‘蘋(píng)果梨’果實(shí)花青苷合成調(diào)控基因PyMYB的克隆與表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2024-04-10 03:09
’蘋(píng)果梨’(Pyrus bretchneideri Rehd.’Pingguoli’)是延邊地區(qū)特色的果品之一,是吉林省特產(chǎn),同時(shí)也是北方寒溫帶地區(qū)的名貴果品之一!O(píng)果梨’不僅具有較強(qiáng)的抗寒性,而且果實(shí)較大,是能夠著紅色的優(yōu)良梨品種。紅梨的外觀品質(zhì)好,商品價(jià)值高,市場(chǎng)需求量大,因此選育優(yōu)良的紅梨品種是促進(jìn)梨產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展,同時(shí)也是梨樹(shù)育種的重要方向;由于紅梨品種稀少,選育優(yōu)良的紅梨品種成為梨樹(shù)資源研究領(lǐng)域丞待解決的問(wèn)題。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外關(guān)于梨果皮著色機(jī)理有一定的研究突破,在’蘋(píng)果梨’果皮著色機(jī)制中的相關(guān)結(jié)構(gòu)基因已有深入的研究,但對(duì)其調(diào)控基因的研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)以延邊的’蘋(píng)果梨’果皮作為材料,克隆其花青苷生物合成過(guò)程中的調(diào)控基因MYB10、MYB114,并測(cè)定套袋與不套袋果實(shí)著色期間果皮的花青苷含量變化,同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析MYB10與MYB114的表達(dá)特性。主要研究結(jié)果如下:1本實(shí)驗(yàn)成功獲得了’蘋(píng)果梨’果皮花青苷合成過(guò)程中的相關(guān)調(diào)節(jié)基因PyMYB1 0a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA序列。序列分析結(jié)果顯示兩基因cDNA全長(zhǎng)分別為736 bp和744 bp。PyMYB10a的O...
【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviation)
前言
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 植物材料
1.1.2 酶和生化試劑以及試劑盒
1.1.3 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
1.1.4 溶液及培養(yǎng)基配制
1.2 試驗(yàn)處理及方法
1.2.1 套袋處理
1.2.2 取樣及處理
1.2.3 花青苷的提取與測(cè)定
1.2.4 ‘蘋(píng)果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA的克隆
1.2.5 生物信息學(xué)分析
1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 ‘蘋(píng)果梨’果皮花青苷含量的測(cè)定
2.2 ‘蘋(píng)果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA的克隆及序列分析
2.2.1 果皮總RNA的提取及檢測(cè)
2.2.2 PyMYB10a和PyMYB114的克隆
2.2.3 PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA序列分析
2.3 ‘蘋(píng)果梨'果實(shí)著色過(guò)程中花青苷合成相關(guān)PyMYB10a相PyMYB114的表達(dá)分析
2.3.1 樣品果皮總RNA的提取
2.3.2 目的基因片段的常規(guī)PCR擴(kuò)增與鑒定
2.3.3 引物的擴(kuò)增效率與標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
2.3.4 PyMYB10a和PyMYB114的實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3950049
【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviation)
前言
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 植物材料
1.1.2 酶和生化試劑以及試劑盒
1.1.3 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
1.1.4 溶液及培養(yǎng)基配制
1.2 試驗(yàn)處理及方法
1.2.1 套袋處理
1.2.2 取樣及處理
1.2.3 花青苷的提取與測(cè)定
1.2.4 ‘蘋(píng)果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA的克隆
1.2.5 生物信息學(xué)分析
1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 ‘蘋(píng)果梨’果皮花青苷含量的測(cè)定
2.2 ‘蘋(píng)果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA的克隆及序列分析
2.2.1 果皮總RNA的提取及檢測(cè)
2.2.2 PyMYB10a和PyMYB114的克隆
2.2.3 PyMYB10a和PyMYB114全長(zhǎng)cDNA序列分析
2.3 ‘蘋(píng)果梨'果實(shí)著色過(guò)程中花青苷合成相關(guān)PyMYB10a相PyMYB114的表達(dá)分析
2.3.1 樣品果皮總RNA的提取
2.3.2 目的基因片段的常規(guī)PCR擴(kuò)增與鑒定
2.3.3 引物的擴(kuò)增效率與標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
2.3.4 PyMYB10a和PyMYB114的實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3950049
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