通過(guò)16S r DNA測(cè)序、生理生化試驗(yàn)和MALDI-TOF MS分析,分離并鑒定了一株能產(chǎn)生高效的生物絮凝劑菌株Raoultella ornithinolytica160-1。Raoultella ornithinolytica160-1經(jīng)過(guò)24 h培養(yǎng)后分泌胞外多糖聚合物（EPS-160）,用乙醇在4℃條件下沉淀提取得到多糖粗品,通過(guò)透析袋去除離子和殘余的培養(yǎng)基成分,進(jìn)行進(jìn)一步純化得到2.76g/L多糖純品。測(cè)試純化凍干后的多糖純品絮凝活性并用不同方法檢測(cè)多糖結(jié)構(gòu)和組成。當(dāng)Al3+和Fe3+存在時(shí),EPS-160能絮凝高嶺土。在Al3+的輔助下,EPS-160的絮凝效率更高。在Al3+濃度為0.08mg/m L、EPS-160濃度為43.2mg/L時(shí),多糖絮凝劑獲得最高的絮凝效率,最高效率為97.94%。EPS-160能在1至13的p H范圍和40至100℃溫度范圍內(nèi)保存,并且能在p H在3¹0和20¹00℃的環(huán)境中保證高絮凝效率。實(shí)驗(yàn)化學(xué)分析結(jié)果顯示,EPS-160主要由蛋白質(zhì)（5.7%）和多糖（80.3%）組成。高效液相色譜測(cè)得多糖各... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

葡萄糖濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文20圖2.BSA濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig2.BSAconcentrationstandardcurve2.2.6.4高效液相色譜分析1、絮凝劑水解：取純化后的EPS-160樣品20mg溶于2M三氟乙酸溶液，在120℃水解4小時(shí)，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將三氟乙酸去除。2、HPLC檢測(cè)：HPLC：Agilent1200；色譜柱：ROA-OrganicAcidH+(8%)柱（Phenomenex，USA）[15]；檢測(cè)系統(tǒng)：示差折光檢測(cè)器；流動(dòng)相：0.005MH2SO4；柱溫：75℃；流速：0.3mL/min；進(jìn)樣體積：20μL；用葡萄糖，甘露糖，鼠李糖等糖純品做標(biāo)準(zhǔn)品，所有樣品必需通過(guò)0.45μm濾膜。3、樣品測(cè)定：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品辨識(shí)各組分性質(zhì)和含量。2.2.6.5薄層層析分析展層劑：乙酸乙酯：異丙醇：正丁醇：醋酸：水：吡啶=100:60:35:35:30:30顯色劑：取1ml苯胺將1.0g二苯胺完全溶解后，加入50ml丙酮，最后加5ml85%

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文28圖3.R.ornithinolytica160-1的基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜與進(jìn)化樹(shù)分析:(a)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜圖，(b)進(jìn)化樹(shù)Fig3.TheresultsofMALDI-TOFMSandphylogenetictreeanalysisofR.ornithinolytica160-1:(a)MALDI-TOFMS,(b)evolutionarytree

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Screening and Characterization of a Bioflocculant Produced by Aeromonas sp[J]. XIAO-MING LI1,QI YANG,KAI HUANG,GUANG-MING ZENG,DE-XIANG LIAO,JIN-JING LIU,AND WEN-FANG LONG College of Environmental Science and Engineering,Hunan University,Changsha 410082,Hunan,China.  Biomedical and Environmental Sciences. 2007(04)



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