牛樟芝是中國臺灣特有的一種稀有藥用真菌,只寄生在倒伏枯死牛樟樹的心材內(nèi)壁,難以獲得。牛樟芝具有很強的藥用作用,其菌絲體中特有的泛醌類化合物4-acetylantroquinonol B（以下簡稱4AAQB）對肝癌細胞Heph2具有明顯的抑制作用,可作為一種潛在的抗癌藥物。但由于其生長條件的限制,無法大規(guī)模生產(chǎn)。本實驗以液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)的方式獲得菌絲體,以改進子實體培養(yǎng)所帶來的生產(chǎn)周期長和質(zhì)量不穩(wěn)定等缺點。在液態(tài)發(fā)酵中使用發(fā)酵耦合提取新工藝,使原本胞內(nèi)產(chǎn)物流向胞外,被發(fā)酵液中提取劑富集,實現(xiàn)初步分離。主要工作內(nèi)容如下:一、通過對各類含苯環(huán)類物質(zhì)等外源添加物的種類,添加時間,添加量進行探究,成功篩選出第發(fā)酵過程第6 d添加0.008%（m/v）的對甲基苯甲酸,其做為小分子物質(zhì)添加低濃度即可大幅提升牛樟芝菌絲體中的4AAQB和三萜類化合物,產(chǎn)量分別為0.57 mg/g和130.26 mg/g,較空白對照組提升了 3.35倍和1.61倍。在目前的研究中尚數(shù)首次,可以避免以往的外源添加物量大,成分復雜造成后續(xù)分離困難等因素,對牛樟芝合成4AAQB和三萜類化合物的代謝途徑研究具有指導意義。二、實驗中對... 

【文章來源】：北京化工大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
學位論文數(shù)據(jù)集
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 牛樟芝簡介
        1.1.1 牛樟芝的發(fā)現(xiàn)與命名
        1.1.2 牛樟芝的生物學特性
    1.2 牛樟芝的人工培養(yǎng)方式
        1.2.1 椴木培養(yǎng)
        1.2.2 固體發(fā)酵培養(yǎng)
        1.2.3 液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)
        1.2.4 發(fā)酵耦合提取技術
    1.3 牛樟芝活性成分與藥理活性
        1.3.1 牛樟芝多糖類與糖蛋白類
        1.3.2 三萜類化合物
        1.3.3 腺苷
        1.3.4 超氧化物歧化酶
        1.3.5 泛醌類化合物
    1.4 課題研究目的及意義
    1.5 本論文研究內(nèi)容
第二章 外源添加物對牛樟芝活性成分的影響
    2.1 實驗材料與設備
        2.1.1 實驗菌種
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 實驗設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 固體平板培養(yǎng)方法
        2.2.2 固體斜面培養(yǎng)方法
        2.2.3 孢子懸液制備方法
        2.2.4 液體種子培養(yǎng)方法
        2.2.5 生物量測定方法
        2.2.6 胞外多糖測定方法
        2.2.7 菌絲體中三萜類化合物測定方法
        2.2.8 菌絲體中4-acetylantroquinonol B的測定
    2.3 實驗設計
        2.3.1 牛樟芝發(fā)酵生長曲線的繪制
        2.3.2 外源添加物的選擇
        2.3.3 含苯環(huán)氨基酸對牛樟芝活性成分的影響
        2.3.4 抗生素對牛樟芝活性成分的影響
        2.3.5 對甲基苯甲酸乙酯對牛樟芝活性產(chǎn)物的影響
        2.3.6 添加三種甲基苯甲酸對牛樟芝活性成分的影響
        2.3.7 甲苯對牛樟芝活性成分的影響
        2.3.8 對甲基苯甲酸濃度對牛樟芝活性成分的影響
        2.3.9 對甲基苯甲酸添加時間對牛樟芝活性成分的影響
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 牛樟芝發(fā)酵生長曲線的繪制
        2.4.2 外源添加物的選擇
        2.4.3 含苯環(huán)氨基酸對牛樟芝活性成分的影響
        2.4.4 抗生素對牛樟芝活性成分的影響
        2.4.5 對甲基苯甲酸乙酯對牛樟芝活性產(chǎn)物的影響
        2.4.6 添加三種甲基苯甲酸對牛樟芝活性成分的影響
        2.4.7 甲苯對牛樟芝活性成分的影響
        2.4.8 對甲基苯甲酸濃度對牛樟芝活性成分的影響
        2.4.9 對甲基苯甲酸添加時間對牛樟芝活性成分的影響
    2.5 本章小結(jié)
第三章 牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB工藝的初步探究
    3.1 實驗材料與設備
        3.1.1 實驗菌種及培養(yǎng)基
        3.1.2 實驗試劑
        3.1.3 實驗設備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 發(fā)酵液中4-acetylantroquinonol B的測定
    3.3 實驗設計
        3.3.1 表面活性劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.3.2 提取劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.3.3 表面活性劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.3.4 提取劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.3.5 Tween-80添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.3.6 油酸添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 表面活性劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.4.2 提取劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.4.3 表面活性劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.4.4 提取劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.4.5 Tween-80添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
        3.4.6 油酸添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB的影響
    3.5 本章小結(jié)
第四章 牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物工藝的初步探究
    4.1 實驗材料與設備
        4.1.1 實驗菌種及培養(yǎng)基
        4.1.2 實驗試劑
        4.1.3 實驗設備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 發(fā)酵液中三萜類化合物的測定
    4.3 實驗設計
        4.3.1 提取劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.3.2 表面活性劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.3.3 提取劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.3.4 Tween-80添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.3.5 油酸添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 提取劑種類的選取對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.4.2 表面活性劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.4.3 提取劑添加量對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.4.4 Tween-80添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
        4.4.5 油酸添加天數(shù)對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)三萜類化合物的影響
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)合驗證實驗
    5.1 實驗材料與設備
        5.1.1 實驗菌種及培養(yǎng)基
        5.1.2 實驗試劑
        5.1.3 實驗設備
    5.2 實驗方法
    5.3 實驗設計
        5.3.1 單獨添加油酸對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB和三萜類化合物的影響
        5.3.2 添加外源添加物對發(fā)酵耦合提取工藝產(chǎn)活性成分的影響
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 單獨添加油酸對牛樟芝發(fā)酵耦合提取產(chǎn)4AAQB和三萜類化合物的影響
        5.4.2 添加外源添加物對發(fā)酵耦合提取工藝產(chǎn)活性成分的影響
    5.5 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻
致謝
研究成果和發(fā)表的學術論文
作者及導師簡介
附件



本文編號：3183869