發(fā)布時(shí)間：2020-11-06 08:35

　　 中藥紅花是菊科紅花屬植物紅花(Carthamus tinctorius L.)的干燥管狀花,具有活血通經(jīng)、抗炎鎮(zhèn)痛及抗氧化等藥理作用,是中藥注射劑紅花注射液和紅花口服液的主要原料。在生產(chǎn)紅花注射液或口服液過程中主要采用的是水提工藝,利用水提取工藝主要將大部分水溶性成分紅花黃色素、黃酮苷類等在水中具有一定溶解度的化合物提取出來,提取后的藥渣中還含有紅色素和亞精胺類物質(zhì)等脂溶性較強(qiáng)的化學(xué)成分。本課題組的前期研究表明紅花中亞精胺類物質(zhì)具有抑制5-HT再攝取的作用,提示其具有潛在的抗抑郁作用。為合理開發(fā)利用紅花藥渣資源,進(jìn)一步探究亞精胺的潛在生物活性,本文針對(duì)紅花藥渣中的總亞精胺類物質(zhì)的提取方法、制備方法和亞精胺類單體化合物的分離進(jìn)行了研究,并采用行為藥理學(xué)手段對(duì)總亞精胺的抗抑郁活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。本文研究?jī)?nèi)容如下:1.紅花藥渣中總亞精胺提取方法研究運(yùn)用已建立的紅花中亞精胺類物質(zhì)的高效液相色譜含量測(cè)定方法,以紅花藥渣中的四個(gè)亞精胺物質(zhì)的總提取率為指標(biāo),考察了自然光照、提取溶劑、提取方法、料液比、提取時(shí)間及次數(shù)等6個(gè)因素對(duì)紅花藥渣中總亞精胺提取率的影響。根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,進(jìn)一步利用正交試驗(yàn)法確定了紅花藥渣中總亞精胺的最適提取條件:用無水甲醇以料液比1:35回流提取3次,每次提取2 h,得到紅花藥渣中總亞精胺的提取率為(2.894±0.011)mg/g,較之前所建立的紅花中亞精胺的超聲提取方法高36.38%。2.紅花藥渣中總亞精胺制備工藝研究及亞精胺類單體化合物分離在已建立的紅花藥渣中總亞精胺的提取方法基礎(chǔ)上,進(jìn)一步優(yōu)化了用于制備工藝研究的總亞精胺的提取溶劑,并運(yùn)用已建立的紅花中亞精胺類物質(zhì)的高效液相色譜含量測(cè)定方法,以紅花藥渣中的四個(gè)亞精胺物質(zhì)的總含量為指標(biāo),考察了分離制備總亞精胺的前處理?xiàng)l件(濃縮條件、洗滌條件)及柱分離材料;在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用中低壓柱色譜快速純化總亞精胺,考察了上樣量及上樣濃度對(duì)總亞精胺分離效果的影響。研究表明,在紅花藥渣提取液前處理的基礎(chǔ)上,采用C18中低壓柱色譜分離制備總亞精胺,最佳條件為:當(dāng)洗脫流速固定為15 mL/min時(shí),W_1/W_2為4.65(mg/g),(W_1為待分離樣品質(zhì)量,W_2為C18柱分離材料的質(zhì)量),上樣濃度為90mg/mL,最終產(chǎn)品中總亞精胺的純度達(dá)到50%以上。此外,在分離純化總亞精胺的過程中還分離得到亞精胺類化合物N~1,N~5,N~(10)-(E)-tri-p-coumaroylspermidine。3.紅花藥渣中總亞精胺抗抑郁活性初步研究應(yīng)用小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)(TST)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST)等行為絕望模型,以實(shí)驗(yàn)中小鼠的不動(dòng)時(shí)間作為評(píng)價(jià)指標(biāo),初步評(píng)價(jià)了紅花藥渣中總亞精胺的抗抑郁活性并篩選有效劑量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與空白對(duì)照組相比,當(dāng)總亞精胺劑量為25 mg/kg、50 mg/kg時(shí),對(duì)小鼠懸尾及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)狀態(tài)有顯著改善作用。因此,推測(cè)其可能具有抗抑郁活性。并進(jìn)一步運(yùn)用行為絕望抑郁模型驗(yàn)證總亞精胺(劑量分別設(shè)置為25 mg/kg,50 mg/kg,100 mg/kg)的抗抑郁活性,結(jié)果再次證明,亞精胺對(duì)小鼠行為絕望狀態(tài)有改善作用。由此得出結(jié)論,紅花藥渣中的總亞精胺具有一定抗抑郁活性。
【學(xué)位單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TQ28
【部分圖文】：

紅花藥渣中總亞精胺制備方法及抗抑郁活性初步研究2.2.1.2 對(duì)照品溶液制備分別準(zhǔn)確稱取適量亞精胺類物質(zhì) 1, 3, 4, 5 的標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇溶解并定容于 10mL 棕色容量瓶中，避光保存，備用。2.2.1.3 色譜分析條件及線性方程參考文獻(xiàn)[74]中方法，采用 Agilent C18色譜柱(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)，流動(dòng)相為甲醇(B)-水(A)，等度洗脫（0-40 min，47%甲醇），流速 1.0 mL/min，柱溫 30℃，檢測(cè)波長(zhǎng) 270 nm，280 nm，290 nm，300 nm，進(jìn)樣體積 10 μL。色譜圖見圖 2-1。4

第三章 紅花藥渣總亞精胺制備工藝研究液透明，再加水洗至無醇味，并經(jīng)酸堿預(yù)處理，水洗至中性備用。取經(jīng)過“3.2.6.1”項(xiàng)下處理的樣品 1 g 用 25%乙醇水溶液溶解，均勻載入預(yù)處理后 D101 大孔樹脂層析柱中（柱內(nèi)徑 1.5 cm，柱高 20 cm），依次用 25%、45%、95%醇水溶液梯度洗脫，洗脫流速 15 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 280 nm，根據(jù)中低壓制備色的紫外吸收峰收集餾分，下圖為 D101 大孔樹脂中低壓制備總亞精胺圖譜及 HPLC譜。

第三章 紅花藥渣總亞精胺制備工藝研究中(43 g，40-60 μm，60 )，依次用 20%、50%、95%乙醇水溶液梯度洗脫，洗脫流速 15 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 280 nm，根據(jù)中壓制備色譜的紫外吸收峰收集餾分，下圖為 C18 中壓制備總亞精胺圖譜及 HPLC 圖譜。
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本文編號(hào)：2872910