無患子抑菌成分的分離純化及其應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 09:32
無患子果皮中富含的三萜類皂苷具有優(yōu)良的表面活性,以及殺菌、消炎、抗氧化、抗腫瘤等藥理功效。鑒于古文記載無患子具有“浣垢去面”、“去膩”的功效,本文采用無患子果皮作為原料,以皂苷得率及對痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919(Propionibacterium acnes ATCC 6919,以下簡稱P.acnes ATCC 6919)的最低抑菌濃度(MIC)為評價(jià)指標(biāo),考察復(fù)合萃取劑對其進(jìn)行初步純化的效果。同時(shí)探索無患子萃取物中的抑菌活性成分,并對其抑菌機(jī)理進(jìn)行初探。此外,將提取物添加至面膜基質(zhì)中,以期拓展無患子的開發(fā)利用領(lǐng)域。首先,以皂苷得率、純度及其對P.acnes ATCC 6919的MIC作為評價(jià)指標(biāo),系統(tǒng)考察了三種溶劑及四種提取工藝條件對活性成分提取效果的影響。結(jié)果表明,三種溶劑對皂苷的提取效果的影響具有顯著差異(P<0.05),其中水提皂苷得率最高(56.84%),其次為乙醇,乙酸乙酯最低。純度恰好表現(xiàn)相反,乙酸乙酯提取得到的皂苷純度最高(83.24%),而水提所得皂苷的純度最差。在水提基礎(chǔ)上,利用米曲霉發(fā)酵并進(jìn)行乙酸乙酯萃取使得皂苷純度提高了4.29%(為87.53%),但...
【文章來源】:江南大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫表
1 緒論
1.1 痤瘡的簡介
1.2 無患子概述
1.2.1 無患子簡介
1.2.2 無患子果皮的化學(xué)成分
1.3 無患子有效成分的分離純化
1.3.1 溶劑萃取
1.3.2 酶法提取
1.3.3 超濾膜分離
1.3.4 泡沫分離
1.3.5 微波萃取
1.3.6 大孔樹脂分離
1.3.7 微生物發(fā)酵
1.3.8 制備高效液相色譜
1.4 無患子皂苷抑菌性的研究概況
1.4.1 抗細(xì)菌
1.4.2 抗真菌
1.4.3 抗植物病原菌
1.5 無患子皂苷的開發(fā)與應(yīng)用
1.5.1 無患子產(chǎn)品概述
1.5.2 面膜的簡介
1.6 研究目的及意義
1.7 研究內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 具有抑制痤瘡丙酸桿菌的無患子果皮活性成分的分離提取
2.3.1 無患子果皮提取物的制備
2.3.2 無患子活性成分提取溶劑的篩選和抑菌活性的測定
2.3.3 皂苷含量的測定
2.4 液液萃取實(shí)驗(yàn)
2.4.1 萃取劑的選擇
2.4.2 復(fù)合萃取劑比例
2.4.3 料液比
2.4.4 萃取時(shí)間
2.4.5 萃取次數(shù)
2.4.6 振蕩頻率
2.5 無患子提取物的進(jìn)一步分級純化
2.5.1 HPLC分析無患子提取物的條件
2.5.2 半制備型HPLC純化無患子提取物
2.6 抑菌組分的HPLC-DAD/MS檢測
2.7 無患子提取物抑制痤瘡丙酸桿菌機(jī)理的初探
2.7.1 樣品的制備
2.7.2 微生物的活化與傳代培養(yǎng)
2.7.3 MIC的測定
2.7.4 最低殺菌濃度的測定
2.7.5 抑菌率的測定
2.7.6 半抑菌濃度的測定
2.7.7 核酸泄漏的測定
2.7.8 K~+、Mg~(2+)含量測定
2.7.9 堿性磷酸酶含量測定
2.7.10 透射電子顯微鏡觀察
2.8 無患子提取物在面膜中的應(yīng)用初探
2.8.1 面膜基質(zhì)的篩選與制備
2.8.2 無患子提取物在面膜中適宜添加量的確定
2.8.3 面膜的感官評價(jià)
2.8.4 面膜理化指標(biāo)的測定
2.8.5 面膜的功效測評
2.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)方法
3 結(jié)果與討論
3.1 溶劑及提取工藝對抑制痤瘡丙酸桿菌的無患子活性成分提取的影響
3.1.1 皂苷得率及純度
