【摘要】：從天然產(chǎn)物中篩選藥物先導(dǎo)化合物是新藥開發(fā)的重要途徑。如今醫(yī)藥市場上使用的絕大多數(shù)的抗生素是來自于放線菌和真菌次級代謝產(chǎn)物。臨床藥物中,青霉素和頭孢菌素等抗生素,以及他汀類降血脂藥物等,均產(chǎn)生自真菌。鏈霉素、土霉素,抗腫瘤的博萊霉素、絲裂霉素,抗真菌的制霉菌素,抗結(jié)核的卡那霉素,等,均產(chǎn)生自放線菌。所以真菌和放線菌一直是臨床小分子先導(dǎo)藥物的重要來源。為了獲得結(jié)構(gòu)新穎和有活性的菌株代謝產(chǎn)物,本論文以不同生源環(huán)境中分離得到的真菌和放線菌為研究對象,對其進行次級代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)及其活性研究。文中通過對菌株的發(fā)酵培養(yǎng),HPLC分析篩選,選取產(chǎn)物豐富,且量又大的五株菌,分別是放線菌 KIB-Hjusi 和 KIB-H1666,以及真菌 KIB-H11545,KIB-H11590 和KIB-H11595。運用硅膠層析柱、凝膠層析柱(Sephadex LH-20)和HPLC等分離手段對菌株的次級代謝產(chǎn)物的初提物進行分離純化,然后通過核磁共振及質(zhì)譜等手段確定結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果,從KIB-Hjusi中分離獲得10個化合物,其中有7個是吩嗪羧酸類化合物(Phenazine carboxylic acids),且有5個是新的吩嗪羧酸類化合物;從KIB-H1666中分離獲得4個化合物,化合物13是新結(jié)構(gòu);從KIB-H11595中分離獲得6個已知的蒽醌類(Anthraquinones)化合物;從KIB-H11545中分離獲得3個已知萘酮類化合物(Dinaphthalenones);從KIB-H11590中分離獲得4個已知結(jié)構(gòu)的化合物。采用濾紙片法對化合物進行針對性的抗真菌實驗評價,結(jié)果顯示化合物13和14對所選的受試菌株(棉花枯萎病菌、青霉菌、黃瓜枯萎病菌、水稻紋枯病菌和玉米彎孢菌葉斑病菌)均有很強的抑菌活性,化合物15對青霉菌有抑菌效果,化合物19對棉花枯萎病菌有一定抑制作用,化合物20對青霉菌有一定抑菌效果,化合物21和22對棉花'枯萎病菌有一定的抗菌活性,化合物22還對棉花枯萎病菌有一定的抑制作用,化合物24和25對玉米彎孢菌葉斑病菌有一定的抗菌活性。
【圖文】：

獲得的化合物的結(jié)構(gòu)解析以及化合物活性測定實驗結(jié)果。4.1 菌株的發(fā)酵及其初提物的制備三株目標(biāo)真菌及兩株目標(biāo)放線菌的發(fā)酵和初提代謝產(chǎn)物的制備流程分別如圖4-1和圖 4-2。真菌 KIB-H11545，KIB-H11590 和 KIB-H11595，以及放線菌 KIB-H1666 和KIB-Hjusi 分別經(jīng)活化后，大量發(fā)酵 20 L，通過乙酸乙酯和甲醇的萃取后，得到初提代謝產(chǎn)物浸膏，干燥恒重后，稱量其質(zhì)量。圖 4-1 真菌的發(fā)酵及其初提物的制備流程圖Figure 4-1. The separation process of fermentation and initial extracts preparation for fungus

圖 4-2 放線菌的發(fā)酵及其初提物的制備流程圖Figure 4-2. The separation process of fermentation and initial extractpreparation for actinomycosis代謝產(chǎn)物的分離及結(jié)構(gòu)鑒定 KIB-Hjusi 的分離及結(jié)構(gòu)鑒定B-Hjusi 初提物浸膏，干燥恒重后的質(zhì)量為 4.5 g，首先對的質(zhì)量比約為 1：1.5），經(jīng)硅膠柱層析進行劃段（100 %體系進行洗脫），然后用分析 HPLC 和 TLC 點板分析劃到分離初組分 10 段（Fr 1- Fr 10），，后再經(jīng)凝膠柱層析（Se復(fù)劃段，最后由制備型 HPLC 分離純化，得到已解析的B-Hjusi 的分離流程如下圖 4-3。
【學(xué)位授予單位】：西安石油大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TQ465.92

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