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產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-26 20:13
  蛋白酶在食品、醫(yī)藥、洗滌、制革等行業(yè)有著廣泛的應(yīng)用。本論文從南昌大學(xué)食堂污水中分離篩選出一株產(chǎn)蛋白酶的野生菌CL-10,并進(jìn)行菌種鑒定、發(fā)酵工藝優(yōu)化、誘變、分離純化、酶學(xué)性質(zhì)的研究,結(jié)果如下:從南昌大學(xué)食堂污水樣品中,通過(guò)菌株的富集、平板初篩和搖瓶復(fù)篩測(cè)定蛋白酶酶活,得到一株產(chǎn)蛋白酶酶活較高的菌株,命名為CL-10。通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、掃描電鏡、革蘭氏染色、生理生化試驗(yàn)、分子生物學(xué)試驗(yàn),并命名為解淀粉芽孢桿菌 CL-10(Bacillus amyloliquefaciens CL-10)。通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面優(yōu)化培養(yǎng)基成分,探究出最佳發(fā)酵培養(yǎng)基條件為:菜籽粕含量6.1%、玉米粉含量4.4%、麩皮含量3.2%、ZnSO4·7H2O濃度為0.2%、吐溫20濃度為0.7%;優(yōu)化發(fā)酵條件為:培養(yǎng)溫度37℃、初始pH 7.0、裝液量50 mL、接種量4%、發(fā)酵時(shí)間54 h,相較于未優(yōu)化前,在最優(yōu)條件下,酶活從2715 U/mL 提高到 6648.4 U/mL。進(jìn)行紫外—硫酸二乙酯復(fù)合誘變,紫外線的最佳誘變條件為功率15 W,照射距離30 cm,照射時(shí)間為150 s;硫酸二乙酯的最佳誘變條件為濃度0... 

【文章來(lái)源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)的研究


圖2.2?L-賴氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線??Fig.2.2?L-lysine?standard?curve??

電泳圖,菌株,電泳,產(chǎn)物


?第2章產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及鑒定???llOOObp??B750bp???;r^?!?B500bp??■lOObp??圖2.4菌株CL-10的PCR產(chǎn)物電泳檢測(cè)圖??Figure?2.4?PCR?product?electrophoresis?detection?diagram?of?strain?CL-10??GAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAG??TAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGG??GGCTAATACCGGATGCTTGTTTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGG??CTTCGGCTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAG??GTAACGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCG??GCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGT??AGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAG??TGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGC??CGTTCAAATAGGGCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCT??AACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGG??AATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAG

堿基序列,菌株,堿基序列,蛋白酶


?第2章產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選及鑒定???ACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATCGCAGT??CTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCAT??GCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCAC??GAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGT??圖2.5菌株CL-10的16SrRNA的部分堿基序列圖??Figure?2.5?Partial?base?sequence?of?16S?rRNA?of?strain?CL-10??CL-10??Badliys?amyioliquefadens?shain?MPA?1034?|?NR?117946.1??64???Badlfus?amyioliquefadens?strain?NBRG?15535?|?NR?041455.1??Bacillus?amytoiiquefadens?strain?NBRC?15535?i?NR?112685.1??66????Bacillus?amyioliquefadens?strain?BCRC?11601?|?NR?116022?1???Bacillus?nakamurai?strain?NRRL?B-41091?|?NR?151897.1??^?I?Stilus?valSsmortis?strain?DSM?11031?|?NR?024696.!??— ̄Bacilfus?valltsmorlisstrainNBRC?101236\?NR?113994.1??


本文編號(hào):3102181

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