發(fā)布時間：2022-02-20 17:10

　　生物活性肽容易受到胃腸道蛋白酶和肽酶的降解,不能順利到達靶組織發(fā)揮作用。本研究通過納米包埋技術(shù)提高燕麥多肽在胃腸道中的穩(wěn)定性,抑制燕麥多肽在胃腸道中的二次水解。具體結(jié)果如下:1.提取燕麥球蛋白組分,胰蛋白酶水解14 h和堿性蛋白酶水解2 h后的水解產(chǎn)物對DPP4均有良好的抑制作用,且具有濃度依賴型關(guān)系。利用堿性蛋白酶進行水解時能在較短時間內(nèi)釋放出更多的DPP4抑制肽,但切割位點不易控制,因此選擇胰蛋白酶對燕麥球蛋白進行水解。2.對胰蛋白酶水解14 h后的水解產(chǎn)物進行電泳實驗和水解度的測定。水解產(chǎn)物的分子量均在14 kDa以下,水解度為19.25%。對水解產(chǎn)物進行超濾,得到分子量小于3 kDa（Mw<3 kDa）的組分OGL和分子量在3 kDa-10 kDa之間的組分OGH（3 kDa<Mw<10 kDa）。研究了兩種不同分子量的燕麥多肽對DPP4的抑制作用,發(fā)現(xiàn)OGL對DPP4的抑制作用較強,IC50值為0.12 mg/mL,OGH的IC50值為2.42 mg/mL。OGL和OGH的疏水性分別為40和79。3.利用固體脂質(zhì)納米顆粒（SLN）對兩部分燕麥多肽進行包埋,并... 

