植物油含α-生育酚、γ-谷維素和甾醇等活性成分,它們作為植物油中常見的微量脂質(zhì)伴隨物,具有良好的抗氧化功能。植物油中占比最高的甘油酯因具有不同長度和飽和度的碳鏈,在性質(zhì)上存在較大差異,此差異是否會影響脂質(zhì)伴隨物在細胞中抗氧化功能的發(fā)揮,機理為何,尚未明晰。鑒于此,本論文選取兩種典型植物油基,富含長碳鏈不飽和脂肪酸甘油酯的稻米油（RBO）和富含中碳鏈飽和脂肪酸甘油酯的椰子油（CNO）,通過高壓均質(zhì)法制備成乳液,將含有不同濃度脂質(zhì)伴隨物的油基乳液遞送至HepG2細胞中,在細胞模型中研究不同類型油基乳液對α-生育酚、γ-谷維素和甾醇三種脂質(zhì)伴隨物的細胞抗氧化活性（CAA）的影響及機理。論文的主要研究內(nèi)容如下:首先,優(yōu)化高壓均質(zhì)工藝條件,選取稻米油和椰子油兩種典型油脂,制備均勻穩(wěn)定乳液,研究油脂組成對乳液zeta電位、粒徑分布和儲藏穩(wěn)定性等性質(zhì)的影響。結(jié)果顯示,植物油濃度為100 mg/mL時,乳液平均粒徑較小,且多分散系數(shù)（PDI）值最小可低于0.2;隨著均質(zhì)壓力和循環(huán)次數(shù)的增大,乳液平均粒徑減小,在250 nm-300 nm范圍內(nèi);均質(zhì)壓力為60 MPa且循環(huán)次數(shù)為3時,乳液平均粒徑在25... 

【文章來源】：江南大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

具有抗氧化和促氧化活性的膳食植物化學物質(zhì)的濃度效應(yīng)曲線[19]

江南大學碩士學位論文4人肝癌細胞的攝取是主動生物過程，主要是在網(wǎng)格蛋白的介導下，經(jīng)過液相和吸附兩種內(nèi)吞形式進入細胞器。內(nèi)吞是細胞膜內(nèi)陷成囊泡，將胞外的生物大分子等物質(zhì)攝取到胞內(nèi)的過程。如圖1-2所示，其中，大胞飲作用可以內(nèi)化微米尺寸的顆粒，受體介導的內(nèi)吞作用是最有效的形式，即顆粒表面的配體蛋白與細胞膜表面的受體蛋白結(jié)合，最后細胞膜彎曲內(nèi)陷將顆粒包裹。當顆粒與細胞接觸時，表面吸附的蛋白或其他兩親性的分子會影響顆粒與細胞膜間的作用[56]。癌細胞的攝取與顆粒自身性質(zhì)(表面材料、聚集狀態(tài)和初始濃度)及細胞所處狀態(tài)(孵育時間)等特性共同決定[57]。內(nèi)化是一個依賴于培育溫度的耗能過程：在37℃培育時，顆粒的吸附(細胞膜表面)和內(nèi)化(進入細胞)同時發(fā)生，所以在37℃培育溫度下，與細胞結(jié)合的顆粒的量大于低溫時的，孵育時間達到lh時，大部分的顆粒都已位于次級內(nèi)體和溶酶體中[58]。圖1-2細胞的攝取方式[56]Fig.1-2Cellularuptakepattern1.3.2HepG2細胞抗氧化模型肝臟是脂類代謝的主要器官，HepG2細胞被認為是研究體外異生物質(zhì)代謝和肝臟毒性的良好模型，因為它們保留了正常人肝細胞的多數(shù)功能。HepG2細胞具有肝甘油三酯脂肪酶和抗氧化酶，并且可以表達多種蛋白(酶)[59]，在鑒定抗氧化劑以保護細胞免受脂質(zhì)過氧化和細胞毒性方面得到應(yīng)用。產(chǎn)生氧化應(yīng)激的化學物質(zhì)可導致細胞中谷胱甘肽水平和谷氨酰半胱氨酸合成酶活性增加，研究顯示HepG2細胞含有比Chang細胞高約4倍的過氧化氫酶活性，因此在抵抗氧化應(yīng)激方面具有更強的能力[60]。HepG2細胞溶酶體內(nèi)有包括蛋白酶、脂肪酶及磷酸酯酶等在內(nèi)的許多水解酶，它們控制多種大分子物質(zhì)的溶解或消化，是細胞內(nèi)的消化器官。此外，HepG2細胞高度分化、性質(zhì)穩(wěn)定且便于傳代培養(yǎng)，是目

CFH氧化成DCF，利用酶標儀檢測DCF的熒光信號強度，與對照組比較，減少的熒光信號強度反映的即是該物質(zhì)的抗氧化能力。如表1-1所示，目前，CAA模型已被成熟應(yīng)用于對單一抗氧化活性物質(zhì)或果蔬提取物的細胞抗氧化評價中[61,62]。本實驗室也已經(jīng)首次將該模型應(yīng)用于評價植物油脂質(zhì)伴隨物的細胞抗氧化性[27,28]，然而由于油脂的水不溶性問題，并未將該模型應(yīng)用于評價真實的全油脂體系。基于CAA模型在復雜遞送體系包括納米乳液中的應(yīng)用[53]，為解決油水不溶性問題并構(gòu)建適用于評價以乳液形式遞送的植物油細胞抗氧化模型提供了思路。圖1-3細胞抗氧化評價模型原理圖示[61]Fig.1-3Principlediagramofcellularantioxidantactivityassaymodel表1-1基于CAA模型對活性成分細胞抗氧化的評價Tab.1-1EvaluationofcellularantioxidantactivityofactivecomponentsbasedonCAAmodel活性成分來源溶解性體系引文總酚燕麥水溶性甲醇重懸液Chenetal.[63]總酚蔬菜水溶性甲醇重懸液Weietal.[64]總酚藍莓、覆盆子等水溶性果汁離心上清液Benderetal.[65]沒食子兒茶素沒食子酸酯綠茶水溶性超純水提取液Gaoetal.[66]脂質(zhì)伴隨物、多酚植物油脂溶性、水溶性甲醇提取液Liuetal.[28]槲皮素標準品低水溶性玉米醇溶蛋白/殼聚糖納米顆粒Juanetal.[53]1.3.3細胞氧化應(yīng)激防御氧化應(yīng)激是指機體受到不良刺激后，大量高活性分子的產(chǎn)生打破了氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)之間的平衡，誘導機體發(fā)生氧化損傷。癌細胞具有在氧化應(yīng)激條件下存活并維持細胞增殖的能力。通過電子轉(zhuǎn)移和氧化還原狀態(tài)變化描述氧化還原的反應(yīng)普遍存在于生物體細胞中，以維持正常代謝產(chǎn)生能量[67]。細胞的抗氧化防御系統(tǒng)(非酶抗氧化劑和酶

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]煎炸棕櫚油中的極性組分對HepG2細胞的影響及其評價[D]. 程亞軍.江南大學 2018
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[3]不同植物油微量成分與抗氧化能力的相關(guān)性研究[D]. 劉慧敏.江南大學 2015
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本文編號：3092568