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寬葉獨(dú)行菜總黃酮的提取純化及指紋圖譜研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-15 16:33
【摘要】:寬葉獨(dú)行菜中黃酮類化合物含量較高,黃酮類化合物具有多種生物活性。以傳統(tǒng)提取方法提取寬葉獨(dú)行菜黃酮粗提取物中其黃酮含量較低,嚴(yán)重影響其黃酮化合物的深層次的研究。本研究選取青海省地區(qū)的寬葉獨(dú)行菜,對(duì)其中的黃酮類化合物進(jìn)行提取、分離純化,并對(duì)青海省不同地區(qū)的寬葉獨(dú)行菜指紋圖譜進(jìn)行研究,以期為寬葉獨(dú)行菜的開發(fā)與綜合利用提供部分參考依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:(1)使用超聲波輔助提取法,以乙醇為提取溶劑,通過單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)考察乙醇濃度、液料比、提取溫度和提取時(shí)間對(duì)提取含量的影響。優(yōu)化后的提取工藝條件為:乙醇濃度75%,提取時(shí)間89 min,液料比22.5 mL/g,提取溫度79℃時(shí),寬葉獨(dú)行菜總黃酮含量達(dá)最高36.5 mg/g。(2)通過比較D 301、D 201、D-101-1、X-5、AB-8五種型號(hào)大孔樹脂的靜態(tài)吸附、解析參數(shù),部分動(dòng)態(tài)吸附參數(shù),最終確定AB-8大孔樹脂較適合寬葉獨(dú)行菜總黃酮的純化。通過對(duì)寬葉獨(dú)行菜總黃酮純化靜態(tài)單因素試驗(yàn),確定供試液最適吸附濃度為4.34 mg/mL,最佳pH為6,最佳的洗脫濃度為70%乙醇,靜態(tài)解吸平衡時(shí)間為2 h。通過對(duì)寬葉獨(dú)行菜總黃酮純化動(dòng)態(tài)單因素試驗(yàn),確定上樣液70 mL濃度4.34 mg/mL的總黃酮原液為最佳上樣量,選擇洗脫體積為80 mL。在最佳提取純化工藝條件下,寬葉獨(dú)行菜總黃酮純度可達(dá)到38.9%。(3)通過10批寬葉獨(dú)行菜樣本建立不同產(chǎn)地寬葉獨(dú)行菜的HPLC指紋圖譜,確認(rèn)了12個(gè)共有峰,標(biāo)定12號(hào)峰為蘆丁,從相對(duì)峰面積、相似度等方面進(jìn)行指紋圖譜分析,10批寬葉獨(dú)行菜HPLC指紋圖譜共有色譜峰相似度大于0.90,具有較強(qiáng)的特征性和專屬性。(4)對(duì)比青海省海東市平安區(qū),海南州貴德縣,海西州都蘭縣、柯柯鎮(zhèn)、懷頭他拉鎮(zhèn),5個(gè)不同地區(qū)寬葉獨(dú)行菜揮發(fā)油中化學(xué)成分存在一定差異,但主要成分都以異硫氰酸酯類為主,其中尤以異硫氰酸烯丙酯含量最高。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,蘆丁,標(biāo)準(zhǔn)曲線,溶液


獨(dú)行菜供試品溶液的制備獨(dú)行菜樣品粉碎,過 15 目篩,取 2 g 樣品加入 100 mL 錐形瓶中0 mL 密封后超聲提取 60 min,超聲波輔助提取功率為 360 W,超曲線的繪制取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于 10 mL0%乙醇溶液至 6 mL,分別加入 5%亞硝酸鈉溶液 0.3 mL,震蕩搖加入 10%AgNO3 硝酸鋁溶液 0.3 mL,搖勻后放置 6 min,加入 H 溶液,用 30%乙醇定容至 10 mL,搖勻后放置 15 min,從中吸入比色皿,檢測(cè)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液 510 nm 波長(zhǎng)的吸光度,并以 0 mL 管蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液的不同濃度值,縱軸為不同濃度值對(duì)應(yīng)的吸光度值,)。

總黃酮,分析因素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果


寬葉獨(dú)行菜總黃酮的提取純化及指紋圖譜研究結(jié)果與分析因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果同乙醇濃度對(duì)寬葉獨(dú)行菜總黃酮提取量的影響2-2 看出,當(dāng)乙醇濃度在 30%-70%時(shí),寬葉獨(dú)行菜中總黃酮提而增大;當(dāng)達(dá)到 80%-90%時(shí),總黃酮提取量反而下降,,可能即寬葉獨(dú)行菜的總黃酮在高濃度乙醇中不易溶解,進(jìn)而導(dǎo)致量減少;因此 70%的乙醇濃度為提取寬葉獨(dú)行菜中總黃酮的
【學(xué)位授予單位】:青海師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:O657.72;TQ28

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2628751

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