藥食用真菌以其獨特的天然活性和藥用價值越來越被科研工作者所重視,尤其昆蟲寄生真菌如冬蟲夏草、蛹蟲草等已被研究證明具有極高的藥用價值。白蟻球菌Fibularhizoctonia sp.是在圓唇散白蟻巢穴中發(fā)現(xiàn)的共生真菌,前期研究發(fā)現(xiàn)其菌絲體生長繁殖能力強、產(chǎn)量高,富含三萜類化合物和真菌多糖等生物活性物質(zhì),在真菌資源可利用方面,具有非常好的開發(fā)前景。本論文主要針對白蟻球菌的退化與復壯、菌絲體安全性和活性物質(zhì),開展白蟻球菌在擴大培養(yǎng)中質(zhì)量檢測指標和潛在藥食用價值方面的研究,以期為白蟻球菌未來的開發(fā)提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）菌株復壯。為保持菌種的優(yōu)良性狀,通過對不同傳代次數(shù)菌株質(zhì)量的顯微檢測,制定了其優(yōu)良性狀的觀察指標和保藏方法,菌絲結(jié)構(gòu)粗壯強健、菌絲潔白、分枝繁茂具有良好擴散活性即可作為傳代和保藏的母株,而且要嚴格控制傳代次數(shù)在3代以內(nèi),當發(fā)生退化老化現(xiàn)象時應及時進行質(zhì)量檢測篩選,可通過改良的尖端分離復壯技術(shù)篩選保持原有繁殖能力的菌株。（2）菌絲體安全性。急性毒性試驗表明,雌雄大鼠未有死亡,試驗動物解剖顯示各器官未出現(xiàn)明顯的病理性變化雌雄大鼠經(jīng)口最大耐受劑量（MTD）灌胃,顯示該菌絲... 

【文章來源】：西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

第二章白蟻球菌的生殖方式及復壯培養(yǎng)19圖2-1不同傳代次數(shù)的菌核形態(tài)Fig.2-1Sclerotiamorphologyatdifferentpassages附注1：圖A為原始正常菌核形狀，圖B為第3代轉(zhuǎn)接后成熟菌核形狀，圖C、D分別為第4和第5代轉(zhuǎn)接后成熟的菌核形狀。2.4.2菌種的生殖方式掃描電鏡下我們觀察其菌絲體特征，發(fā)現(xiàn)液體培養(yǎng)條件下沒有產(chǎn)生孢子，也沒有產(chǎn)生孢子的孢子�；蜴咦幽�，因此我們推斷該菌絲體的生長是通過極化的方式進行極性生長（polarizedgrowth），通過產(chǎn)生豐富的營養(yǎng)菌絲，依賴頂端的頂體（Spitzenkrper）等結(jié)構(gòu)進行極性生長。目前，在實驗室人工培養(yǎng)狀態(tài)下尚未發(fā)現(xiàn)該菌絲體有進行其他方式的生長繁殖，但在圖2-2中B和D圖倍數(shù)下，我們可以清晰看到菌絲體明顯具有鎖狀聯(lián)合的突起結(jié)構(gòu)存在，具有雙核菌絲特征，與單核菌絲相比，它在基質(zhì)上生長速度更快、菌絲結(jié)構(gòu)更粗壯強艦分枝更加繁茂，是優(yōu)良遺傳性狀的表現(xiàn)，為其擴大培養(yǎng)提供了生殖優(yōu)勢，同時雙核菌絲也是擔子菌類藥（食）用營養(yǎng)菌絲存在的主要形式。

西北大學碩士學位論文20圖2-2掃描電鏡下的菌絲形態(tài)Fig.2-2Mycelialmorphologyunderscanningelectronmicroscope附注2：圖A-D為菌絲體在不同倍數(shù)下的場發(fā)射掃描電鏡圖2.4.3尖端分離復壯菌株長勢傳代培養(yǎng)至3代以后的菌株在固體培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)時，菌絲日平均生長速度為0.43cm/d，遠低于3代以前0.62cm/d的速度，菌核成熟期變?yōu)?2d以上，傳代次數(shù)越多生長越緩慢，甚至不再能全部形成成熟菌核；同時轉(zhuǎn)接至液體條件下培養(yǎng)時，干燥的純菌絲所得量由1.02g/80mL降低至0.56g/80mL及以下，菌絲體擴大培養(yǎng)出現(xiàn)明顯下降。經(jīng)改良后的尖端分離復壯培養(yǎng)，篩選出的菌株恢復至0.55～0.62cm/d的生長速度，且液體培養(yǎng)純菌絲量平均可達到0.98g/80mL，繼續(xù)作為菌株母種保藏并進行繁殖培養(yǎng)，但傳代次數(shù)應當控制于三代以內(nèi)。圖2-3為菌種篩選培養(yǎng)過程中菌絲在不同時間段內(nèi)的生長擴散情況，在篩選過程中，我們將具有擴散能力強的菌核及擴散出的尖端菌絲大量轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)接的絕大部分菌絲生長繁殖旺盛，在13d時長滿固體培養(yǎng)基，但并不會成為成熟菌核，而是依舊具有擴散能力，繼續(xù)分離培養(yǎng)時可再次形成圓球菌種菌核形態(tài)。

【參考文獻】：
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