西蘭花中蘿卜硫苷的提取和純化研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-23 17:46
硫代葡萄糖苷(Glucosinolates),簡(jiǎn)稱硫苷,其降解產(chǎn)物種類多樣,具備各種生物活性,目前廣受關(guān)注的是抗癌、提高免疫力的活性。蘿卜硫苷(Glucoraphanin)屬于硫代葡萄糖苷的其中一類,其主要降解產(chǎn)物蘿卜硫素(Sulforaphane)是目前蔬菜中抗癌功效最強(qiáng)的物質(zhì)。但蘿卜硫素不穩(wěn)定,易揮發(fā),通常采用蘿卜硫苷形式制備其產(chǎn)品。從西蘭花中提取蘿卜硫苷時(shí),其內(nèi)源黑芥子酶會(huì)降解硫苷,因此,需要研究西蘭花中蘿卜硫苷提取時(shí)的滅酶、提取、純化工藝技術(shù)。本文主要以西蘭花為原材料,探究其種子中蘿卜硫苷的最佳提取工藝,新鮮西蘭花的各種滅酶提取蘿卜硫苷工藝,以及西蘭花粗提液中蘿卜硫苷的純化方法。最終得到以下結(jié)論:1、乙醇提取西蘭花種子中蘿卜硫苷的最佳工藝條件為:乙醇濃度為70%、料液比為1:5、提取溫度為70℃、提取時(shí)間為20min,提取次數(shù)為2次,最終得到每克西蘭花種子中蘿卜硫苷提取得率為5.41 mg。2、比較Sevag法、單寧酸法、飽和氯化鈉法、硅膠法、殼聚糖法對(duì)去除新鮮西蘭花的蘿卜硫苷粗提液中蛋白質(zhì)的影響,及對(duì)蘿卜硫苷提取得率的影響,最后綜合選擇Sevag法。3、通過溫度處理、蒸汽處理...
【文章來源】:浙江工商大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2硫代葡萄糖苷基本種類分類圖ln]??Fig.?1-2?The?basic?classification?map?of?glucosinolates[11]??
?(例如:異硫氰酸酯、腈、環(huán)腈、硫氰酸酯、惡唑烷硫酮等[IG,17,18]),而所形成??不同的化合物的種類則取決于pH、金屬離子和其他蛋白成分(圖1-3所示)。??最常見的,當(dāng)pH為6?7時(shí),酶水解形成的中間化合物通過Hoffmann重排??(或Lossen重排),會(huì)形成穩(wěn)定且具有抗癌活性的異硫氰酸醋[19](Isothiocyanate,??ITC)。硫氰酸醋(Thiocyanate)形成有各種理論,如Gmelin[2a^認(rèn)為可能有一??種酶重排了硫苷的結(jié)構(gòu)式,這種異構(gòu)酶是作用于硫苷生成硫氰酸酯的一個(gè)因素。??如果異硫氰酸酯含有雙鍵,在表皮特異硫蛋白(ESP蛋白)的存在條件下,異硫??氰酸酯可以重新產(chǎn)生環(huán)腈類(Epithionitrile)。在較低的pH值下,不穩(wěn)定的中間??體可以直接轉(zhuǎn)化為腈(Nitrile),損失硫。其中轉(zhuǎn)化為腈的含量在亞鐵離子也存??在的條件下得到了提高。此外
等人也通過使用SPE前處理分離蘿卜硫苷降解產(chǎn)物蘿卜硫素,取得較好的成效。??1.3.2硫苷分析檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀??如圖1-4所示,即為硫苷的分析檢測(cè)方法。早期對(duì)于硫苷的檢測(cè)分析方法主??要是通過較為簡(jiǎn)便的方法釋放硫苷中的葡萄糖殘基使用試紙分析,紙層析色??譜法和薄層色譜法進(jìn)行檢測(cè)分析。此外,還有通過硫酸根法、硫氰酸酯法等測(cè)定??硫苷降解產(chǎn)物的方法間接得到硫苷含量。但此類方法通常無法得到準(zhǔn)確的含量值,??且很多時(shí)候需特別注意操作過程。因此隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,這些方法已被高效??液相色譜法(HPLC)?[1Q,49,5Q]、氣相色譜法(GC)、質(zhì)譜法(MS)等方法取代,??這些方法可得到更為準(zhǔn)確、可靠和可重復(fù)的結(jié)果。??單獨(dú)的高效液相色譜法不能使硫苷達(dá)到完全的色譜分離,而質(zhì)譜卻可根據(jù)各??類硫苷的不同特征性質(zhì)譜信息完成定性定量分析,因此液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)??(LC-MS)?[51]已成為深入細(xì)致研宄復(fù)雜植物樣品中硫苷的有力手段