3.1.2 MIC
3.2 SSFW的萃取工藝優(yōu)化
3.2.1 溶劑種類
3.2.2 料液比
3.2.3 萃取時(shí)間
3.2.4 萃取次數(shù)
3.2.5 振蕩頻率
3.3 EAWF的進(jìn)一步分級
3.4 分級產(chǎn)物的定性表征
3.5 EAWF抑制痤瘡丙酸桿菌機(jī)理的初探
3.5.1 MIC與MBC
3.5.2 抑菌率
3.5.3 EC_(50)
3.5.4 對大分子物質(zhì)吸光度的影響
3.5.5 對K~+、Mg~(2+)濃度的影響
3.5.6 對細(xì)胞壁通透性的影響
3.5.7 透射電子顯微鏡觀察結(jié)果
3.6 無患子提取物添加量對面膜特性的影響
3.6.1 添加量對面膜pH的影響
3.6.2 添加量對面膜粘度的影響
3.6.3 添加量對痤瘡丙酸桿菌抑制率的影響
3.6.4 添加量對脂肪酶抑制率的影響
3.6.5 添加無患子提取物的面膜感官評定
3.7 面膜的感官指標(biāo)
3.8 面膜的理化指標(biāo)
3.9 面膜的穩(wěn)定性
3.10 干燥時(shí)間
3.11 面膜的功效測評
3.11.1 保濕率
3.11.2 抑菌率
3.11.3 對酪氨酸酶的抑制率
主要結(jié)論與展望
主要結(jié)論
展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖:化合物質(zhì)譜圖
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無患子、木荷、廣玉蘭提取物組方復(fù)配及其抗稻瘟病體內(nèi)、體外活性研究[J]. 楊小輝,彭玉萌,霍光華,李芳,龍昊知. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(19)
[2]大孔樹脂吸附分離無患子皂苷的研究[J]. 歐霖拱. 日用化學(xué)品科學(xué). 2017(10)
[3]無患子洗面奶的制備[J]. 龍德權(quán). 廣東化工. 2017(13)
[4]響應(yīng)面法優(yōu)化抹茶凝膠面膜的開發(fā)[J]. 左小博,孔俊豪,蘇小琴,楊秀芳,譚蓉. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2017(13)
[5]復(fù)合酶法提取無患子總皂苷的工藝研究[J]. 鄭林祿,朱梅花,陳峰,吳艷玲,陳婉婷,林絲婷. 高師理科學(xué)刊. 2017(06)
[6]膜分離技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 朱鋆珊,馬平,郭麗. 當(dāng)代化工. 2017(06)
[7]植物成分對痤瘡桿菌抑菌作用研究進(jìn)展[J]. 沈文彤,何翔,張慧敏. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(11)
[8]工業(yè)化生產(chǎn)的無患子皂苷在洗發(fā)水中的應(yīng)用研究[J]. 張凱,龔盛昭,孫永,萬岳鵬. 廣東化工. 2015(19)
[9]超聲波輔助下薯蕷皂苷萃取中影響因素的研究[J]. 李祥,師春蘭,王麗萍. 日用化學(xué)工業(yè). 2015(05)
[10]痤瘡病因及外治法研究進(jìn)展[J]. 趙俊茹,胡冬裴. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(09)
碩士論文
[1]無患子水提物抗腫瘤研究[D]. 朱曉雯.江南大學(xué) 2016
[2]不同助溶劑作用下桉葉油對痤瘡丙酸桿菌的抑菌作用[D]. 楊柳.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[3]抗性糊精的純化及應(yīng)用特性研究[D]. 張穎.江南大學(xué) 2015
[4]薏苡仁飲料及面膜的研究與開發(fā)[D]. 吳映梅.貴州大學(xué) 2015
[5]地木耳浸提物的提取及其護(hù)膚功效基礎(chǔ)研究[D]. 康苗苗.山西大學(xué) 2015
