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裸藻多糖的提取優(yōu)化及其體外抗氧化活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-01 22:47
【摘要】:裸藻多糖(paramylon)不僅在細(xì)胞干重中占有很大比例,而且是裸藻中最重要的儲(chǔ)能物質(zhì)。該多糖作為一種生物活性物質(zhì),近年來(lái)已逐漸成為研究的熱點(diǎn)之一。裸藻多糖有多種活性,如抗病毒、降血糖、降脂、抗腫瘤及增強(qiáng)免疫等功能,在食品,醫(yī)藥,保健,化妝品,生物燃料,飼料等領(lǐng)域都得到了充分研究,已被列入新食品原料的行列。但是,目前還幾乎沒(méi)有專(zhuān)門(mén)對(duì)裸藻多糖的提取和體外抗氧化活性的測(cè)定進(jìn)行研究的文章,為更好的利用裸藻多糖并為它在市場(chǎng)中的開(kāi)發(fā)利用提供一定的理論依據(jù),本文以綠色裸藻和纖細(xì)裸藻為實(shí)驗(yàn)材料,探究了纖細(xì)裸藻的生長(zhǎng)周期;優(yōu)化了堿提兩種裸藻多糖的條件以及測(cè)定該多糖在體外抗氧化活性的強(qiáng)弱。具體結(jié)果如下:(1)將購(gòu)買(mǎi)的纖細(xì)裸藻進(jìn)行培養(yǎng),待擴(kuò)培至1 L時(shí),開(kāi)始對(duì)纖細(xì)裸藻的生物量進(jìn)行測(cè)定,包括每天的藻密度、干重、吸光度和葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類(lèi)胡蘿卜素的濃度變化,通過(guò)記錄這些數(shù)據(jù),測(cè)定出纖細(xì)裸藻的生長(zhǎng)周期為9 d。(2)將培養(yǎng)好的綠色裸藻和纖細(xì)裸藻離心凍干收獲,進(jìn)行多糖的提取。先以NaOH濃度、提取時(shí)間、提取溫度對(duì)裸藻多糖(paramylon)得率的影響的單因素試驗(yàn)為基礎(chǔ),確定這三個(gè)因素的三個(gè)水平,再利用Design-Expert8.0.6.1軟件進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì),進(jìn)行Box-behnken中心組合試驗(yàn)來(lái)優(yōu)化堿提裸藻多糖的提取工藝,確定出提取纖細(xì)裸藻多糖的最佳水平是:提取時(shí)間1.5 h、NaOH濃度0.7 mol/L、堿提溫度為40℃,在此條件下,裸藻多糖的得率為20.57%;同時(shí)也確定出提取綠色裸藻多糖的最佳水平為:提取時(shí)間3 h、NaOH濃度0.6 mol/L、提取溫度50℃,在此條件下多糖的實(shí)際得率為42.35%,較傳統(tǒng)提取多糖方法分別提高了5.42%和16.22%。(3)測(cè)定提取出的裸藻多糖的體外抗氧化活性。采用鐵氰化鉀還原法、DPPH法和水楊酸顯色法測(cè)定裸藻多糖總還原力的強(qiáng)弱和對(duì)DPPH自由基、羥自由基(·OH)的去除能力,同時(shí)將抗壞血酸設(shè)為陽(yáng)性對(duì)照,結(jié)果顯示,裸藻多糖清除DPPH自由基、·OH的半抑制質(zhì)量濃度(IC_(50))分別為0.3 mg/mL、0.1 mg/mL,證實(shí)該多糖具有較好的體外抗氧化能力。綜上,裸藻的生長(zhǎng)周期較短,運(yùn)用堿提法提取裸藻多糖確實(shí)比傳統(tǒng)方法提高了多糖得率,而且提取出的多糖有較好的體外抗氧化活性,為裸藻多糖的實(shí)際應(yīng)用提供了良好的理論基礎(chǔ)。
【圖文】:

纖細(xì)裸藻,細(xì)胞密度,裸藻,細(xì)胞干重


圖 2.1 纖細(xì)裸藻細(xì)胞密度變化Fig.2.1 Cell density change of Euglena gracilis,裸藻在生長(zhǎng)過(guò)程中的干重變化呈現(xiàn)出先增長(zhǎng),裸藻細(xì)胞干重以較為恒定的速度增長(zhǎng),從 25.6~9 d 里,細(xì)胞干重增加緩慢,在第 9 d 時(shí)干重最大重呈現(xiàn)微弱的下降或增長(zhǎng)趨勢(shì)。

纖細(xì)裸藻,細(xì)胞干重,裸藻,干重


圖 2.1 纖細(xì)裸藻細(xì)胞密度變化Fig.2.1 Cell density change of Euglena gracilis,裸藻在生長(zhǎng)過(guò)程中的干重變化呈現(xiàn)出先增長(zhǎng),裸藻細(xì)胞干重以較為恒定的速度增長(zhǎng),從 25.6~9 d 里,細(xì)胞干重增加緩慢,在第 9 d 時(shí)干重最大重呈現(xiàn)微弱的下降或增長(zhǎng)趨勢(shì)。
【學(xué)位授予單位】:山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:TQ281

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3 崔鐘國(guó);金鋒;姜昌e

本文編號(hào):2692182


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