干旱是三大自然災害之一,在全球頻繁發(fā)生,嚴重影響農作物的產量和品質。番茄（Solanum lycopersicum）是重要的果菜,種植面積廣,生產總量高。番茄同時還是科學研究的重要模式植物,但栽培番茄一般對干旱等逆境脅迫較敏感。傳統(tǒng)育種能夠提高番茄的抗旱性,但篩選復雜、成本高、效率低下。由于對番茄的干旱應答和耐旱機制的研究不夠深入,極大地限制了番茄耐早遺傳改良的進程。因此,發(fā)掘耐旱基因成為番茄乃至所有農作物研究的熱點和重要發(fā)展戰(zhàn)略。本研究以課題組前期干旱篩選得到的番茄抗旱漸滲系IL9-1為基礎,開展耐早基因的定位和候選研究。取得的主要研究結果如下:1 針對野生潘那利番茄和栽培番茄位于IL9-1區(qū)段的可能插入/缺失（InDe1）序列設計引物,通過PCR驗證獲得19對多態(tài)性InDe1標記。2 通過IL9-1與輪回親本M82雜交和進一步自交,結合分子標記篩選,構建了該漸滲系的亞系群體,共含50個株系。3 通過對亞系基因型分析和耐旱性鑒定篩選,發(fā)現(xiàn)IL9-1的滲入片段可能含有一個或多個耐旱相關的QTL位點。初步定位到兩個耐旱區(qū)段,大小分別為708 kb和131 kb,區(qū)段內含有抗壞血酸過氧化氫... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：81 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１部分多態(tài)性標記在不同材料中的電泳條帶??－

?ｌｎＤｅｉｙ４?ｌｎＤｅｌ３０６??圖１．１部分多態(tài)性標記在不同材料中的電泳條帶??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：輪回親本?Ｍ８２、Ｐ：潘那利，Ｆ１：?Ｍ?和?Ｐ?的雜交?Ｆｐ?ＩＬ９－１）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｂａｎｄｓ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ?ｍａｒｋｅｒｓ?ａｍｏｎｇ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｍａｔｅｒｉａｌｓ??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：?ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ?ｐａｒｅｎｔ?Ｍ８２；?Ｐ：?Ｓ．?ｐｅｎｎｅｌｌｉｉ?ＬＡ０７１６，?Ｆｉ：?Ｆｉ?ｄｅｒｉｖｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｍ８２??ａｎｄＰ，ＩＬ９－ｌ）??２．２重組單株的篩選和基因型分析??２．２．１分離群體重組單株的篩選??本次亞系群體的構建分為兩次，選取了上端標記ＩｎＤｅｌｙ４和下端標記??ＩｎＤｅｌｘ２ｃ對２０５０棵Ｆ２進行分析，篩選重組單株（圖１．２），得到６０個系，經過??繁種最終得到５０個重組單株。重組單株Ｆ３代經過篩選得到純合亞系（圖１．５），??進一步繁種最終得到５０個亞系，各系編號分別為：１２、３８７、２８４、１２１、１０７５、??６、?４８０、?Ｘ２、?２２１、?３６０、?４６８、?９４４、?５２、?５５８、?１

利用開發(fā)的１９對分子標記以及ＣＡＰＳ標記ＧＰ３９，?ＲＦＬＰ標記ＴＧ９和??ＣｔｏＢ－ｌ－Ｋ３?（來源于番前在線數據庫（ｈｔｔｐｓ：／／ｓｏｌｇｅｎｏｍｉｃｓ．ｎｅｔ／）），對上述５０個亞??系以及漸滲系ＩＬ９－１－２、ＩＬ９－２－５的基因型進行了分析（圖１．３），確定了各個株系??的交換位點，共找到１３個交換位點。對這些交換位點進行簡單計算，發(fā)現(xiàn)最小??的片段只有０．１６?Ｍｂ左右，最大片段幾乎覆蓋整個ＩＬ９－１滲入區(qū)段，其他亞系滲??入的片段大小不等，具有較好的多態(tài)性（圖１．４）。??？２：工之?ＣＬＬｌ－Ｔ－ｃ〇Ｃ〇ｔ－Ｃ〇ＴｔＣＮＪ?奪?Ｔ－寸寸寸寸??ｌｎＤｅｌ１４０??ｌｎＤｅｌ３０６?Ｉ??ｌｎＤｅｌｘ２ｃ?Ｉ??圖１．３部分亞系基因型分析??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：輪回親本Ｍ８２，?Ｐ：潘那利，Ｆｐ?Ｍ和Ｐ的雜交??Ｆｉｇ．?１．３?Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?ｓｕｂ－ＩＬｓ??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：?ｔｈｅ?ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ?ｐａｒｅｎｔ?Ｍ８２；?Ｐ：?Ｓ．?ｐｅｎｎｅｌｌｉｉ?ＬＡ０７１６，?Ｆｉ：?Ｆ

【參考文獻】：
期刊論文
[1]三七病程相關蛋白PR10-1基因克隆及功能初步分析[J]. 唐美瓊,閔丹丹,李剛,蔣妮,葉云峰.  藥學學報. 2015(02)
[2]作物滲透調節(jié)及抗?jié)B透脅迫基因工程研究進展[J]. 楊德光,劉永璽,張倩,姜籽竹,宋北光.  作物雜志. 2015(01)
[3]蠟梅胚胎晚期豐富蛋白基因CpLEA的克隆及表達分析[J]. 馬婧,孫文婷,王晶,眭順照,李名揚.  園藝學報. 2014(08)
[4]番茄耐旱和耐鹽遺傳改良的研究進展及展望[J]. 孫玉燕,劉磊,鄭崢,張春芝,周龍溪,宗園園,李濤,李君明.  園藝學報. 2012(10)
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[6]中國作物新基因發(fā)掘:現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)與展望[J]. 邱麗娟,郭勇,黎裕,王曉波,周國安,劉章雄,周時榮,李新海,馬有志,王建康,萬建民.  作物學報. 2011(01)
[7]利用Solanum pennellii LA716漸滲系群體對番茄苗期耐鹽QTLs進行定位及QTL效應的初步分析[J]. 余慶輝,劉磊,王柏柯,楊生保,楊濤,李君明,侯喜林.  中國農業(yè)科學. 2010(04)
[8]生物自由基與植物膜傷害[J]. 王寶山.  植物生理學通訊. 1988(02)

博士論文
[1]基于潘那利番茄漸滲系發(fā)掘干旱脅迫響應基因及功能分析[D]. 弓鵬娟.華中農業(yè)大學 2010

碩士論文
[1]番茄MYB轉錄因子的鑒定及其表達分析[D]. 劉淑君.浙江師范大學 2012



本文編號：3442380