【摘要】：隨著社會(huì)的發(fā)展,人們對(duì)能源的需求越來越高,但傳統(tǒng)的化石能源是不可再生能源。木質(zhì)纖維素作為一種來源廣泛的發(fā)酵底物,能夠被用于生產(chǎn)可再生能源纖維素乙醇,但目前纖維素乙醇生產(chǎn)過程中仍存在木質(zhì)纖維素水解液中葡萄糖抑制木糖利用、水解液中抑制物影響細(xì)胞生長(zhǎng)的問題。本文希望利用混菌發(fā)酵的優(yōu)勢(shì),解除葡萄糖對(duì)木糖的抑制作用,加快木糖的利用速度,同時(shí)使用常壓室溫等離子體誘變(ARTP)與全自動(dòng)高通量微生物液滴培養(yǎng)(MMC)的方法,對(duì)菌種進(jìn)行選育,提高菌株對(duì)水解抑制物乙酸的耐性。首先,為了解決水解液中葡萄糖的存在抑制木糖利用的問題,利用能夠快速代謝葡萄糖的釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae和能夠天然利用木糖的發(fā)酵菌株Spathaspora passalidarum進(jìn)行混菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)�；炀l(fā)酵實(shí)驗(yàn)分為高濃度混合糖的發(fā)酵實(shí)驗(yàn)與低濃度混合糖的發(fā)酵實(shí)驗(yàn),通過改變釀酒酵母S.cerevisiae與S.passalidarum不同的接種比例,進(jìn)行發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,混菌發(fā)酵確實(shí)能夠解除葡萄糖對(duì)木糖利用的抑制作用。但在水解抑制物存在的情況下,菌株對(duì)乙酸的耐性成為影響發(fā)酵的主要因素。為了降低甚至消除水解液中抑制物存在對(duì)微生物在生長(zhǎng)和發(fā)酵方面的影響,本研究對(duì)菌株進(jìn)行誘變提高抑制物的耐性。利用常壓室溫等離子體誘變儀對(duì)S.passalidarum進(jìn)行菌種的改造,同時(shí)采用全自動(dòng)高通量微生物液滴培養(yǎng)儀與手動(dòng)篩選的方法,對(duì)菌種進(jìn)行篩選。經(jīng)過多次誘變篩選,篩選出抑制物耐性提高的菌株,對(duì)獲得的耐性提高的菌株進(jìn)行點(diǎn)板評(píng)價(jià)與發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,誘變篩選獲得的菌株能夠在含有5 g/L的乙酸平板中生長(zhǎng),提高了S.passalidarum菌株的乙酸耐性。為后續(xù)深入揭示乙酸耐性提高的機(jī)理提供了重要的菌體來源,并為纖維素乙醇發(fā)酵提供了菌種支持。
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TQ920.1;TQ223.122

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9 朱sュ，

本文編號(hào)：2698032