納豆激酶（nattokinase,NK）是納豆芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)生的一種具有溶解血栓功能的絲氨酸蛋白酶,具有活性高、安全性高、口服方便等優(yōu)點,存在巨大的應(yīng)用潛力。然而,目前納豆激酶的發(fā)酵單位普遍不高且特性的纖溶酶純度亦不清晰;此外納豆芽孢桿菌的發(fā)酵副產(chǎn)物——具有凝血作用的維生素K2（MK-7）,對細胞生長的作用也沒有得到明確的解析,這些成為了限制高效制備高品質(zhì)納豆激酶的關(guān)鍵問題。以研究并解決上述關(guān)鍵問題為目的,本文從發(fā)酵食品中篩選得到一株具有纖溶酶活力的菌株,鑒定并命名為為納豆芽孢桿菌TN-02。通過對該菌株進行發(fā)酵工藝優(yōu)化,最終在10 L發(fā)酵罐中,采用分批補料工藝獲得納豆激酶的最高表達量為13978.3 U/mL;利用基因敲除技術(shù)分別對納豆芽孢桿菌TN-02中的納豆激酶基因aprN和維生素K2（MK-7）合成途徑中men A基因進行了插入失活,證明了納豆激酶是納豆芽孢桿菌TN-02發(fā)酵產(chǎn)物中唯一纖溶酶,MK-7是納豆芽孢桿菌TN-02生長代謝必需生長因子。主要研究結(jié)果如下:（1）從發(fā)酵食品中篩選到一株纖溶酶生產(chǎn)菌,通過對其形態(tài)特征觀察、生理生化實驗和16S rDNA鑒定,確定其為枯草芽孢... 

【文章來源】：安徽工程大學安徽省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１納豆激酶的３Ｄ結(jié)構(gòu)模型??Ｆｉ．?１－１?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｍｏｄｅｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｎａｔｔｏｋｉｉｉａｓｅ??

圖１－３維生素Ｋ２代謝途徑??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｃ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｖｉｔａｍｉｎ?Ｋ２??

圖２－２不同菌種對酪蛋白的水解能力??Ｆｉ．２－２?Ｈｄｒｏｌｓｉｓ?ａｂｉｌｉｔｏｆ?ｃａｓｅｉｎ?ｂｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔｒａｉｎｓ??


本文編號：3085059