微生物細(xì)胞內(nèi)積累的油脂是合成生物柴油與生物航煤的重要原料,油脂酵母以木質(zhì)纖維素為原料進(jìn)行油脂發(fā)酵為油脂生產(chǎn)提供了一條重要路徑。皮狀絲孢酵母（Trichosporon cutaneum）是一種典型的油脂酵母,具有優(yōu)異的木質(zhì)纖維素體系適應(yīng)性。本實(shí)驗(yàn)室利用高含油率酵母菌株的細(xì)胞密度更低的簡單原理,在木質(zhì)纖維素水解液中對T cutaneum ACCC 20271進(jìn)行了基于離心篩選的長期適應(yīng)性進(jìn)化,通過逐步增加離心力篩選到了油脂生產(chǎn)能力顯著增強(qiáng)的突變菌株TTcutaneum MS28,其油脂產(chǎn)量較原始菌株提高了2.41倍。另外,通過降低發(fā)酵液體系的粘度與密度以極盡離心篩選強(qiáng)度,獲得了油脂產(chǎn)量進(jìn)一步提升的突變菌株TTcutaneum WL97。兩株高產(chǎn)油脂酵母菌株與原始菌株相比,其細(xì)胞含油率大幅提高,可更快地利用木質(zhì)纖維素體系中全部單糖進(jìn)行油脂發(fā)酵,同時(shí)細(xì)胞壁顯著變薄、細(xì)胞體積增大。本研究主要利用qRT-PCR方法,對產(chǎn)生這些變化的分子生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行解析。研究發(fā)現(xiàn),高產(chǎn)油脂酵母細(xì)胞內(nèi)與油脂生產(chǎn)所需前體物質(zhì)（乙酰-CoA、NADPH）以及中間產(chǎn)物（脂肪酸）合成相關(guān)的部分基因發(fā)生了幾十倍的上調(diào)表達(dá)差異... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．８木質(zhì)纖維素全糖代謝相關(guān)基因ｑ－ＲＴＰＣＲ實(shí)驗(yàn)結(jié)果（ａ，葡萄糖；ｂ，木糖；ｃ，阿拉伯糖；ｄ，半??乳糖；ｅ，甘露糖）??Ｆｉｇ?２．８?Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｇｅｎｅｓ?ｒｅｓｐｏｎｓｉ?

在含有梯度濃度潮霉素的ＹＰＤ液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)７：?ＭＳ２８與工程菌株７：??ｃ逾皿ｒ歷ＭＳ２８?ＡＥＣＴＺ／ｚ／ｉＴＴ？，如圖３．５所不，工程菌株相對于Ｚ?ｃ威麗臓ＭＳ２８對潮霉??素的敏感性顯著減弱，超過１２００?ｐｇ／ｍＬ的潮霉素才可對其生長產(chǎn)生較大程度的抑制作??用。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高效液相色譜法測定酵母葡聚糖[J]. 陳少峰,望忠福.  食品科技. 2009(07)
[2]利用脂肪酸合成酶抑制劑和磷酸香草醛反應(yīng)篩選高產(chǎn)油脂酵母菌[J]. 李仁民,王菊芳,馬爽,嚴(yán)亞平,李文建.  微生物學(xué)通報(bào). 2008(04)
[3]提高酵母菌原生質(zhì)體制備與再生的方法研究[J]. 王明茲,施巧琴,周曉蘭,吳松剛.  微生物學(xué)雜志. 2005(03)

博士論文
[1]同源重組技術(shù)在釀酒酵母表達(dá)載體構(gòu)建中的應(yīng)用[D]. 陳向嶺.復(fù)旦大學(xué) 2005



本文編號：3419260