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羽衣甘藍(lán)和白菜型油菜硫代葡萄糖苷超高效液相色譜—飛行時(shí)間質(zhì)譜分析方法[J]. 鄭姝寧,張延國(guó),郭寧,劉志遠(yuǎn),徐東輝. 園藝學(xué)報(bào). 2016(12)
[2]硫代葡萄糖苷提取、純化、分離方法概述[J]. 林麗君,聶黎行,李耀磊,戴忠,馬雙成. 中國(guó)藥事. 2015(10)
[3]石榴皮多糖的三氯乙酸法脫蛋白工藝研究[J]. 趙師師,高旭紅,常君,劉松林,張萍. 廣州化工. 2015(17)
[4]金花散茶飲料加工工藝研究[J]. 胡治遠(yuǎn),趙運(yùn)林,劉石泉,彭雨軒,張梅清. 湖南城市學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(04)
[5]青花菜中硫代葡萄糖苷的提取工藝[J]. 鄧艷美,王紅妹,萬從慶. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(06)
[6]西蘭花籽中蘿卜硫苷的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 江敏,石林娟,楊毅. 食品科學(xué). 2013(05)
[7]滸苔多糖脫蛋白脫鹽方法的優(yōu)選[J]. 陳達(dá)妙,林文庭. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng). 2012(04)
[8]Content determination of benzyl glucosinolate and anti—cancer activity of its hydrolysis product in Carica papaya L.[J]. Ze-You Li,Yong Wang,Wen-Tao Shen,Peng Zhou. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2012(03)
[9]硫代葡萄糖苷的降解途徑及其產(chǎn)物的研究進(jìn)展[J]. 楊瑛潔,李淑燕,胡國(guó)偉,廖小軍,胡小松,張燕. 西北植物學(xué)報(bào). 2011(07)
[10]油菜籽粕中硫甙的提取工藝研究[J]. 卜路霞,朱華玲,李建穎,石軍,尉震. 糧食與飼料工業(yè). 2011(03)
碩士論文
[1]西蘭花干硫苷的提取工藝優(yōu)化及富集純化研究[D]. 李寧.浙江工商大學(xué) 2015
[2]西蘭花中蘿卜硫苷的提取及降解產(chǎn)物抑菌活性研究[D]. 葉珊珊.浙江工商大學(xué) 2013
[3]芝麻菜種子中硫代葡萄糖苷(Glucoerucin)的分離純化工藝研究[D]. 吳建朋.北京化工大學(xué) 2013
[4]海南芥子中硫苷及其酶解產(chǎn)物的提取分離與鑒定[D]. 趙振東.海南大學(xué) 2013
[5]蘿卜籽中硫代葡萄糖苷的提取純化及其降解產(chǎn)物的抑菌特性研究[D]. 周政子.浙江工商大學(xué) 2013
[6]蘿卜硫苷的分離純化工藝研究[D]. 江敏.合肥工業(yè)大學(xué) 2012
[7]十字花科植物種子黑芥子酶酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 朱磊.北京化工大學(xué) 2011
[8]西蘭花提取物防癌抗癌及增強(qiáng)免疫力研究[D]. 管佳.浙江工商大學(xué) 2009
[9]菜籽粕脫毒液中硫代葡萄糖苷提取工藝研究[D]. 周銘.重慶大學(xué) 2008
[10]芥菜中硫代葡萄糖苷提取純化及穩(wěn)定性的研究[D]. 郭逍遙.南昌大學(xué) 2007
本文編號(hào):2995642
【文章來源】:浙江工商大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2硫代葡萄糖苷基本種類分類圖ln]??Fig.?1-2?The?basic?classification?map?of?glucosinolates[11]??
