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蝙蝠蛾擬青霉蟲(chóng)草素高產(chǎn)菌株的選育及其培養(yǎng)條件優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2022-02-23 00:36
  冬蟲(chóng)夏草(Cordyceps sinensis)作為中國(guó)傳統(tǒng)的中藥,其市場(chǎng)前景廣闊。蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomyces hepiali)是冬蟲(chóng)夏草的共生菌,其活性成分和冬蟲(chóng)夏草高度相似,可以作為野生冬蟲(chóng)夏草的替代品,在保健藥品領(lǐng)域也有著廣泛的應(yīng)用,如根據(jù)蝙蝠蛾擬青霉深層發(fā)酵得到的菌絲體生產(chǎn)的藥品金水寶顆粒,在臨床上應(yīng)用廣泛。而蟲(chóng)草素是天然核苷類(lèi)抗生素,已被證實(shí)是冬蟲(chóng)夏草活性成分之一,并且其在多種疾病的治療中發(fā)揮著不可或缺的作用。蟲(chóng)草素是蝙蝠蛾擬青霉的主要活性成分,蟲(chóng)草素含量的提高有利于增強(qiáng)蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌粉的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。本文從野生冬蟲(chóng)夏草菌蟲(chóng)復(fù)合體中分離得到了一株能夠產(chǎn)蟲(chóng)草素的蝙蝠蛾擬青霉菌株,并以該菌株作為出發(fā)菌株進(jìn)行誘變選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化,提高了菌絲體產(chǎn)量和蟲(chóng)草素含量。主要研究結(jié)果如下:首先,從青海玉樹(shù)采集野生冬蟲(chóng)夏草菌蟲(chóng)復(fù)合體進(jìn)行共生菌的分離鑒定。得到的一株蝙蝠蛾擬青霉菌株(OR-1),對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,包括單菌落觀察、光學(xué)顯微鏡觀察和掃描電鏡(SEM)觀察;生理生化鑒定以及18S rDNA分子鑒定,并構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。對(duì)蝙蝠蛾擬青霉OR-1的深層發(fā)酵進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),發(fā)酵... 

【文章來(lái)源】:浙江工業(yè)大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 蝙蝠蛾擬青霉簡(jiǎn)介
    1.3 蟲(chóng)草素的研究進(jìn)展
    1.4 菌株選育
        1.4.1 60Co-γ射線(xiàn)誘變
        1.4.2 紫外誘變
        1.4.3 復(fù)合誘變
    1.5 發(fā)酵過(guò)程的主要影響因素
        1.5.1 碳源
        1.5.2 氮源
        1.5.3 金屬離子
        1.5.4 前體物質(zhì)
    1.6 本課題的選題背景與意義
        1.6.1 立題背景和意義
        1.6.2 本文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 蝙蝠蛾擬青霉OR-1的分離、鑒定
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 野生冬蟲(chóng)夏草的采集
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 主要藥品與試劑
        2.2.4 培養(yǎng)基及溶液的配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 單菌落的分離
        2.3.2 培養(yǎng)物的菌種鑒定
        2.3.3 蟲(chóng)草素含量測(cè)定
        2.3.4 單菌落的深層發(fā)酵
    2.4 結(jié)論
        2.4.1 單菌落分離及觀察
        2.4.2 蟲(chóng)草素含量的測(cè)定
        2.4.3 單菌落的深層發(fā)酵
    2.5 本章小結(jié)
第三章 蝙蝠蛾擬青霉OR-1的誘變
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 出發(fā)菌株
        3.2.2 儀器與設(shè)備
        3.2.3 主要藥品與試劑
        3.2.4 培養(yǎng)基與溶液的配制
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 分析方法
        3.3.2 孢子懸液的制備
        3.3.3 ~(60) Co-γ射線(xiàn)誘變
        3.3.4 紫外誘變
        3.3.5 復(fù)合誘變
    3.4 結(jié)論
        3.4.1 ~(60) Co-γ輻射誘變
        3.4.2 紫外誘變
        3.4.3 復(fù)合誘變
        3.4.4 誘變菌與原始菌對(duì)比
    3.5 本章小結(jié)
第四章 蝙蝠蛾擬青霉OR-1 及其突變株ZJB18001 的培養(yǎng)基優(yōu)化
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        4.2.2 儀器與設(shè)備
        4.2.3 主要藥品與試劑
        4.2.4 培養(yǎng)基與溶液的配制
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 分析方法
        4.3.2 碳源優(yōu)化
        4.3.3 氮源優(yōu)化
        4.3.4 金屬離子添加
        4.3.5 前體物質(zhì)優(yōu)化
        4.3.6 四因素三水平響應(yīng)面法優(yōu)化培養(yǎng)條件
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 碳源優(yōu)化
        4.4.2 氮源優(yōu)化
        4.4.3 金屬離子優(yōu)化
        4.4.4 前體物質(zhì)優(yōu)化
        4.4.5 響應(yīng)面設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
    1 作者簡(jiǎn)歷
    2 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
    3 發(fā)明專(zhuān)利
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]蛹蟲(chóng)草復(fù)合誘變及固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 孫翠.安徽大學(xué) 2018
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[3]蝙蝠蛾擬青霉菌株發(fā)酵工藝優(yōu)化、菌粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及免疫活性研究[D]. 滕偉卓.吉林大學(xué) 2015
[4]黑曲霉產(chǎn)β-葡萄糖苷酶優(yōu)良菌株的Co~(60)輻射誘變選育及發(fā)酵特性研究[D]. 王貴娟.合肥工業(yè)大學(xué) 2007
[5]~(60)Co-γ射線(xiàn)對(duì)檸檬酸產(chǎn)生菌的誘變育種[D]. 穆曉玲.江南大學(xué) 2005



本文編號(hào):3640507

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