林可霉素是林可酰胺類抗生素中的一種,在臨床應(yīng)用廣泛。本課題以降低林可霉素B含量為目標(biāo),以滲透壓調(diào)節(jié)為切入點(diǎn),從搖瓶?jī)?yōu)化放大至15L發(fā)酵罐,并研究了滲透壓影響林可霉素合成的機(jī)理。首先通過搖瓶實(shí)驗(yàn)確定林可霉素發(fā)酵合適的初始滲透壓范圍為0.860-1.355 Osmol/kg。利用中心組合設(shè)計(jì)對(duì)滲透壓調(diào)節(jié)劑（氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣）與保護(hù)劑（甘油、甘露醇、甜菜堿、甘氨酸、脯氨酸）及抗氧化劑（半胱氨酸）進(jìn)行組合優(yōu)化,得到最優(yōu)條件為:氯化鈉10.93 g/L,甘油2.25 g/L,脯氨酸0.057g/L。搖瓶驗(yàn)證結(jié)果為,林可霉素B含量為1.42%,相比對(duì)照（3.58%）降低60.33%;產(chǎn)物林可霉素A效價(jià)為5795 U/mL,相比對(duì)照（4326 U/mL）提高33.96%。進(jìn)一步在15 L發(fā)酵罐上研究滲透壓調(diào)節(jié)對(duì)林可霉素發(fā)酵的影響,發(fā)現(xiàn)添加10 g/LNaCl后林可霉素B含量顯著降低,放罐時(shí),條件罐的林可霉素B含量（5.78%）相比對(duì)照罐（8.20%）顯著降低29.51%。建立了林可鏈霉菌中含硫代謝物半胱氨酸、高半胱氨酸、麥角硫因等物質(zhì)的測(cè)定方法。添加NaCl后半胱氨酸含量較對(duì)照低而高半胱氨酸含... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１不同菌株的林可霉素生物合成基因簇Ｍ??１７

取丨ｍＬ發(fā)酵液，室溫ｌＯＯＯＯｒｐｍ離心ｌＯｍｉｎ，取上清液，用流動(dòng)相稀釋至預(yù)估效價(jià)??為１０００?Ｕ／ｍＬ，用０．２２?ｐｍ的水系濾膜過濾后備用。??２）測(cè)試條件及色譜柱??流動(dòng)相：４０％的５０１１１１１１〇丨幾乙酸銨溶液與６０％的甲醇，流速為０．４１１１１７１１１丨１１；色譜柱：??Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ?Ｐｌｕｓ?Ｃ１８－Ａ色譜柱（北京迪馬科技有限公司），２５〇ｘ４．６?ｍｍ，５?（ａｍ；柱溫設(shè)??定為３０?°Ｃ，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為２１０?ｎｍ，進(jìn)樣量設(shè)定為２０?ｐＬ。通過外標(biāo)法測(cè)定產(chǎn)物林可??霉素Ａ的效價(jià)，其中雜質(zhì)林可霉素Ｂ含量計(jì)算見公式（２－２）：??Ｌｉｎ?Ｂ％?＝——〇〇?公式（２－２）??ＬｉｎＡ峰面積＋ＬｉｎＢ峰面積??３）林可霉素Ａ與雜質(zhì)Ｂ組分標(biāo)準(zhǔn)品的液相圖譜，見圖２．１所示。??

華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文?第２１頁??廂始數(shù)據(jù)過濾???］［???ｔｍｍｓｍｓ?????］［???ｓ因組注釋?——比對(duì)到參考ｓ因組???｛???比對(duì)結(jié)果評(píng)估???Ｔ??Ｉ??轉(zhuǎn)？本結(jié)構(gòu)分析?衷達(dá)塞男ｓ因分枳??”?＇，?”?”?備?，〖?＾?士??認(rèn)ｐ“《；?新拜錄本?ＳＲＮＡ?娜子分?ＵＴｂ〇？?Ｇ〇?ＫＥＧＧ?８異基因??５ＮＰＷ?獅?分析析?ｕｉｋｗｗ?苗集分柝?Ｓ集分枳?緊類分ｔｆＦ??圖２．４?ＲＮＡ－ｓｅｑ的生物信息學(xué)分析流程??Ｆｉｇ?２．４?Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ＲＮＡ－ｓｅｑ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]林可霉素發(fā)酵工藝優(yōu)化及代謝分析[D]. 莊智慧.華東理工大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3236446