?(例如:異硫氰酸酯、腈、環(huán)腈、硫氰酸酯、惡唑烷硫酮等[IG,17,18]),而所形成??不同的化合物的種類則取決于pH、金屬離子和其他蛋白成分(圖1-3所示)。??最常見的,當(dāng)pH為6?7時(shí),酶水解形成的中間化合物通過Hoffmann重排??(或Lossen重排),會(huì)形成穩(wěn)定且具有抗癌活性的異硫氰酸醋[19](Isothiocyanate,??ITC)。硫氰酸醋(Thiocyanate)形成有各種理論,如Gmelin[2a^認(rèn)為可能有一??種酶重排了硫苷的結(jié)構(gòu)式,這種異構(gòu)酶是作用于硫苷生成硫氰酸酯的一個(gè)因素。??如果異硫氰酸酯含有雙鍵,在表皮特異硫蛋白(ESP蛋白)的存在條件下,異硫??氰酸酯可以重新產(chǎn)生環(huán)腈類(Epithionitrile)。在較低的pH值下,不穩(wěn)定的中間??體可以直接轉(zhuǎn)化為腈(Nitrile),損失硫。其中轉(zhuǎn)化為腈的含量在亞鐵離子也存??在的條件下得到了提高。此外
等人也通過使用SPE前處理分離蘿卜硫苷降解產(chǎn)物蘿卜硫素,取得較好的成效。??1.3.2硫苷分析檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀??如圖1-4所示,即為硫苷的分析檢測(cè)方法。早期對(duì)于硫苷的檢測(cè)分析方法主??要是通過較為簡(jiǎn)便的方法釋放硫苷中的葡萄糖殘基使用試紙分析,紙層析色??譜法和薄層色譜法進(jìn)行檢測(cè)分析。此外,還有通過硫酸根法、硫氰酸酯法等測(cè)定??硫苷降解產(chǎn)物的方法間接得到硫苷含量。但此類方法通常無法得到準(zhǔn)確的含量值,??且很多時(shí)候需特別注意操作過程。因此隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,這些方法已被高效??液相色譜法(HPLC)?[1Q,49,5Q]、氣相色譜法(GC)、質(zhì)譜法(MS)等方法取代,??這些方法可得到更為準(zhǔn)確、可靠和可重復(fù)的結(jié)果。??單獨(dú)的高效液相色譜法不能使硫苷達(dá)到完全的色譜分離,而質(zhì)譜卻可根據(jù)各??類硫苷的不同特征性質(zhì)譜信息完成定性定量分析,因此液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)??(LC-MS)?[51]已成為深入細(xì)致研宄復(fù)雜植物樣品中硫苷的有力手段
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羽衣甘藍(lán)和白菜型油菜硫代葡萄糖苷超高效液相色譜—飛行時(shí)間質(zhì)譜分析方法[J]. 鄭姝寧,張延國(guó),郭寧,劉志遠(yuǎn),徐東輝. 園藝學(xué)報(bào). 2016(12)
[2]硫代葡萄糖苷提取、純化、分離方法概述[J]. 林麗君,聶黎行,李耀磊,戴忠,馬雙成. 中國(guó)藥事. 2015(10)
[3]石榴皮多糖的三氯乙酸法脫蛋白工藝研究[J]. 趙師師,高旭紅,常君,劉松林,張萍. 廣州化工. 2015(17)
[4]金花散茶飲料加工工藝研究[J]. 胡治遠(yuǎn),趙運(yùn)林,劉石泉,彭雨軒,張梅清. 湖南城市學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(04)
[5]青花菜中硫代葡萄糖苷的提取工藝[J]. 鄧艷美,王紅妹,萬從慶. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(06)
[6]西蘭花籽中蘿卜硫苷的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定[J]. 江敏,石林娟,楊毅. 食品科學(xué). 2013(05)
[7]滸苔多糖脫蛋白脫鹽方法的優(yōu)選[J]. 陳達(dá)妙,林文庭. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng). 2012(04)
[8]Content determination of benzyl glucosinolate and anti—cancer activity of its hydrolysis product in Carica papaya L.[J]. Ze-You Li,Yong Wang,Wen-Tao Shen,Peng Zhou. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2012(03)
[9]硫代葡萄糖苷的降解途徑及其產(chǎn)物的研究進(jìn)展[J]. 楊瑛潔,李淑燕,胡國(guó)偉,廖小軍,胡小松,張燕. 西北植物學(xué)報(bào). 2011(07)
[10]油菜籽粕中硫甙的提取工藝研究[J]. 卜路霞,朱華玲,李建穎,石軍,尉震. 糧食與飼料工業(yè). 2011(03)
碩士論文
[1]西蘭花干硫苷的提取工藝優(yōu)化及富集純化研究[D]. 李寧.浙江工商大學(xué) 2015
[2]西蘭花中蘿卜硫苷的提取及降解產(chǎn)物抑菌活性研究[D]. 葉珊珊.浙江工商大學(xué) 2013
[3]芝麻菜種子中硫代葡萄糖苷(Glucoerucin)的分離純化工藝研究[D]. 吳建朋.北京化工大學(xué) 2013
[4]海南芥子中硫苷及其酶解產(chǎn)物的提取分離與鑒定[D]. 趙振東.海南大學(xué) 2013
[5]蘿卜籽中硫代葡萄糖苷的提取純化及其降解產(chǎn)物的抑菌特性研究[D]. 周政子.浙江工商大學(xué) 2013
[6]蘿卜硫苷的分離純化工藝研究[D]. 江敏.合肥工業(yè)大學(xué) 2012
[7]十字花科植物種子黑芥子酶酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 朱磊.北京化工大學(xué) 2011
[8]西蘭花提取物防癌抗癌及增強(qiáng)免疫力研究[D]. 管佳.浙江工商大學(xué) 2009
[9]菜籽粕脫毒液中硫代葡萄糖苷提取工藝研究[D]. 周銘.重慶大學(xué) 2008
[10]芥菜中硫代葡萄糖苷提取純化及穩(wěn)定性的研究[D]. 郭逍遙.南昌大學(xué) 2007
本文編號(hào):2995642
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