新疆野蘋果（Malus sieversii）是分布在伊犁地區(qū)的新疆野果林的主要建群種,是世界罕見的蘋果天然基因?qū)殠煲彩侵匾姆N質(zhì)基因庫,然而,近半個世紀以來,野蘋果林因病害枯死率高達80%。木霉菌（Trichoderma）是一種應用前景廣闊的植物病害生物防治菌,1932年,Weindling發(fā)現(xiàn)木霉菌具有對病原菌拮抗作用,自那時起國際上已經(jīng)有100余種以木霉為主要成分的商品制劑,廣泛應用于防治農(nóng)業(yè)林業(yè)植物病害。其中主要被推廣的劑型有可濕性粉劑,顆粒劑和微膠囊劑等等。本研究首先探究出了一種以稻草,麥麩為主的菌袋形式的大量有效生產(chǎn)木霉孢子粉的哈茨木霉T2菌株固態(tài)發(fā)酵工藝,然后以該工藝生產(chǎn)出的哈茨木霉分生孢子粉為孢子原粉,對哈茨木霉可濕性粉劑加工工藝進行了初步探究,并對最終研發(fā)出的劑型對由鏈格孢茵（Alternaria alternata）引起的新疆野蘋果葉枯病進行了藥效檢測。通過對哈茨木霉T2菌株分生孢子粉菌袋形式固態(tài)發(fā)酵工藝的優(yōu)化,最終篩選出配比為57%稻草,40%麥麩,1%黃豆粉,1%玉米面,1%NH4N03和75%含水量,每袋裝入200g的發(fā)酵料配方。接種孢子懸浮液后28℃培養(yǎng)8 d... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１聚丙烯菌袋及其透氣蓋子??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ?ｂａｇ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ａｉｒ－ｐｅｒｍｅａｂｌｅ?ｃａｐ??

２．３．１．１發(fā)酵料中稻草麥麩配比優(yōu)化??生長５?ｄ后，稻草麥麩比為５７：４０和６２：３５的發(fā)酵料發(fā)酵得到的哈茨木霉孢子含量??最多，稀釋后的孢子懸浮液的吸光值為分別為０．３４８與０．２９６，二者相差不大（圖２－??２）。生長８?ｄ后，稻草麥麩比為５７：４０發(fā)酵得到的哈茨木霉孢子含量最多，稀釋后的孢??子懸浮液的吸光值為０．９８。而稻草比為４７：５０和稻草麥麩比為６７：３０發(fā)酵得到的哈茨木??霉孢子含量最少，其吸光值分別為０．４２２和０．４３２?（圖２－２）。在發(fā)酵進行到第８ｄ的時??候，可以看出此時發(fā)酵料中的稻草麥麩比例對發(fā)酵最終得到的哈茨木霉孢子含量影響非??常大，稻草含量過低，不能提供給哈茨木霉菌足夠的附著空間以供其生長，麥麩含量過??低，則營養(yǎng)不足。最終，稻草麥麩含量最優(yōu)比例采用５７：４０，在提供給木霉菌足夠營養(yǎng)??的同時又能夠保證其充足的生長空間。??發(fā)酵５天后??ＩＭＳ發(fā)酵８天后??ａ??１．０－?工??ａ?｜??ｒｆ］??０．８－?ａｂ??ｏ??ＣＤ??Ｑ?０．６－??〇??鹋?ｂ?ｂ??＾?０．４－?ｒ＊￣］?ａ??ｒ＊－?ａ??０．２－?ｂ?．??．?ｒ—?ｂ??〇．〇?——Ｕ——Ｕ——Ｕ——Ｕ——ｕ??４７：?５０?５２：?４５?５７：?４０?６２：?３５?６７：?３０??不同稻草麥麩配比梯度??

?３００??每袋所裝發(fā)酵料質(zhì)量（ｇ）??圖２－５每袋不同質(zhì)量的發(fā)酵料發(fā)酵哈茨木霉菌孢子濃度??Ｆｉｇ．?２－５?Ｓｐｏｒｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ｂｙ?Ｔ．?ｈａｒｚｉａｎｕｍ?Ｔ２?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｗｅｉｇｈｔ??２．３．２哈茨木霉Ｔ２固態(tài)發(fā)酵孢子粉收獲??菌袋形式的發(fā)酵料接種后于２８°Ｃ條件下培養(yǎng)（圖２－６）。發(fā)酵進行到５?ｄ時，菌袋??中大部分發(fā)酵料己被綠色的哈茨木霉Ｔ２的分生孢子覆蓋（圖２－７），此時還未發(fā)酵完??全。菌袋形式的發(fā)酵料發(fā)酵８?ｄ左右已經(jīng)發(fā)酵完全（圖２－８），此時為防治發(fā)酵過熟木霉??菌絲發(fā)生自融應立即打開菌袋自然干燥３－５?ｄ，利用振動篩分機篩選干燥發(fā)酵料中的哈??茨木霉分生孢子，再過２００目篩得到滿足制備可濕性粉劑的細度的哈茨木霉分生孢子粉??（圖?２－９）。??圖２－６接種后２８Ｔ培養(yǎng)中的發(fā)酵料??Ｆｉｇ．?２－６?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?２８°Ｃ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ??－１４?－??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]哈茨木霉菌多菌靈抗性選育與β-微管蛋白突變位點研究[D]. 于春生.黑龍江八一農(nóng)墾大學 2015
[2]生防菌哈茨木霉FJAT-9040固體發(fā)酵工藝的研究[D]. 曾慶才.福州大學 2014
[3]植病生防菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）的研究[D]. 張衡宇.福建農(nóng)林大學 2011
[4]木霉厚垣孢子的液體發(fā)酵及其可濕性粉劑研制[D]. 李鋒.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[5]5億活孢子/克木霉菌水分散粒劑的研制[D]. 張敏.西南大學 2008
[6]哈茨木霉H-13固體發(fā)酵工藝及其應用效果的研究[D]. 王永東.安徽農(nóng)業(yè)大學 2007



本文編號：3538515