎性因子的影響
    5.6 DCA NPs對(duì)肝損傷相關(guān)基因的表達(dá)及防護(hù)作用
        5.6.1 DCA NPs對(duì)NrF2、HO-1、Keap1、NQO1、TNF-α與NF-κB mRNA表達(dá)的影響
        5.6.2 DCA NPs對(duì)NrF2、HO-1、NQO1與GCLC蛋白表達(dá)的影響
    5.7 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其它成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]齊墩果酸抑制HMGB1-TLR4-中性粒細(xì)胞正反饋環(huán)減輕小鼠肝缺血再灌注損傷[D]. 陳夏虹.重慶醫(yī)科大學(xué) 2016
[4]皺皮木瓜有機(jī)酸提取純化工藝優(yōu)化與色譜指紋圖譜研究[D]. 李育鐘.西南大學(xué) 2013
[5]齊墩果酸的結(jié)構(gòu)修飾及活性研究[D]. 宋志成.大連理工大學(xué) 2011



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