[6]石榴皮多酚對痤瘡丙酸桿菌體外抑菌活性的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 張曉玲.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[7]塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究[D]. 王丹.天津大學(xué) 2015
[8]駝乳面膜的研制[D]. 陳宸.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[9]無患子皂苷的發(fā)酵法純化及應(yīng)用性能研究[D]. 伍恒.江南大學(xué) 2013
[10]無患子總皂苷制備工藝研究[D]. 張翠.江南大學(xué) 2012
本文編號:3634761
【文章來源】:江南大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫表
1 緒論
1.1 痤瘡的簡介
1.2 無患子概述
1.2.1 無患子簡介
1.2.2 無患子果皮的化學(xué)成分
1.3 無患子有效成分的分離純化
1.3.1 溶劑萃取
1.3.2 酶法提取
1.3.3 超濾膜分離
1.3.4 泡沫分離
1.3.5 微波萃取
1.3.6 大孔樹脂分離
1.3.7 微生物發(fā)酵
1.3.8 制備高效液相色譜
1.4 無患子皂苷抑菌性的研究概況
1.4.1 抗細(xì)菌
1.4.2 抗真菌
1.4.3 抗植物病原菌
1.5 無患子皂苷的開發(fā)與應(yīng)用
1.5.1 無患子產(chǎn)品概述
1.5.2 面膜的簡介
1.6 研究目的及意義
1.7 研究內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 具有抑制痤瘡丙酸桿菌的無患子果皮活性成分的分離提取
2.3.1 無患子果皮提取物的制備
2.3.2 無患子活性成分提取溶劑的篩選和抑菌活性的測定
2.3.3 皂苷含量的測定
2.4 液液萃取實(shí)驗(yàn)
2.4.1 萃取劑的選擇
2.4.2 復(fù)合萃取劑比例
2.4.3 料液比
2.4.4 萃取時(shí)間
2.4.5 萃取次數(shù)
2.4.6 振蕩頻率
2.5 無患子提取物的進(jìn)一步分級純化
2.5.1 HPLC分析無患子提取物的條件
2.5.2 半制備型HPLC純化無患子提取物
2.6 抑菌組分的HPLC-DAD/MS檢測
2.7 無患子提取物抑制痤瘡丙酸桿菌機(jī)理的初探
2.7.1 樣品的制備
2.7.2 微生物的活化與傳代培養(yǎng)
2.7.3 MIC的測定
2.7.4 最低殺菌濃度的測定
2.7.5 抑菌率的測定
2.7.6 半抑菌濃度的測定
2.7.7 核酸泄漏的測定
2.7.8 K~+、Mg~(2+)含量測定
2.7.9 堿性磷酸酶含量測定
2.7.10 透射電子顯微鏡觀察
2.8 無患子提取物在面膜中的應(yīng)用初探
2.8.1 面膜基質(zhì)的篩選與制備
2.8.2 無患子提取物在面膜中適宜添加量的確定
2.8.3 面膜的感官評價(jià)
2.8.4 面膜理化指標(biāo)的測定
2.8.5 面膜的功效測評
2.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)方法
3 結(jié)果與討論
3.1 溶劑及提取工藝對抑制痤瘡丙酸桿菌的無患子活性成分提取的影響
3.1.1 皂苷得率及純度
3.1.2 MIC
3.2 SSFW的萃取工藝優(yōu)化
3.2.1 溶劑種類
3.2.2 料液比
3.2.3 萃取時(shí)間
3.2.4 萃取次數(shù)
3.2.5 振蕩頻率
3.3 EAWF的進(jìn)一步分級
3.4 分級產(chǎn)物的定性表征
3.5 EAWF抑制痤瘡丙酸桿菌機(jī)理的初探
3.5.1 MIC與MBC
3.5.2 抑菌率
3.5.3 EC_(50)
3.5.4 對大分子物質(zhì)吸光度的影響
3.5.5 對K~+、Mg~(2+)濃度的影響
3.5.6 對細(xì)胞壁通透性的影響
3.5.7 透射電子顯微鏡觀察結(jié)果
3.6 無患子提取物添加量對面膜特性的影響
3.6.1 添加量對面膜pH的影響
3.6.2 添加量對面膜粘度的影響
3.6.3 添加量對痤瘡丙酸桿菌抑制率的影響
