‘蘋果梨’果實花青苷合成調(diào)控基因PyMYB的克隆與表達分析
發(fā)布時間:2024-04-10 03:09
’蘋果梨’(Pyrus bretchneideri Rehd.’Pingguoli’)是延邊地區(qū)特色的果品之一,是吉林省特產(chǎn),同時也是北方寒溫帶地區(qū)的名貴果品之一!O果梨’不僅具有較強的抗寒性,而且果實較大,是能夠著紅色的優(yōu)良梨品種。紅梨的外觀品質(zhì)好,商品價值高,市場需求量大,因此選育優(yōu)良的紅梨品種是促進梨產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展,同時也是梨樹育種的重要方向;由于紅梨品種稀少,選育優(yōu)良的紅梨品種成為梨樹資源研究領(lǐng)域丞待解決的問題。近年來,國內(nèi)外關(guān)于梨果皮著色機理有一定的研究突破,在’蘋果梨’果皮著色機制中的相關(guān)結(jié)構(gòu)基因已有深入的研究,但對其調(diào)控基因的研究報道較少。本試驗以延邊的’蘋果梨’果皮作為材料,克隆其花青苷生物合成過程中的調(diào)控基因MYB10、MYB114,并測定套袋與不套袋果實著色期間果皮的花青苷含量變化,同時采用實時熒光定量PCR分析MYB10與MYB114的表達特性。主要研究結(jié)果如下:1本實驗成功獲得了’蘋果梨’果皮花青苷合成過程中的相關(guān)調(diào)節(jié)基因PyMYB1 0a和PyMYB114全長cDNA序列。序列分析結(jié)果顯示兩基因cDNA全長分別為736 bp和744 bp。PyMYB10a的O...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviation)
前言
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 植物材料
1.1.2 酶和生化試劑以及試劑盒
1.1.3 試驗儀器與設(shè)備
1.1.4 溶液及培養(yǎng)基配制
1.2 試驗處理及方法
1.2.1 套袋處理
1.2.2 取樣及處理
1.2.3 花青苷的提取與測定
1.2.4 ‘蘋果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA的克隆
1.2.5 生物信息學(xué)分析
1.2.6 實時熒光定量PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 ‘蘋果梨’果皮花青苷含量的測定
2.2 ‘蘋果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA的克隆及序列分析
2.2.1 果皮總RNA的提取及檢測
2.2.2 PyMYB10a和PyMYB114的克隆
2.2.3 PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA序列分析
2.3 ‘蘋果梨'果實著色過程中花青苷合成相關(guān)PyMYB10a相PyMYB114的表達分析
2.3.1 樣品果皮總RNA的提取
2.3.2 目的基因片段的常規(guī)PCR擴增與鑒定
2.3.3 引物的擴增效率與標準曲線的制備
2.3.4 PyMYB10a和PyMYB114的實時熒光定量PCR分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3950049
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviation)
前言
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 植物材料
1.1.2 酶和生化試劑以及試劑盒
1.1.3 試驗儀器與設(shè)備
1.1.4 溶液及培養(yǎng)基配制
1.2 試驗處理及方法
1.2.1 套袋處理
1.2.2 取樣及處理
1.2.3 花青苷的提取與測定
1.2.4 ‘蘋果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA的克隆
1.2.5 生物信息學(xué)分析
1.2.6 實時熒光定量PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 ‘蘋果梨’果皮花青苷含量的測定
2.2 ‘蘋果梨’果皮PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA的克隆及序列分析
2.2.1 果皮總RNA的提取及檢測
2.2.2 PyMYB10a和PyMYB114的克隆
2.2.3 PyMYB10a和PyMYB114全長cDNA序列分析
2.3 ‘蘋果梨'果實著色過程中花青苷合成相關(guān)PyMYB10a相PyMYB114的表達分析
2.3.1 樣品果皮總RNA的提取
2.3.2 目的基因片段的常規(guī)PCR擴增與鑒定
2.3.3 引物的擴增效率與標準曲線的制備
2.3.4 PyMYB10a和PyMYB114的實時熒光定量PCR分析
3 討論
4 結(jié)論
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