植物受到重金屬鎘脅迫后,會(huì)造成ROS大量爆發(fā),從而對植物生長產(chǎn)生氧化損傷。在擬南芥中,研究發(fā)現(xiàn)根尖中兩種ROS成分(過氧化氫,H2O2和超氧陰離子O2·-)對植物根的生長和分化具有重要作用,其二者在正常根系中維持一種平衡狀態(tài),而這種平衡被打破則抑制植物根的生長。同時(shí)亦有研究證明H2S可以清除鎘污染下植物體內(nèi)ROS積累。因此本研究據(jù)此上兩種理論,推測鎘污染對于抑制不結(jié)球白菜根系生長是否與根尖中ROS平衡狀態(tài)被破壞有關(guān),以及在鎘污染下內(nèi)源H2S是否也參與調(diào)節(jié)了活性氧平衡通路。本研究利用熒光組織染色技術(shù)和熒光定量方法研究鎘污染與ROS平衡之間的關(guān)系對根生長的影響以及氣體信號分子H2S在此過程中所起的作用。主要研究結(jié)果如下:1、鎘在4 μM和16 μM濃度下處理不結(jié)球白菜根尖72 h,均抑制根的生長,抑制率分別是23%和53%,但是組織化學(xué)染色證實(shí)4μM鎘沒有引起根尖氧化損傷和細(xì)胞死亡,而16 μM鎘則引起了此反應(yīng);4 μμM鎘處理不同時(shí)間與對照相比提高了根尖H2O2含量、降低O2·-含量下降;16μM鎘處理則同時(shí)通過了根尖H2O2、O2·-含量;通過外源添加NADPH氧化酶抑制劑二聯(lián)苯碘清除...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 重金屬鎘的研究進(jìn)展
        1.1 重金屬鎘的發(fā)現(xiàn)
        1.2 重金屬鎘對植物的毒害作用
        1.3 重金屬鎘對人類的毒害作用
        1.4 植物對重金屬鎘毒性的抗性機(jī)制
    2 活性氧
        2.1 O2
·-在根尖的定位
        2.2 H₂O₂在根尖的定位
        2.3 植物根尖生長的狀態(tài)
        2.4 擬南芥UPB1基因?qū)ΩD(zhuǎn)化區(qū)域的影響
        2.5 ROS中H₂O₂升高對擬南芥根長的影響
        2.6 ROS中O2
·-降低對擬南芥根長的影響
        2.7 ROS平衡的重要性
        2.8 UPB1基因調(diào)節(jié)根的生長不依賴于生長素/細(xì)胞分裂素信號途徑
    3 硫化氫
        3.1 硫化氫的產(chǎn)生
        3.2 硫化氫參與植物多種生理作用
第二章 鎘通過干擾ROS平衡抑制不結(jié)球白菜根生長
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鎘在特定濃度下抑制了根生長但沒有引起氧化損傷和細(xì)胞死亡
        2.2 鎘打破了不結(jié)球白菜根尖中ROS平衡
        2.3 鎘打破了不結(jié)球白菜根尖中ROS的平衡具有時(shí)間效應(yīng)
        2.4 鎘污染下ROS平衡的改變與根長抑制關(guān)系
    3 小結(jié)與討論
第三章 H₂S調(diào)控Br_UPB1s及其靶基因表達(dá)參與調(diào)節(jié)根尖中ROS平衡
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
        1.3 RNA提取、反轉(zhuǎn)和qRT-PCR反應(yīng)體系
        1.4 Br_UPB1s基因及其靶標(biāo)基因篩選
        1.5 Br_LCDs和Br_DCDs基因熒光定量表達(dá)分析
        1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鎘處理下根尖內(nèi)源H₂S含量變化
        2.2 鎘處理下內(nèi)源H₂S調(diào)節(jié)根尖中O2
·-和H₂O₂含量變化
        2.3 鎘處理下對根尖Br_LCDs和Br_DCDs表達(dá)的影響
        2.4 不結(jié)球白菜數(shù)據(jù)庫中UPB1和其靶基因的檢索分析
        2.5 鎘脅迫下內(nèi)源H₂S參與調(diào)節(jié)UPB1及其靶基因的表達(dá)
        2.6 鎘脅迫下通過層次聚類分析根尖中H2S和ROS相互作用
    3 小結(jié)與討論
第四章 Br_UPB1A基因克隆與生物信息學(xué)分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 Br_UPB1A基因PCR擴(kuò)增和TA克隆
        2.2 Bra
UPB1A基因開放閱讀框分析
        2.3 Bra_UPB1A蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的分析
        2.4 Bra_UPB1A氨基酸多重序列比對
        2.5 Bra_UPB1A基因啟動(dòng)子區(qū)域順式作用元件分析
        2.6 Bra_UPB1A蛋白質(zhì)親疏水性分析
        2.7 Bra UPB1A蛋白質(zhì)的信號肽預(yù)測
        2.8 Bra_UPB1A蛋白質(zhì)亞細(xì)胞內(nèi)定位和跨膜區(qū)預(yù)測
        2.9 Bra_UPB1A蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測
    3 討論
全文結(jié)論
創(chuàng)新之處
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文
致謝



本文編號：3850233

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