酵母菌胞外多糖（Yeast extracellular polysaccharide,YEPS）由于其分離提取不受地域和季節(jié)等特殊條件的限制,同時還具有多種潛在應(yīng)用價值,近些年來被人們廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品及化妝品等行業(yè)�；诒緦�(shí)驗(yàn)室前期的研究表明東北自然發(fā)酵豆醬中存在大量的酵母菌,尤其是在豆醬發(fā)酵的中后期階段。于是,研究從東北地區(qū)采集自然發(fā)酵豆醬樣品68份,從中分離出139株疑似酵母菌種,并篩選出1株高產(chǎn)胞外多糖的酵母菌株SN-2,隨后利用凝膠滲透色譜法對其純組分的分子量進(jìn)行了測定,利用紫外全波長掃描、高效液相色譜法、甲基化分析、紅外光譜分析、核磁共振分析及掃描電鏡對其純組分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步解析,通過熱重分析法對其純組分的熱穩(wěn)定性進(jìn)行了分析,同時,通過MTT法、倒置顯微鏡觀察法以及對自由基的清除率等對其潛在生物學(xué)活性進(jìn)行了分析,旨在為該多糖的進(jìn)一步研究和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.從東三省12個地區(qū)采集68份自然發(fā)酵豆醬樣品,分離出139株疑似酵母菌株,篩選得到一株高產(chǎn)YEPS酵母菌Candida ethanolica SN-2。為了提高YEPS產(chǎn)量,對其發(fā)酵工藝進(jìn)行了優(yōu)化。經(jīng)優(yōu)化... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文21第三章結(jié)果與分析3.1豆醬中產(chǎn)胞外多糖酵母菌的分離篩選與菌種鑒定3.1.1酵母菌分離純化從采自12個地區(qū)的68份東北自然發(fā)酵豆醬樣品中分離出139株疑似酵母菌株，其編號及來源如表3-1所示。表3-1菌株編號Tab.3-1Strainsnumber菌株來源樣品采集地點(diǎn)樣品數(shù)量（份）數(shù)量（株）菌株編號東北自然發(fā)酵豆醬齊齊哈爾（QQHE）遼陽（LY）朝陽（SN）阜新（FX）丹東（DD）長春（CC）佳木斯（JMS）沈陽（SY）本溪（BX）康平（KP）通化（TH）大慶（DQ）45578358963511121512149131413979QQHE-1—QQHE-11LY-1—LY-12SN-1—SN-15FX-1—FX-12DD-1—DD-14CC-1—CC-9JMS-1—JMS-13SY-1—SY-14BX-1—BX-13KP-1—KP-9TH-1—TH-7DQ-1—DQ-93.1.2繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線利用苯酚-硫酸法（Nehaletal，2019）對多糖產(chǎn)量進(jìn)行測定，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3-1。圖3-1標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.3-1Standardcurve

第三章結(jié)果與分析22回歸方程為：0.0208+11.339x=y（3-1）式中：y為多糖溶液在490nm處的吸光值；x為多糖溶液的濃度。3.1.3產(chǎn)胞外多糖菌株的篩選對發(fā)酵液的黏度和糖度進(jìn)行綜合分析后，從分離得到的139株疑似酵母菌株中初篩出10株產(chǎn)胞外多糖的酵母菌株，分別為：丹東（DD）樣品中的2株，長春（CC）樣品中的1株，朝陽（SN）樣品中的3株，阜新（FX）樣品中的1株，康平（KP）樣品中的1株和沈陽（SY）樣品中的2株。經(jīng)過苯酚-硫酸法的復(fù)篩，來自朝陽地區(qū)的自然發(fā)酵豆醬中的菌株SN-2胞外多糖產(chǎn)量最高，因此將該菌株作為復(fù)篩入選菌株進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。結(jié)果見表3-2。表3-2產(chǎn)胞外多糖菌株產(chǎn)糖量比較Tab.3-2ComparingofYEPS-producingyeasts菌株編號胞外多糖產(chǎn)量（mg/mL）菌株編號胞外多糖產(chǎn)量（mg/mL）DD-6DD-11CC-9SN-2SN-60.295±0.0020.497±0.0020.267±0.0030.639±0.0020.362±0.004SN-14FX-9KP-6SY-8SY-130.489±0.0020.507±0.0010.346±0.0030.421±0.0040.237±0.0023.1.4菌株傳代產(chǎn)糖穩(wěn)定性試驗(yàn)經(jīng)過12次傳代產(chǎn)糖培養(yǎng)，結(jié)果如圖3-2所示，菌株的產(chǎn)糖能力較為穩(wěn)定，無菌種退化現(xiàn)象出現(xiàn)，產(chǎn)糖性狀符合試驗(yàn)要求，可進(jìn)行下一步的菌種鑒定及優(yōu)化培養(yǎng)。圖3-2SN-2菌株傳代培養(yǎng)的產(chǎn)糖曲線Fig.3-2ThecurveofYEPSproductionfromSN-2strainduringthecontinuousfermentation

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Isolation, Purification, and Characterization of Exopolysaccharide Produced by Leuconostoc Citreum N21 from Dried Milk Cake[J]. Yanfang Yang,Fang Feng,Qingqing Zhou,Fangkun Zhao,Renpeng Du,Zhijiang Zhou,Ye Han.  Transactions of Tianjin University. 2019(02)



本文編號：3317287