蟬花是一種傳統(tǒng)的藥食兩用真菌,而蟬擬青霉（Paecilomyces cicadae）是蟬花的無(wú)性階段,含有多種氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、多糖、皂苷、蟲(chóng)草素等多種營(yíng)養(yǎng)成分和生藥學(xué)成分。針對(duì)天然蟬花資源匱乏,人工栽培蟬花困難等蟬花資源利用的瓶頸以及對(duì)蟬花活性成分研究甚少問(wèn)題,本論文利用液態(tài)深層發(fā)酵技術(shù)開(kāi)發(fā)利用蟬擬青霉菌絲體資源以期滿足市場(chǎng)的蟬花需求同時(shí)對(duì)蟬花皂苷活性成分進(jìn)行研究。主要研究?jī)?nèi)容包括:尿素協(xié)同培養(yǎng)基成分以及培養(yǎng)條件共同促進(jìn)蟬擬青霉胞外皂苷的合成;利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究尿素調(diào)節(jié)蟬擬青霉胞外皂苷合成的機(jī)制以及尿素對(duì)蟬擬青霉胞外皂苷抗氧化活性的影響,得到以下研究成果:（1）通過(guò)碳氮源、無(wú)機(jī)鹽、營(yíng)養(yǎng)因子的單因素分析及它們協(xié)同尿素增強(qiáng)皂苷合成的響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn),得到高產(chǎn)蟬擬青霉胞外皂苷的最佳培養(yǎng)基組分,即麩皮3.7%、木糖4.43%、果糖4.73%、甘油1.14%、尿素0.13%、魚(yú)粉蛋白胨0.85%、KH₂PO₄ 0.16%、ZnSO₄ 0.16%、VB₂ 0.0136%、VC 0.0145%。（2）尿素協(xié)同培養(yǎng)條件... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

皂苷合成途徑Fig.1.1Thesaponinsbiosynthesispathway

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文13謝過(guò)程尚不完全清楚，所以對(duì)其深入研究顯得尤為重要，為進(jìn)一步在基因水平上對(duì)其改良奠定理論基矗本文優(yōu)化了蟬擬青霉皂苷的培養(yǎng)條件，采用薄層色譜層析法對(duì)蟬擬青霉皂苷進(jìn)行定性分析，并對(duì)蟬擬青霉皂苷的抗氧化性進(jìn)行系統(tǒng)測(cè)定，利用高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)從轉(zhuǎn)錄水平探究氮源對(duì)蟬擬青霉胞外產(chǎn)皂苷的代謝關(guān)鍵酶基因，并對(duì)差異基因的表達(dá)模式進(jìn)行研究，為進(jìn)一步研究蟬擬青霉皂苷合成代謝途徑提供理論依據(jù)。1.3.2技術(shù)路線技術(shù)路線如圖2.2所示。圖1.2試驗(yàn)技術(shù)路線圖Fig.1.2Experimentalroadmap1.3.3主要研究?jī)?nèi)容針對(duì)天然蟬花市場(chǎng)供不應(yīng)求，人工栽培蟬花困難以及皂苷的多種生物學(xué)活性等，本研究的主要內(nèi)容是探索優(yōu)化利用蟬擬青霉菌種通過(guò)液體發(fā)酵合成蟬花的生物活性成分之一的皂苷的工藝條件，以氮源尿素作為調(diào)控因子，研究了添加尿素后轉(zhuǎn)錄組學(xué)的差異，探究蟬擬青霉合成胞外皂苷的代謝控制的關(guān)鍵位點(diǎn)，并對(duì)皂苷合成通路進(jìn)行研究，為進(jìn)一步研究蟬花皂苷合成代謝途徑提供理論依據(jù)。采用薄層層析色譜法對(duì)蟬花皂苷進(jìn)行定性分析，以還原力、DPPH自由基清除力及羥基自由基抑制力為指標(biāo)，分析了蟬花粗皂苷的抗氧化性能，為進(jìn)一步研究體內(nèi)生

尿素調(diào)節(jié)蟬擬青霉合成胞外皂苷機(jī)制及其抗氧化活性研究28=0.580+0.1491+1.0120.9693+4.11240.1415+0.221120.04813+0.32914+0.559150.124231.425240.18625+1.18534+0.509352.065450.03012+0.01822+0.07632+0.846420.49552（2.2）交互作用F2F4的p值<0.05，F(xiàn)2F4的等高線如圖2.6所示，從圖中可以看出果糖與尿素具有交互效應(yīng)，且較為顯著，說(shuō)明果糖與尿素交互作用對(duì)蟬擬青霉培養(yǎng)產(chǎn)皂苷的影響比較大。圖2.6果糖與尿素交互作用等高線Fig.2.6Contourofinteractionbetweenfructoseandurea2.3.4無(wú)機(jī)鹽與營(yíng)養(yǎng)因子交互作用結(jié)果根據(jù)上面碳氮源響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果即以木糖4.43%、果糖4.73%、甘油1.14%、尿素0.13%、蛋白胨0.85%作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)蟬擬青霉高產(chǎn)皂苷進(jìn)行無(wú)機(jī)鹽與營(yíng)養(yǎng)因子響應(yīng)面設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)與結(jié)果如表2.6所示。


本文編號(hào)：3122637