木聚糖酶被用作重要的工業(yè)酶制劑,已經(jīng)成熟應(yīng)用在紙漿造紙、飼料加工、釀造等工業(yè)生產(chǎn)中。β-1,4-內(nèi)切木聚糖酶是木聚糖完全水解酶系中關(guān)鍵酶,其結(jié)構(gòu)包括催化域、結(jié)合域、熱穩(wěn)定域及未知功能結(jié)構(gòu)域等,催化采用內(nèi)切水解方式,專一性作用主鏈分子中的β-1,4-糖苷鍵。為了成功實現(xiàn)釀酒酵母高效分泌木聚糖酶,本研究采用重疊延伸PCR法將組成型啟動子PGK、外源蛋白分泌α-factor、木聚糖酶（xylanaseB,XynB）和終止子CYC1構(gòu)建成PαXC表達盒。利用rDNA整合法將組成型表達載體pYES2-PαXC-rDNA整合到釀酒酵母基因組中,通過尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型篩選獲得陽性轉(zhuǎn)化子,基于液滴數(shù)字PCR（digital polymerase chain reaction,ddPCR）法鑒定重組釀酒酵母菌株木聚糖酶基因的拷貝數(shù),利用3,5-二硝基水楊酸（DNS）法檢測不同拷貝數(shù)的木聚糖酶基因重組菌株的產(chǎn)酶活力,考察不同拷貝數(shù)的木聚糖酶基因與其酶活力之間的關(guān)系,對酶活力最高的重組菌株進行遺傳穩(wěn)定性研究,通過單因素分析和響應(yīng)面法優(yōu)化重組菌株產(chǎn)木聚糖酶的發(fā)酵條件,研究結(jié)果如下:1、利用重疊延伸PCR法成功構(gòu)... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

秸稈組成的化學(xué)分子結(jié)構(gòu)

的 α-阿拉伯糖苷酶/β-木糖苷酶協(xié)同效力水解木聚糖[31]；20活性木聚糖降解酶工程菌，降解的低聚木糖效率高、木二糖袁建敏等制備了特異性木聚糖降解復(fù)合酶制劑，改善了小麥芬等探討了 γ 射線穿透木聚糖的機理[34]�；谀揪厶墙Y(jié)構(gòu)對、氧化等。2012 年，過嫣丹采用堿-過氧化氫法從谷物麩皮伯木聚糖，采用溴代正丁烷、溴代十二/十六烷作醚化劑增改性[35]；2015 年，楊成等以谷物阿拉伯木聚糖和季銨化試催化劑合成陽離子阿拉伯木聚糖，使其與鹵代烷烴在堿催調(diào)理劑或增稠劑，可廣泛應(yīng)用于化妝品及個人護理品中，也紙、食品等領(lǐng)域[36]。木聚糖除了被化學(xué)改性外，可以采用物功能性質(zhì)料。2015 年，Kirsi S 等將樺木牛皮紙漿木聚糖在羥堿萃取和改性，以提高其對薄膜的可加工性[37]；2017 年，糖的雙網(wǎng)絡(luò)納米復(fù)合水凝膠，具有優(yōu)良的機械性能、較高的，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[38]。

實驗結(jié)構(gòu)圖

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[5]發(fā)酵與酶解處理玉米秸稈工藝優(yōu)化及其對飼用品質(zhì)影響研究[D]. 地里百爾·努爾.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]改性玉米秸稈的表征及吸附性能研究[D]. 陳曉曉.長春工業(yè)大學(xué) 2016
[7]玉米秸軒混污泥燃料成型及其燃燒特性研究[D]. 姜秋玥.遼寧工業(yè)大學(xué) 2016
[8]釀酒酵母發(fā)酵菊糖生產(chǎn)乙醇過程的研究[D]. 何天琪.大連工業(yè)大學(xué) 2016
[9]堿性木聚糖酶基因的優(yōu)化及在畢赤酵母中的表達[D]. 馬婷.武漢輕工大學(xué) 2014
[10]利用釀酒酵母表達重組人白蛋白—甲狀旁腺激素（1-34）ab二聯(lián)體蛋白[D]. 劉青霞.江南大學(xué) 2013



本文編號：3091270