環(huán)糊精/聚乙二醇自組裝形成的水凝膠,具有較好的親水性、生物相容性、滲透性和機(jī)械強(qiáng)度等特性,有望在生物大分子固定化方面得到應(yīng)用。本論文中,將四臂聚乙二醇衍生物與α-環(huán)糊精自組裝并交聯(lián),形成聚輪烷（PRX）水凝膠,對(duì)酶進(jìn)行負(fù)載,并對(duì)其結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和應(yīng)用進(jìn)行考察。首先,將穿環(huán)了α-環(huán)糊精的四臂聚乙二醇硫醇（4arm-PEG-SH）末端巰基用過氧化氫氧化,成功地制得了PRX水凝膠,并負(fù)載了脲酶及葡萄糖氧化酶。利用紅外光譜,X射線粉末衍射和掃描電鏡等分析方法對(duì)PRX水凝膠的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,結(jié)果表明制備的水凝膠具有準(zhǔn)聚輪烷的通道型特征結(jié)構(gòu)及多孔的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)。當(dāng)4arm-PEG-SH/α-CD質(zhì)量比為1:2時(shí),形成的PRX水凝膠結(jié)構(gòu)致密,且機(jī)械強(qiáng)度好。其次,考察了PRX水凝膠負(fù)載脲酶和葡萄糖氧化酶的酶活及穩(wěn)定性,并從分子結(jié)構(gòu)方面比較了兩種固定化酶的酶學(xué)性質(zhì)差異。結(jié)果表明,PRX水凝膠負(fù)載脲酶后并沒有表現(xiàn)出明顯的活性,可能是脲酶活性中心附近的游離巰基被氧化所致;而PRX水凝膠負(fù)載葡萄糖氧化酶的酶活相對(duì)比較穩(wěn)定,且對(duì)pH的耐受性較好,在酸性和中性條件下仍能保持一定的酶活。由于氧化法制備的PRX凝膠對(duì)還原劑比較... 

【文章來源】：華僑大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

三種環(huán)糊精的空腔結(jié)構(gòu)以及立體結(jié)構(gòu)

4圖1.3利用點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)交聯(lián)的穩(wěn)定PEG/α-CD聚輪烷水凝膠Fig.1.3ThestablePEG/α-CDPRXhydrogelcross-linkedbyclick-chemicalreaction1.2巰基/二硫鍵反應(yīng)1.2.1巰基/二硫鍵交換反應(yīng)巰基/二硫鍵交換反應(yīng)是酶偶聯(lián)反應(yīng)的一種，指帶—SH的載體，通過巰基/二巰基的交換反應(yīng)和生物分子上非必需巰基偶聯(lián)。其總反應(yīng)可以分為圖1.4中的幾個(gè)步驟，2mol的硫醇基團(tuán)轉(zhuǎn)化為1mol的二硫化合物需要半摩爾的氧分子，其中主要的限速步驟為P-S-與氧氣的反應(yīng)，所以在反應(yīng)過程中需注意氧氣的使用量[12,13]。因?yàn)閹�基/二硫鍵交換反應(yīng)可以通過還原劑如二硫蘇糖醇（DTT）、還原型谷胱甘肽（GSH）等使二硫鍵斷裂，故可以通過其氧化還原特性制備氧化還原型功能水凝膠。圖1.4巰基氧化為二硫鍵的反應(yīng)機(jī)理Fig.1.4Thereactionmechanismofsulphydrylgroupoxidationtodisulfidebond

4圖1.3利用點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)交聯(lián)的穩(wěn)定PEG/α-CD聚輪烷水凝膠Fig.1.3ThestablePEG/α-CDPRXhydrogelcross-linkedbyclick-chemicalreaction1.2巰基/二硫鍵反應(yīng)1.2.1巰基/二硫鍵交換反應(yīng)巰基/二硫鍵交換反應(yīng)是酶偶聯(lián)反應(yīng)的一種，指帶—SH的載體，通過巰基/二巰基的交換反應(yīng)和生物分子上非必需巰基偶聯(lián)。其總反應(yīng)可以分為圖1.4中的幾個(gè)步驟，2mol的硫醇基團(tuán)轉(zhuǎn)化為1mol的二硫化合物需要半摩爾的氧分子，其中主要的限速步驟為P-S-與氧氣的反應(yīng)，所以在反應(yīng)過程中需注意氧氣的使用量[12,13]。因?yàn)閹�基/二硫鍵交換反應(yīng)可以通過還原劑如二硫蘇糖醇（DTT）、還原型谷胱甘肽（GSH）等使二硫鍵斷裂，故可以通過其氧化還原特性制備氧化還原型功能水凝膠。圖1.4巰基氧化為二硫鍵的反應(yīng)機(jī)理Fig.1.4Thereactionmechanismofsulphydrylgroupoxidationtodisulfidebond

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3238495