【文章來源】：北京林業(yè)大學北京市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
    1.1 糖尿病及DPP4抑制劑
        1.1.1 糖尿病介紹及并發(fā)癥
        1.1.2 GLP-1和DPP4
        1.1.3 藥物型DPP4抑制劑
        1.1.4 天然DPP4抑制劑
        1.1.5 天然DPP4抑制肽
    1.2 生物活性肽
        1.2.1 生物活性肽
        1.2.2 生物活性肽生物利用度
        1.2.3 提高生物活性肽生物利用度的方法
    1.3 固體脂質(zhì)納米顆粒
        1.3.1 固體脂質(zhì)納米顆粒介紹
        1.3.2 SLN的優(yōu)點
        1.3.3 SLN包埋研究進展
    1.4 燕麥DPP4抑制肽
        1.4.1 燕麥的營養(yǎng)價值
        1.4.2 燕麥球蛋白DPP4抑制肽研究進展
    1.5 本研究的研究內(nèi)容及意義
2 燕麥蛋白DPP4抑制肽的制備及篩選
    2.1 材料與設(shè)備
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 燕麥脫脂粉制備
        2.2.2 燕麥蛋白提取
        2.2.3 考馬斯亮藍G-250測染色法定樣品蛋白質(zhì)含量
        2.2.4 燕麥蛋白的水解實驗
            2.2.4.1 胰蛋白酶水解
            2.2.4.2 堿性蛋白酶的水解
            2.2.4.3 十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
            2.2.4.4 水解度的測定
        2.2.5 燕麥多肽的制備
        2.2.6 DPP4抑制活性的測定
        2.2.7 表面疏水性測定
        2.2.8 氨基酸組成分析
        2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 燕麥中各組分的蛋白質(zhì)含量
            2.3.1.1 標準曲線的繪制
            2.3.1.2 燕麥蛋白質(zhì)提取率
        2.3.2 燕麥球蛋白的水解度
        2.3.3 燕麥球蛋白及其DPP4抑制肽的電泳圖譜
        2.3.4 DPP4抑制肽的活性
        2.3.5 DPP4抑制肽的疏水性及氨基酸分析
    2.4 本章小結(jié)
3 SLN的制備特征及其穩(wěn)定性
    3.1 材料與儀器設(shè)備
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 儀器設(shè)備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 SLN的制備
        3.2.2 包埋率(EE)的測定
        3.2.3 SLN特征的測定
        3.2.4 透射電鏡分析
        3.2.5 穩(wěn)定性的評估
            3.2.5.1 pH穩(wěn)定性
            3.2.5.2 儲藏穩(wěn)定性
            3.2.5.3 熱處理穩(wěn)定性
            3.2.5.4 紫外光照穩(wěn)定性
        3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 SLN的特征
        3.3.2 OGL和OGH的包埋率(EE)
        3.3.3 透射電鏡(TEM)
        3.3.4 納米乳液的pH穩(wěn)定性
        3.3.5 納米乳液的儲藏穩(wěn)定性
        3.3.6 納米乳液的熱處理穩(wěn)定性
        3.3.7 納米乳液的紫外光照穩(wěn)定性
    3.4 本章小結(jié)
4 OGB-SLN的模擬胃腸液穩(wěn)定性及其機理
    4.1 材料與儀器設(shè)備
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 儀器設(shè)備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 OGB和OGB-SLN的制備
        4.2.2 體外釋放實驗和DPP4抑制率的測定
        4.2.3 傅立葉變換紅外光譜(FTIR)
        4.2.4 熱重分析
        4.2.5 X射線衍射
        4.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 模擬胃腸液釋放和對DPP4的抑制率
        4.3.2 FTIR分析
        4.3.3 熱穩(wěn)定性
        4.3.4 X射線衍射
    4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論和展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 制備燕麥球蛋白DPP4抑制肽
        5.1.2 SLN特征
        5.1.3 模擬胃腸液穩(wěn)定性研究
        5.1.4 FTIR、TGA和XRD
    5.2 本研究的創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
個人簡歷
導師簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]現(xiàn)代醫(yī)學與傳統(tǒng)醫(yī)學治療2型糖尿病的臨床應(yīng)用研究[J]. 裴晶,暴梅佳.  衛(wèi)生職業(yè)教育. 2019(03)
[2]難溶性藥物與介孔二氧化硅納米粒載體的相互作用對于釋放速率的影響[J]. 劉曈,萬龍,王可可,王曉帆,曲紅娥,姜明燕.  藥物評價研究. 2018(10)
[3]生物活性肽功能及制備技術(shù)研究進展[J]. 余楠楠,陳琛.  中國釀造. 2018(09)
[4]基于體外釋放的半固體制劑透皮吸收及其影響因素探討[J]. 侯迪旭,吳學萍,李樹英,梁林,何淑旺,王東凱.  中國新藥雜志. 2018(15)
[5]不同單硬脂酸甘油酯含量的大豆油油凝膠性能和微觀結(jié)構(gòu)分析[J]. 劉盼盼,許苗苗,祁文靜,陸兆新,呂鳳霞,別小妹,張充,趙海珍.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(03)
[6]人參果皂苷前體陽離子脂質(zhì)體的制備及體外釋放研究[J]. 杜琳,劉知源,趙凌志.  吉林中醫(yī)藥. 2017(10)
[7]紅細胞膜包裹PLGA納米粒的制備和體外毒性及藥物釋放初探[J]. 孫雅楠,張秀梅,馬欣,闕曉,蘇靖,邱明豐.  中國新藥雜志. 2017(19)
[8]姜黃素固體脂質(zhì)納米粒制備及體外釋放的研究[J]. 李春華,劉志東,丁伶伶,黃瑞,王舒雅.  天津中醫(yī)藥大學學報. 2016(06)
[9]載美洲大蠊提取物納米粒的表征及體外釋放研究[J]. 黃丫丫,楊杭,林家莉,楊建香,甘昌敏,劉光明,李婧煒.  中草藥. 2016(19)
[10]楊梅素脂質(zhì)體的體外釋放及體內(nèi)吸收實驗研究[J]. 錢俊青,黃琪,竺少敏.  浙江工業(yè)大學學報. 2016(04)

博士論文
[1]固體脂質(zhì)納米粒的小腸上皮細胞轉(zhuǎn)運機制研究及其載體構(gòu)建[D]. 柴桂宏.浙江大學 2016
[2]白藜蘆醇納米混懸劑改善口服生物利用度及經(jīng)鼻腦靶向遞藥系統(tǒng)研究[D]. 郝吉福.山東大學 2015
[3]基于LyP-1介導淋巴轉(zhuǎn)移腫瘤靶向的脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)研究[D]. 閆志強.復旦大學 2011
[4]固體脂質(zhì)納米粒的制備和性能研究[D]. 侯冬枝.華中科技大學 2004

碩士論文
[1]固體脂質(zhì)納米顆粒包覆防曬劑的規(guī)律性研究[D]. 繆玉蓮.上海應(yīng)用技術(shù)大學 2016
[2]燕麥多肽的結(jié)構(gòu)特征及DPP4抑制作用[D]. 王鳳.北京林業(yè)大學 2016
[3]纈沙坦固體脂質(zhì)納米粒的研究[D]. 李先俊.浙江大學 2014
[4]納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備、表征及相關(guān)性質(zhì)研究[D]. 王佳麗.中國農(nóng)業(yè)科學院 2013



本文編號：3635484