酵母菌胞外多糖（Yeast extracellular polysaccharide,YEPS）由于其分離提取不受地域和季節(jié)等特殊條件的限制,同時還具有多種潛在應用價值,近些年來被人們廣泛應用于醫(yī)藥、食品及化妝品等行業(yè)。基于本實驗室前期的研究表明東北自然發(fā)酵豆醬中存在大量的酵母菌,尤其是在豆醬發(fā)酵的中后期階段。于是,研究從東北地區(qū)采集自然發(fā)酵豆醬樣品68份,從中分離出139株疑似酵母菌種,并篩選出1株高產(chǎn)胞外多糖的酵母菌株SN-2,隨后利用凝膠滲透色譜法對其純組分的分子量進行了測定,利用紫外全波長掃描、高效液相色譜法、甲基化分析、紅外光譜分析、核磁共振分析及掃描電鏡對其純組分的結(jié)構(gòu)進行了初步解析,通過熱重分析法對其純組分的熱穩(wěn)定性進行了分析,同時,通過MTT法、倒置顯微鏡觀察法以及對自由基的清除率等對其潛在生物學活性進行了分析,旨在為該多糖的進一步研究和應用奠定基礎(chǔ)。試驗結(jié)果如下:1.從東三省12個地區(qū)采集68份自然發(fā)酵豆醬樣品,分離出139株疑似酵母菌株,篩選得到一株高產(chǎn)YEPS酵母菌Candida ethanolica SN-2。為了提高YEPS產(chǎn)量,對其發(fā)酵工藝進行了優(yōu)化。經(jīng)優(yōu)化... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文21第三章結(jié)果與分析3.1豆醬中產(chǎn)胞外多糖酵母菌的分離篩選與菌種鑒定3.1.1酵母菌分離純化從采自12個地區(qū)的68份東北自然發(fā)酵豆醬樣品中分離出139株疑似酵母菌株，其編號及來源如表3-1所示。表3-1菌株編號Tab.3-1Strainsnumber菌株來源樣品采集地點樣品數(shù)量（份）數(shù)量（株）菌株編號東北自然發(fā)酵豆醬齊齊哈爾（QQHE）遼陽（LY）朝陽（SN）阜新（FX）丹東（DD）長春（CC）佳木斯（JMS）沈陽（SY）本溪（BX）康平（KP）通化（TH）大慶（DQ）45578358963511121512149131413979QQHE-1—QQHE-11LY-1—LY-12SN-1—SN-15FX-1—FX-12DD-1—DD-14CC-1—CC-9JMS-1—JMS-13SY-1—SY-14BX-1—BX-13KP-1—KP-9TH-1—TH-7DQ-1—DQ-93.1.2繪制標準曲線利用苯酚-硫酸法（Nehaletal，2019）對多糖產(chǎn)量進行測定，標準曲線如圖3-1。圖3-1標準曲線Fig.3-1Standardcurve

第三章結(jié)果與分析22回歸方程為：0.0208+11.339x=y（3-1）式中：y為多糖溶液在490nm處的吸光值；x為多糖溶液的濃度。3.1.3產(chǎn)胞外多糖菌株的篩選對發(fā)酵液的黏度和糖度進行綜合分析后，從分離得到的139株疑似酵母菌株中初篩出10株產(chǎn)胞外多糖的酵母菌株，分別為：丹東（DD）樣品中的2株，長春（CC）樣品中的1株，朝陽（SN）樣品中的3株，阜新（FX）樣品中的1株，康平（KP）樣品中的1株和沈陽（SY）樣品中的2株。經(jīng)過苯酚-硫酸法的復篩，來自朝陽地區(qū)的自然發(fā)酵豆醬中的菌株SN-2胞外多糖產(chǎn)量最高，因此將該菌株作為復篩入選菌株進行后續(xù)試驗。結(jié)果見表3-2。表3-2產(chǎn)胞外多糖菌株產(chǎn)糖量比較Tab.3-2ComparingofYEPS-producingyeasts菌株編號胞外多糖產(chǎn)量（mg/mL）菌株編號胞外多糖產(chǎn)量（mg/mL）DD-6DD-11CC-9SN-2SN-60.295±0.0020.497±0.0020.267±0.0030.639±0.0020.362±0.004SN-14FX-9KP-6SY-8SY-130.489±0.0020.507±0.0010.346±0.0030.421±0.0040.237±0.0023.1.4菌株傳代產(chǎn)糖穩(wěn)定性試驗經(jīng)過12次傳代產(chǎn)糖培養(yǎng)，結(jié)果如圖3-2所示，菌株的產(chǎn)糖能力較為穩(wěn)定，無菌種退化現(xiàn)象出現(xiàn)，產(chǎn)糖性狀符合試驗要求，可進行下一步的菌種鑒定及優(yōu)化培養(yǎng)。圖3-2SN-2菌株傳代培養(yǎng)的產(chǎn)糖曲線Fig.3-2ThecurveofYEPSproductionfromSN-2strainduringthecontinuousfermentation

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Isolation, Purification, and Characterization of Exopolysaccharide Produced by Leuconostoc Citreum N21 from Dried Milk Cake[J]. Yanfang Yang,Fang Feng,Qingqing Zhou,Fangkun Zhao,Renpeng Du,Zhijiang Zhou,Ye Han.  Transactions of Tianjin University. 2019(02)



本文編號：3317287