鹽沼鹽桿菌（Halobacterium salinarium）在細(xì)胞膜上可合成細(xì)菌視紫紅質(zhì)（BR）,BR蛋白具有光敏性。在光照條件下,BR蛋白分子迅速發(fā)生一系列分子構(gòu)型變化,再經(jīng)過構(gòu)型及中間體的轉(zhuǎn)換回到最初狀態(tài),光循環(huán)完成。研究發(fā)現(xiàn),BR蛋白是一種光敏蛋白,廣泛應(yīng)用于光電轉(zhuǎn)換器、信號儲存器、生物新興材料等方面,具有廣闊的應(yīng)用前景。論文以鹽沼鹽桿菌F0為出發(fā)菌株,依次進(jìn)行紫外誘變、微波誘變及常壓等離子體誘變。首先進(jìn)行紫外（UV）誘變,使用功率為20 W的紫外燈,處理時間3 min,樣品與燈管垂直高度為30 cm,獲得一株高產(chǎn)BR蛋白變異株UV53,其BR蛋白產(chǎn)量為67.65mg/L,相比原始菌株F0（BR蛋白產(chǎn)量為49.98 mg/L）產(chǎn)BR蛋白產(chǎn)量能力提高了35.35%;然后對突變株UV53進(jìn)行微波誘變,使用功率為900 W的微波爐,脈沖頻率2450 MHz,處理時間110 s,獲得一株高產(chǎn)BR蛋白突變株W75,其BR蛋白產(chǎn)量為94.87 mg/L,比出發(fā)菌株F0（BR蛋白產(chǎn)量為49.98 mg/L）產(chǎn)BR蛋白能力提高了89.81%;最后使用ARTP誘變系統(tǒng)誘變W75,功率設(shè)置為120... 

【文章來源】：河南大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

鹽沼鹽桿菌的菌落Fig.1-1ThecolonyofHalobacteriumsalinarium

2.4.6 高產(chǎn)突變株 AP33 的 BR 蛋白基因片段分析由上海生工測序結(jié)果可知，高產(chǎn)菌株 AP33 與原始菌株 F0 的 BR 基因相比，堿基序列無變化，基因序列未發(fā)生改變。高產(chǎn)菌株 AP33 合成的 BR 蛋白與原始菌株一致，未改變其性質(zhì)。

氨基酸的檢測使用 A300 氨基酸自動分析儀，分離模式采用濃度梯度和溫度梯度相合；緩沖液的流速設(shè)置為 0.18 mL/min，其中茚三酮的流速為 0.09 mL/min；進(jìn)樣量為0 μL，柱溫 40℃；檢測器波長 570 nm/440 nm，4.4 結(jié)果與分析4.4.1 20 種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)液檢測分析參照 4.3.1 中的檢測方法，取 20 μL 20 種標(biāo)準(zhǔn)游離氨基酸混合液進(jìn)行檢測，采用鋰系統(tǒng)分析，20 種標(biāo)準(zhǔn)游離氨基酸的分離圖譜，如圖 4-1。從圖中可以看出，圖譜基線穩(wěn)，氨基酸的峰型整齊，未出現(xiàn)平頭峰；標(biāo)品中的 20 種氨基酸彼分離徹底，從圖中清晰看出氨基酸的出峰時間以及峰高，可初步判斷出含量最多的氨基酸，也可以單一析某一種氨基酸。這種檢測分析方法快捷簡單，數(shù)據(jù)直觀可靠，對于發(fā)酵液中氨基酸分析有著廣闊的應(yīng)用前景。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3325322