ε-聚賴氨酸（ε-PL）是由25～35個(gè)L-賴氨酸單體組成的一種天然聚合物。由于其廣譜抑菌性,被廣泛應(yīng)用于食品保鮮行業(yè)。日本最早研究并成功實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)千噸級(jí)的工業(yè)化生產(chǎn),而我國(guó)起步晚,由于菌株自身產(chǎn)ε-PL能力弱及發(fā)酵水平低等原因,目前還未完全實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。因此,對(duì)產(chǎn)ε-PL菌株研究具有重要意義。本論文主要對(duì)一株產(chǎn)ε-PL白色鏈霉菌進(jìn)行選育及發(fā)酵工藝研究,旨在提升菌株產(chǎn)ε-PL發(fā)酵水平。主要研究?jī)?nèi)容如下:1.以白色鏈霉菌（Streptomyces albulus）為出發(fā)菌株,進(jìn)行四種單因子誘變:常壓室溫等離子體（ARTP）誘變、硫酸二乙酯（DES）誘變、亞硝基胍（NTG）誘變、亞硝酸（HNO₂）誘變。以誘變得到的正突變率及最高ε-PL產(chǎn)量為指標(biāo),比較四種誘變劑的誘變效果。得到DES誘變與ARTP誘變效果較好,突變株最高ε-PL產(chǎn)量分別較出發(fā)菌株提升16.3%和14.8%。選擇6種抗生素及其他5種物質(zhì)作為“篩子”篩選突變株,對(duì)S.albulus進(jìn)行ARTP誘變結(jié)合不同“篩子”篩選。得到鏈霉素抗性突變株的正突變率最高（25%）,獲得突變株ε-PL產(chǎn)量最高（0.7 g/L... 

【文章來(lái)源】：南陽(yáng)師范學(xué)院河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ε-聚賴氨酸的結(jié)構(gòu)式

高產(chǎn)ε-聚賴氨酸白色鏈霉菌的連續(xù)誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化第7頁(yè)（共59頁(yè)）提出“兩因子”連續(xù)誘變方案，并改進(jìn)篩選突變株方法，提高其篩選效率，獲得產(chǎn)量提升幅度較大的產(chǎn)ε-PL突變株。1.5.2.3高產(chǎn)ε-PL突變株的發(fā)酵優(yōu)化對(duì)高產(chǎn)菌株進(jìn)行簡(jiǎn)單的發(fā)酵培養(yǎng)基測(cè)試，找出適合高產(chǎn)菌株發(fā)酵的培養(yǎng)基。對(duì)出發(fā)菌株與突變株生理特性進(jìn)行研究，初步揭示高產(chǎn)菌株高產(chǎn)機(jī)制。在發(fā)酵罐中對(duì)影響ε-PL合成分泌主要影響因素（pH）進(jìn)行研究，初步建立一種適合高產(chǎn)菌株生產(chǎn)ε-PL的發(fā)酵工藝，并優(yōu)化其發(fā)酵條件，進(jìn)一步提升其產(chǎn)ε-PL能力，為工業(yè)化打下基矗圖1-2為本論文主要研究?jī)?nèi)容技術(shù)路線圖。圖1-2本論文的技術(shù)路線Fig1-2Thetechnicalrouteofthisdissertatio

南陽(yáng)師范學(xué)院碩士學(xué)位論文第12頁(yè)（共59頁(yè)）圖2-1ε-PL標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-1Thecalibrationcurveofε-PLconcentration2.3.4.2突變率（RM）及正突變率（RP）計(jì)算式2-1：式2-2：式中，T代表挑選菌落總數(shù)，M代表突變菌總數(shù)（為避免誤差，選取產(chǎn)量高于或低于出發(fā)菌株5%以上的菌株），P代表ε-PL產(chǎn)量大于出發(fā)菌株5%以上的突變菌總數(shù)。2.3.5數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)分析和圖像繪制均采用GraphPadPrism5軟件處理。2.4結(jié)果與分析2.4.1單因子誘變劑量的確定2.4.1.1ARTP誘變時(shí)間的確定ARTP誘變屬于物理誘變，它通過(guò)發(fā)射高活性粒子濃度的等離子射流，將微生物細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及通透性改變，進(jìn)而引發(fā)其基因損傷，使微生物的基因序列和代謝網(wǎng)絡(luò)發(fā)生改變，最終引發(fā)微生物產(chǎn)生突變[24]。與其他誘變手段相比，它具有突變率高，誘變方法簡(jiǎn)單，對(duì)人體無(wú)害以及誘變菌株遺傳穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]ε-聚賴氨酸產(chǎn)生菌的育種、發(fā)酵及高產(chǎn)機(jī)制的初步生理解析[D]. 王靚.江南大學(xué) 2018
[2]小白鏈霉菌響應(yīng)酸性pH高產(chǎn)ε-聚賴氨酸的生理解析[D]. 任喜東.江南大學(xué) 2015
[3]ε-聚賴氨酸產(chǎn)生菌的篩選、育種及發(fā)酵研究[D]. 李樹.江南大學(xué) 2013
[4]Streptomyces sp.M-Z18發(fā)酵生產(chǎn)ε-聚賴氨酸的碳源供給策略與過(guò)程調(diào)控研究[D]. 陳旭升.江南大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3595880