【摘要】：齲病(Caries)是人類患有最普遍的的疾病之一,世界衛(wèi)生組織已將其與癌癥和心血管疾病并列為人類三大重點防治疾病,變形鏈球菌(Streptococcus mutans)是主要致齲細菌。本論文利用變形鏈球菌作為抗原,白油作為佐劑,被動性免疫母雞,產(chǎn)生特異型抗齲齒蛋黃抗體(IgY),將其應(yīng)用于牙膏中,研究牙膏中表面活性劑、保濕劑、增稠劑和摩擦劑對IgY活性及結(jié)構(gòu)的影響,確定IgY生物活性牙膏最適配方。維持活性穩(wěn)定是生產(chǎn)抗齲齒IgY牙膏的關(guān)鍵,因此本論文首先選取牙膏中常用表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)、月桂酰肌氨酸鈉(LS-30)、椰油酰胺丙基甜菜堿(CAB)和十二烷基二甲基甜菜堿(BS-12)來研究其對IgY活性的影響。ELISA結(jié)果顯示SDS造成IgY活性喪失,LS-30次之;差示掃描量熱法(DSC)分析表明,添加SDS和LS-30的IgY在加熱前蛋白已發(fā)生變性,而添加CAB的IgY變性溫度提高2.4℃,焓值略有提升,IgY的耐熱性增強,因此選擇CAB作為IgY牙膏中最適表面活性劑。活性和光譜學(xué)結(jié)果表明,IgY最適pH為6-8,因為CAB是兩性離子型表面活性劑,在中性環(huán)境中表現(xiàn)出非離子特性,會降低其與IgY相互作用的能力,因此本文選取pH 7.0作為牙膏體系微環(huán)境。利用紫外及熒光光譜對比研究SDS和CAB分別對IgY結(jié)構(gòu)的影響,SDS濃度≥0.001g/m L時,IgY中Trp、Tyr和Phe特征吸收峰均發(fā)生藍移,并產(chǎn)生靜態(tài)熒光淬滅,曲線擬合分析得出SDS與IgY結(jié)合形成不產(chǎn)熒光的復(fù)合物;SDS在IgY溶液中形成臨界膠束濃度遠大于CAB,說明有更多的SDS單體與IgY結(jié)合,疏水相互作用為結(jié)合的主要作用力;紅外結(jié)果揭示與SDS相互作用的IgY,α-螺旋和β-折疊含量減少,二級結(jié)構(gòu)遭到破壞。與CAB混合的IgY,未發(fā)生熒光淬滅,且四種二級結(jié)構(gòu)基本沒有發(fā)生改變。其次,本文研究牙膏中常用保濕劑對IgY活性及結(jié)構(gòu)的影響。甘油和70%山梨醇對IgY活性影響最小,結(jié)合光譜學(xué)手段分析,聚乙二醇-400和600使IgY發(fā)生淬滅,濃度越高淬滅效果越明顯,因此選取甘油和70%山梨醇作為牙膏中的保濕劑。生物活性牙膏不僅需要保留IgY的活性還必須具有良好流變學(xué)性能,因此本論文進一步研究不同增稠劑對IgY活性的影響,以及不同保濕劑和增稠劑復(fù)配體系的流變學(xué)性能。通過間接ELISA對IgY活性檢測和質(zhì)構(gòu)及流變學(xué)研究得到,當(dāng)黃原膠和瓜爾豆膠添加量均為0.5%,甘油和山梨醇添加量分別為25%和35%時,所得到膠體性能最佳。最后對選擇配方成分進行膏體活性及流變學(xué)研究,探索不同摩擦劑(二氧化硅、碳酸鈣和磷酸氫鈣)對牙膏體系的影響,結(jié)合正置熒光顯微鏡表征牙膏表觀結(jié)構(gòu),得到二氧化硅型牙膏結(jié)構(gòu)分散比較均勻,且對IgY活性影響最小。最適配方的選擇為IgY在牙膏中的應(yīng)用提供理論研究基礎(chǔ),拓展了IgY在日用化工領(lǐng)域的應(yīng)用范圍。
【圖文】：

1 緒論治療或預(yù)防疾病等方面，將限制 IgY 的廣泛應(yīng)用[36,37]。但 IgY 具有一定的耐酸、耐堿的性能，在 pH 4-10 環(huán)境下比較穩(wěn)定，在含水條件下 65℃可以保持活性。Larsson 等[38]將IgY 在室溫儲存 6 個月，，證明其活性并未降低；Makoto 等[37]發(fā)現(xiàn)，在 4℃環(huán)境下含有0.1% NaN3的 9 g/L NaCl 溶液中儲存 IgY，活性喪失不足 5%。

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文互作用和可能存在的疏水相互作用特異性結(jié)合脹。Reynolds 等[67]發(fā)現(xiàn)表面活性劑的極性基團鏈越長，越容易與蛋白質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合。非同性結(jié)合中的一種結(jié)合方式。Chayen 等[68]認到一定濃度后，誘導(dǎo)蛋白質(zhì)分子肽鏈展開，表一階段蛋白質(zhì)容易發(fā)生去折疊。飽和結(jié)合（區(qū)，繼續(xù)增大濃度，表面活性劑會形成游離膠束液中。Reynolds 等[69]研究證明 SDS 與球蛋白蛋白結(jié)合 1.4 g SDS。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：TQ658.41

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本文編號：2706502