發(fā)布時間：2021-04-11 22:02

　　羥基脂肪酸（HFA）是具有很大應(yīng)用價值的脂肪酸,因為它們同時含有羥基和羧基,無論在高性能的材料、食品、乳化劑還是醫(yī)療等方面都有巨大的開發(fā)前景。在眾多的羥基脂肪酸中,10-羥基癸酸憑借羥基和羧基位于在碳鏈的兩端這個特點脫穎而出,它能為高性能材料提供更優(yōu)良的性能,也是合成一些重要保健物質(zhì)的重要中間體,目前,10-羥基癸酸化學(xué)合成的產(chǎn)率不高,限制了其應(yīng)用。如果能在微生物中合成10-羥基癸酸,將帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益。熱帶假絲酵母（C andida tropicalis）是一種能夠利用烷烴和油脂的微生物,它有很強(qiáng)的ω-氧化途徑,為生產(chǎn)10-羥基癸酸提供了先天的條件。本研究開發(fā)了C.tropicalis 1798基因無痕編輯操作技術(shù),實現(xiàn)了該菌株目的基因的高效敲除,同時研究了C.tropi calis 1798中4種脂肪醇脫氫酶在10-羥基癸酸合成中的作用,為熱帶假絲酵母的更好開發(fā)和未來10-羥基癸酸的生產(chǎn)奠定堅實的基礎(chǔ)。主要進(jìn)行的研究和結(jié)果如下:（1）本研究探索構(gòu)建一套基于Cas9高效編輯C.tropicalis 1798基因的方法,在構(gòu)建過程中嘗試不同的方案,并最終獲得一套能夠編輯C.tropi... 

【文章來源】：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PHA結(jié)構(gòu)圖

齊魯工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 1.1 PHA 結(jié)構(gòu)圖Figure 1.1 PHA structure diagram基-2-癸烯酸（縮寫 10-HDA）是蜂王漿和蜂王漿功能性成分中的蜂王漿質(zhì)量的好壞其中一個重要的參考指標(biāo)便是 10-HDA。到目前只有蜜蜂能合成，經(jīng)各國科學(xué)家的研究發(fā)現(xiàn)，10-HDA 具有抗菌抗它能抑制腫瘤生長，抵抗癌癥[29]。還能夠增強(qiáng)身體免疫能力，降結(jié)構(gòu)如圖 1.2。

圖 1.4 C. tropicalis 生產(chǎn)羥基脂肪酸推測路徑圖Figure 1.4 Estimated path map of hydroxy fatty acids produced by C. tropicalis1.2.2 HFAs 合成中關(guān)鍵酶概述在熱帶假絲酵母中以烷烴為底物合成羥基脂肪主要是依靠 P450 單加氧酶，但是降解推測主要是醇脫氫酶，熱帶假絲酵母中的 P450 酶，研究比較透徹的主要是Ⅱ型 P450 酶，但對羥基脂肪酸分解路徑中的關(guān)鍵酶—醇脫氫酶，只是通過對比其他酵母發(fā)現(xiàn)熱帶假絲酵母中存在 4 種脫氫酶，但是其確實并未有很深入的研究。目前，有關(guān)酵母的 ADH 研究比較淺顯，并且有關(guān)熱帶假絲酵母中脂肪醇脫氫酶的研究幾乎沒有，有關(guān) C. tropicalis 的 ADH 探究也全部集中在 ADH1 和ADH2 中，相比較熱帶假絲酵母，釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）研究的相對較多。在解脂耶氏酵母中，實際上醇氧化酶不會將羥基脂肪酸氧化成二酸，而是脂肪醇脫氫酶和 P450 酶，其中起主要作用的是脂肪醇脫氫酶。但是相比較解脂耶氏酵母，釀酒酵母中的 ADH 研究透徹，其他酵母研究 ADH 時，也是以釀酒酵母的 ADH 進(jìn)行類比和鑒定的[59-60]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]生物催化生產(chǎn)十三碳二元酸中β-氧化途徑的代謝調(diào)控[D]. 高弘.清華大學(xué) 2005

碩士論文
[1]先進(jìn)燃料生物基脂肪酸及其衍生物的生物合成研究[D]. 秦丹丹.重慶大學(xué) 2017
[2]利用大腸桿菌代謝工程合成中鏈ω-羥基脂肪酸的研究[D]. 肖康.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017



本文編號：3132034