黨的十九大指出,我們要建設(shè)人與自然和諧相處的現(xiàn)代化,創(chuàng)造更多的物質(zhì)和精神財(cái)富,提供更多的優(yōu)質(zhì)生態(tài)產(chǎn)品,創(chuàng)造更加優(yōu)美的生態(tài)環(huán)境,以滿足人民日益增長的美好生活需求。以微生物為主要成分的生物肥料具有提高土壤肥力,改善土壤環(huán)境,修復(fù)土壤結(jié)構(gòu)等功效,是實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)綠色、和諧、健康、可持續(xù)發(fā)展的有效途徑。本文以地衣芽孢桿菌產(chǎn)生聚谷氨酸為研究對(duì)象,首先對(duì)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有地衣芽孢桿菌和5種市售芽孢桿菌進(jìn)行了活化、純化和搖瓶發(fā)酵水平的聚谷氨酸合成能力對(duì)比,選擇提升潛力最大的菌株,并進(jìn)行了生態(tài)學(xué)觀察和分子學(xué)鑒定,將該菌株命名為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）A2-10。隨后我們對(duì)A2-10搖瓶水平發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,通過單因素和正交實(shí)驗(yàn)確定最佳的發(fā)酵培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)裝液量為30 mL/300 mL,培養(yǎng)基配方為4.37%味精,2%葡萄糖,8%麥芽糊精,8%蛋白胨,1.5%硫酸鉀,1.45%氯化鈉,0.15%氯化鈣,0.15%硫酸鎂,接種量為5%,pH控制在6.5-7.5之間時(shí),聚谷氨酸的產(chǎn)量達(dá)到了30 g/L以上。優(yōu)化完成后通過20 L發(fā)酵罐進(jìn)行了發(fā)酵過程控制優(yōu)化,主要針對(duì)pH和... 

【文章來源】：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

多聚谷氨酸的兩種化學(xué)結(jié)構(gòu)形式

圖 2.1 地衣芽孢桿菌的菌落形態(tài)和個(gè)體形態(tài)和 16S rDNAPCR 片段平板菌落形態(tài)如圖 2.1a 所示，地衣芽孢桿菌表面光滑有光澤，不透明，邊緣不規(guī)則，整體比較濕潤，粘稠，易挑取，易拉絲，顏色呈黃棕色。圖 2.1b 所示，是菌體在草酸銨結(jié)晶紫染色后，在 100 倍油鏡下觀察到的地衣芽孢桿菌的個(gè)體形態(tài)，屬于革蘭氏陽性菌，菌體大小 0.8 μm×（1.5-3.5）μm，呈桿狀，單個(gè)或者呈直鏈狀排列。相對(duì)于其他芽孢桿菌如枯草芽孢桿菌和巨大芽孢桿菌來說，地衣芽孢桿菌整體比較小，細(xì)長。2.4.2 搖瓶發(fā)酵水平分析市售產(chǎn)生聚谷氨酸的菌株的搖瓶發(fā)酵水平實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖 2.2 所示。152025

圖 2.3 Bacillus licheniformis A2-10 與相關(guān)菌株 16S rDNA 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Bacillus licheniformis A2-10 與與相關(guān)菌株 16S rDNA 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹如上圖所示，表明 A2-10 與地衣芽孢桿菌聚為一類，與兩株地衣芽孢桿菌的種間相似性 100%，序列相似度達(dá)到 99.9%以上，可以初步將該菌鑒定為地衣芽孢桿菌并命名為 Bacillus licheniformisA2-10。2.5 本章小結(jié)本章首先將實(shí)驗(yàn)室疑似產(chǎn)生聚谷氨酸的地衣芽孢桿菌和市場(chǎng)上流通的芽孢桿菌進(jìn)行了活化，然后通過搖瓶基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)生聚谷氨酸實(shí)驗(yàn)對(duì) 6 株菌株進(jìn)行了對(duì)比實(shí)驗(yàn)，經(jīng)分析，地衣芽孢桿菌 A2-10 搖瓶發(fā)酵產(chǎn)生聚谷氨酸的含量達(dá)到了 20 g/L，高于市場(chǎng)上流通的 5 種芽孢桿菌聚谷氨酸的產(chǎn)量，因此，實(shí)驗(yàn)室地衣芽孢桿菌 A2-10 是產(chǎn)生聚谷氨酸的優(yōu)良菌株，可以作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。通過對(duì)地衣芽孢桿菌的形態(tài)觀察和分子生物學(xué)菌種鑒定，確定菌種 A2-10 是地衣芽孢桿菌，并命名為 Bacillus licheniformisA2-10。

【參考文獻(xiàn)】：
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