3.6.4 添加量對脂肪酶抑制率的影響
3.6.5 添加無患子提取物的面膜感官評定
3.7 面膜的感官指標(biāo)
3.8 面膜的理化指標(biāo)
3.9 面膜的穩(wěn)定性
3.10 干燥時(shí)間
3.11 面膜的功效測評
3.11.1 保濕率
3.11.2 抑菌率
3.11.3 對酪氨酸酶的抑制率
主要結(jié)論與展望
主要結(jié)論
展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖:化合物質(zhì)譜圖
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無患子、木荷、廣玉蘭提取物組方復(fù)配及其抗稻瘟病體內(nèi)、體外活性研究[J]. 楊小輝,彭玉萌,霍光華,李芳,龍昊知. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(19)
[2]大孔樹脂吸附分離無患子皂苷的研究[J]. 歐霖拱. 日用化學(xué)品科學(xué). 2017(10)
[3]無患子洗面奶的制備[J]. 龍德權(quán). 廣東化工. 2017(13)
[4]響應(yīng)面法優(yōu)化抹茶凝膠面膜的開發(fā)[J]. 左小博,孔俊豪,蘇小琴,楊秀芳,譚蓉. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2017(13)
[5]復(fù)合酶法提取無患子總皂苷的工藝研究[J]. 鄭林祿,朱梅花,陳峰,吳艷玲,陳婉婷,林絲婷. 高師理科學(xué)刊. 2017(06)
[6]膜分離技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 朱鋆珊,馬平,郭麗. 當(dāng)代化工. 2017(06)
[7]植物成分對痤瘡桿菌抑菌作用研究進(jìn)展[J]. 沈文彤,何翔,張慧敏. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(11)
[8]工業(yè)化生產(chǎn)的無患子皂苷在洗發(fā)水中的應(yīng)用研究[J]. 張凱,龔盛昭,孫永,萬岳鵬. 廣東化工. 2015(19)
[9]超聲波輔助下薯蕷皂苷萃取中影響因素的研究[J]. 李祥,師春蘭,王麗萍. 日用化學(xué)工業(yè). 2015(05)
[10]痤瘡病因及外治法研究進(jìn)展[J]. 趙俊茹,胡冬裴. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(09)
碩士論文
[1]無患子水提物抗腫瘤研究[D]. 朱曉雯.江南大學(xué) 2016
[2]不同助溶劑作用下桉葉油對痤瘡丙酸桿菌的抑菌作用[D]. 楊柳.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[3]抗性糊精的純化及應(yīng)用特性研究[D]. 張穎.江南大學(xué) 2015
[4]薏苡仁飲料及面膜的研究與開發(fā)[D]. 吳映梅.貴州大學(xué) 2015
[5]地木耳浸提物的提取及其護(hù)膚功效基礎(chǔ)研究[D]. 康苗苗.山西大學(xué) 2015
[6]石榴皮多酚對痤瘡丙酸桿菌體外抑菌活性的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 張曉玲.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[7]塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究[D]. 王丹.天津大學(xué) 2015
[8]駝乳面膜的研制[D]. 陳宸.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[9]無患子皂苷的發(fā)酵法純化及應(yīng)用性能研究[D]. 伍恒.江南大學(xué) 2013
[10]無患子總皂苷制備工藝研究[D]. 張翠.江南大學(xué) 2012
本文編號:3634761
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