花生是世界上最重要的油料和食品原料之一,富含必需脂肪酸、蛋白質(zhì)、脂溶性維生素、多酚、礦物質(zhì)元素等有益成分�；ㄉ鶕�(jù)種皮顏色分為紅皮花生和黑花生,黑花生中花青素含量顯著高于紅皮花生。花生發(fā)芽后,不但維生素、氨基酸、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有所改善,且花生芽中白藜蘆醇等酚類化合物的含量顯著上升。酚類化合物具有抗氧化、消炎、抗癌等功效。隨著經(jīng)濟(jì)的日益發(fā)展和人們消費(fèi)觀念的轉(zhuǎn)變,人們對(duì)食物的需求已從滿足溫飽向追求高品質(zhì)轉(zhuǎn)變。近年來,黑色食品和芽菜憑借豐富的營(yíng)養(yǎng)受到越來越多消費(fèi)者的青睞。因此,深入挖掘和利用花生及其制品的特色營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)對(duì)滿足人們消費(fèi)需求,推動(dòng)產(chǎn)業(yè)升級(jí)具有重要的意義。本文具體研究?jī)?nèi)容如下:1.建立苯丙烷路徑中10種代謝物的準(zhǔn)確定量檢測(cè)方法建立了一種快速、準(zhǔn)確的液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用法,對(duì)苯丙烷路徑上10種代謝物進(jìn)行了檢測(cè)。所研究的10種化合物包括L-苯丙氨酸、對(duì)香豆酸、咖啡酸、異甘草素、蛇葡萄素、對(duì)羥基苯甲醛、紫檀芪、白藜蘆醇、黃豆苷元和芒柄花黃素。通過對(duì)前處理?xiàng)l件進(jìn)行優(yōu)化,選用2 mL乙腈:甲醇:水(2:2:1,v/v/v),對(duì)樣品超聲75 min來提高對(duì)目標(biāo)代謝物的提取效率。研究驗(yàn)證了該檢測(cè)方法的線性、回收率和精密度。日內(nèi)、間精度分別在1.2-8.7%和1.2-8.5%之間。平均回收率為87.3-117.8%。結(jié)果顯示該方法靈明度高,重復(fù)性好。2.研究3種外源添加液對(duì)于花生發(fā)芽過程中酚類化合物含量的影響通過添加一定濃度的酪氨酸、丙二酸和乙酸培養(yǎng)液,對(duì)花生進(jìn)行發(fā)芽培養(yǎng)。利用三重四極桿質(zhì)譜對(duì)發(fā)芽過程中相關(guān)酚類化合物的含量進(jìn)行檢測(cè)。研究表明,在花生發(fā)芽前期,提供一定濃度的酪氨酸、丙二酸和乙酸能顯著提高花生芽中白藜蘆醇的含量。添加0.4、0.8和1.0 mmol/L的酪氨酸能夠提高花生芽中2-羥基肉桂酸和對(duì)香豆酸的含量。在第一天至第三天時(shí),添加0.1、0.2、0.4、0.8和1.0 mmol/L的酪氨酸均能夠提高花生芽中阿魏酸的含量。3.基于LC-HRMS非靶向代謝組學(xué)對(duì)花生發(fā)芽前后差異性化合物進(jìn)行分析本章采用LC-MS非靶向代謝全譜分析方法對(duì)花生種子與其花生芽苗間差異代謝物進(jìn)行了研究比較,覆蓋21個(gè)代謝路徑358個(gè)代謝物。主成分、正交偏最小二乘法及聚類分析表明花生種子與花生芽間存在顯著性差異。花生種子組和其花生芽組存在83個(gè)差異代謝物(P0.05)。本研究結(jié)果對(duì)花生發(fā)芽后各類化合物的變化進(jìn)行了一個(gè)系統(tǒng)性的分析,為花生芽的營(yíng)養(yǎng)功能評(píng)價(jià)提供有力支撐。4.基于LC-HRMS靶向代謝組學(xué)對(duì)黑花生和紅皮花生差異性酚類化合物進(jìn)行篩選選取18個(gè)不同品種的黑花生和紅皮花生,采用LC-MS靶向代謝全譜分析方法對(duì)黑花生與紅皮花生進(jìn)行差異性比較,共篩選出21個(gè)酚類化合物。主成分、正交偏最小二乘法和T檢驗(yàn)分析表明黑花生與紅皮花生組間存在顯著性差異。紅皮花生中咖啡酸、鷹嘴豆芽素A、槲皮素、松柏醛、水楊酸、橙皮素、兒茶素、表兒茶素、黃豆苷元和丁香酸的含量均顯著高于黑花生,而黑花生中花青素的含量顯著高于紅皮花生。
【學(xué)位單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：O657.63;TS222.1
【部分圖文】：

