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血紅密孔菌漆酶的分離純化及其對(duì)工業(yè)染料的脫色

發(fā)布時(shí)間:2021-05-17 13:33
  漆酶(laccase,EC 1.10.3.2),又名對(duì)苯二酚:氧化還原酶(benzenediol:oxygen oxidoreductase),是指一類含銅的多酚氧化酶,其在環(huán)境污染物生物修復(fù)、生物能源生產(chǎn)、化合物合成及生物檢測(cè)等領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用潛力。本論文以白腐菌——血紅密孔菌Pycnoporus sanguineus MX5為漆酶生產(chǎn)菌株,研究了其發(fā)酵產(chǎn)酶條件、粗酶液的分離純化、純酶液的酶學(xué)性質(zhì)以及其對(duì)染料的脫色能力,目的是為了探索未知的真菌漆酶種類,并發(fā)現(xiàn)其潛在的工業(yè)應(yīng)用潛力。全文的主要結(jié)論如下:分別通過添加誘導(dǎo)劑、表面活性劑及真菌共培養(yǎng)這3種方式,對(duì)P.sanguineus MX5液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)漆酶的條件進(jìn)行了部分優(yōu)化,首先設(shè)置不同的濃度梯度,接著采用多重比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,最終發(fā)現(xiàn)鄰甲苯胺、吐溫80、Gongronella sp.w5的接種量(v/v)分別為0.006%、0.04%和2%時(shí),其誘導(dǎo)效果最好,達(dá)到頂峰時(shí)的漆酶產(chǎn)量分別為20980.55、12724.07和9389.81 U/L,較對(duì)照提高36.25%、119.93%和42.13%。經(jīng)過超濾濃縮、硫酸銨分級(jí)沉淀、透析、D... 

【文章來源】:浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 漆酶簡(jiǎn)介
        1.1.1 漆酶的來源
        1.1.2 漆酶的結(jié)構(gòu)及活性中心
        1.1.3 漆酶的催化機(jī)理
        1.1.4 漆酶的底物特異性
        1.1.5 漆酶介體系統(tǒng)
    1.2 真菌漆酶
        1.2.1 白腐菌漆酶
        1.2.2 真菌漆酶的優(yōu)化培養(yǎng)
        1.2.3 真菌漆酶的分離純化
        1.2.4 真菌漆酶的理化特性
        1.2.5 真菌漆酶的序列同源性
    1.3 漆酶的應(yīng)用
        1.3.1 工業(yè)染料的脫色降解
        1.3.2 環(huán)境污染物的生物修復(fù)
        1.3.3 生物檢測(cè)
        1.3.4 化合物合成
        1.3.5 抗增殖和抗HIV活性
        1.3.6 紡織、造紙、生物能源及食品工業(yè)
    1.4 本論文的研究?jī)?nèi)容與意義
2 血紅密孔菌漆酶的優(yōu)化培養(yǎng)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 鄰甲苯胺對(duì)漆酶分泌的影響
        2.2.2 吐溫80對(duì)漆酶分泌的影響
        2.2.3 共培養(yǎng)系統(tǒng)對(duì)漆酶分泌的影響
    2.3 討論
3 血紅密孔菌漆酶的分離純化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 漆酶的分離純化結(jié)果
        3.2.2 漆酶的酶譜分析結(jié)果
        3.2.3 漆酶同工酶的光譜特征
        3.2.4 漆酶的部分氨基酸序列
    3.3 討論
4 血紅密孔菌漆酶的酶學(xué)性質(zhì)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 pH值對(duì)漆酶活力的影響及其pH穩(wěn)定性
        4.2.2 溫度對(duì)漆酶活力的影響及其熱穩(wěn)定性
        4.2.3 漆酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定
        4.2.4 抑制劑及金屬離子對(duì)漆酶活力的影響
    4.3 討論
5 血紅密孔菌漆酶對(duì)染料的脫色作用
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 反應(yīng)體系中的染料濃度
        5.2.2 漆酶及LMS對(duì)染料脫色的影響
    5.3 討論
6 全文總結(jié)
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 不足與展望
參考文獻(xiàn)
附錄 本文中專業(yè)術(shù)語縮寫及中英文對(duì)照表
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào):3191852

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