16圖 2.4 苯丙烷路徑中 10 種代謝物的 MRM 色譜圖Figure 2.4 The MRM chromatogram of 10 metabolites in phenylpropane pathway通過對(duì) 20 份添加 10 種代謝物標(biāo)準(zhǔn)品的花生芽的空白樣品進(jìn)行分析來確定方法的特異性謝物標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖（圖 2.4）在同一保留時(shí)間內(nèi)無干擾峰，說明該方法具有特異性。圖示了 10 種代謝產(chǎn)物的 MRM 色譜圖。通過對(duì)各分析物建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，驗(yàn)證了該方法的矩陣匹配標(biāo)定參數(shù)如表 2.3 所示�；貧w系數(shù)（R2）范圍為 0.9920 ~ 0.9990。實(shí)驗(yàn)中大多的檢出限（LOD）均低于 1 ug/L。結(jié)果表明，該方法能較好地檢測(cè)低濃度的目標(biāo)代謝物濃度下的 10 種代謝物標(biāo)準(zhǔn)品加入空白樣品內(nèi)來進(jìn)行回收率和精密度的計(jì)算。大多數(shù)代回收率在 85% ~ 120%之間。日內(nèi)精密度是通過在同一天制備 6 個(gè)不同濃度的樣品用于（n = 18）。日內(nèi)精密度 RSD 范圍為 1.2% ~ 8.7%。在相同條件下（n = 54） 6 個(gè)不同濃被用于連續(xù)檢測(cè) 3 天。所有分析樣品的日間精密度 RSD 均低于 10.4%。具體結(jié)果如表 2.4 所示。

如表 4.2 所示，5 種花生發(fā)芽快慢有所不同，但最終花生發(fā)芽率都可以達(dá)到 100%。其中白沙 1016 號(hào)和贛花 5 號(hào)在 24 h 內(nèi)發(fā)芽率均達(dá)到 100%。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象說明花生在合適的培養(yǎng)條件下易萌發(fā)出芽。表 4.2 5 種花生發(fā)芽期間發(fā)芽率（%）變化Table 4.2 change of germination rate（%）during germination of 5 kinds of peanuts羅漢果 中花 6 號(hào) 白沙 1016 號(hào) 花育 33 號(hào) 贛花 5 號(hào)24 h 53.33% 72.73% 100% 26.67% 100%48 h 92.86% 100% 100% 100% 100%72 h 100% 100% 100% 100% 100%96 h 100% 100% 100% 100% 100%120 h 100% 100% 100% 100% 100%4.4.2 主成分分析

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第四章 基于 LC-HRMS 的花生發(fā)芽非靶向代謝組學(xué)研究可以得知，質(zhì)量控制組的數(shù)據(jù)點(diǎn)極為集中，反映出數(shù)據(jù)在采集過程中重復(fù)性好。花生種子組和花生芽苗組的數(shù)據(jù)輪廓可以清晰地分離開，說明花生經(jīng)過萌芽過程后，體內(nèi)物質(zhì)發(fā)生了極大的變化。4.4.3 正交偏最小二乘法關(guān)于花生種子組和花生芽苗組組間比較的正交偏最小二乘法散點(diǎn)得分圖如圖 4.4 所示。橫坐標(biāo)（t[1]P）表示第一主成分的預(yù)測(cè)得分，縱坐標(biāo)（t[1]O）表示正交主成分的分?jǐn)?shù)。所有樣品信息均落于 95%置信區(qū)間（Hotelling’s T-squared ellipse）中。圖中結(jié)果顯示，花生種子組和其花生芽苗組之間存在顯著差異。并且，花生芽苗組內(nèi)數(shù)據(jù)點(diǎn)較為分散，反應(yīng)出不同品種的花生在一樣的培養(yǎng)條件下，種子的萌芽情況有所不同（圖 4.4）。

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本文編號(hào)：2827644