干旱是三大自然災(zāi)害之一,在全球頻繁發(fā)生,嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。番茄（Solanum lycopersicum）是重要的果菜,種植面積廣,生產(chǎn)總量高。番茄同時(shí)還是科學(xué)研究的重要模式植物,但栽培番茄一般對(duì)干旱等逆境脅迫較敏感。傳統(tǒng)育種能夠提高番茄的抗旱性,但篩選復(fù)雜、成本高、效率低下。由于對(duì)番茄的干旱應(yīng)答和耐旱機(jī)制的研究不夠深入,極大地限制了番茄耐早遺傳改良的進(jìn)程。因此,發(fā)掘耐旱基因成為番茄乃至所有農(nóng)作物研究的熱點(diǎn)和重要發(fā)展戰(zhàn)略。本研究以課題組前期干旱篩選得到的番茄抗旱漸滲系IL9-1為基礎(chǔ),開展耐早基因的定位和候選研究。取得的主要研究結(jié)果如下:1 針對(duì)野生潘那利番茄和栽培番茄位于IL9-1區(qū)段的可能插入/缺失（InDe1）序列設(shè)計(jì)引物,通過PCR驗(yàn)證獲得19對(duì)多態(tài)性InDe1標(biāo)記。2 通過IL9-1與輪回親本M82雜交和進(jìn)一步自交,結(jié)合分子標(biāo)記篩選,構(gòu)建了該漸滲系的亞系群體,共含50個(gè)株系。3 通過對(duì)亞系基因型分析和耐旱性鑒定篩選,發(fā)現(xiàn)IL9-1的滲入片段可能含有一個(gè)或多個(gè)耐旱相關(guān)的QTL位點(diǎn)。初步定位到兩個(gè)耐旱區(qū)段,大小分別為708 kb和131 kb,區(qū)段內(nèi)含有抗壞血酸過氧化氫... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１部分多態(tài)性標(biāo)記在不同材料中的電泳條帶??－

?ｌｎＤｅｉｙ４?ｌｎＤｅｌ３０６??圖１．１部分多態(tài)性標(biāo)記在不同材料中的電泳條帶??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：輪回親本?Ｍ８２、Ｐ：潘那利，Ｆ１：?Ｍ?和?Ｐ?的雜交?Ｆｐ?ＩＬ９－１）??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｂａｎｄｓ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ?ｍａｒｋｅｒｓ?ａｍｏｎｇ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｍａｔｅｒｉａｌｓ??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：?ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ?ｐａｒｅｎｔ?Ｍ８２；?Ｐ：?Ｓ．?ｐｅｎｎｅｌｌｉｉ?ＬＡ０７１６，?Ｆｉ：?Ｆｉ?ｄｅｒｉｖｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｍ８２??ａｎｄＰ，ＩＬ９－ｌ）??２．２重組單株的篩選和基因型分析??２．２．１分離群體重組單株的篩選??本次亞系群體的構(gòu)建分為兩次，選取了上端標(biāo)記ＩｎＤｅｌｙ４和下端標(biāo)記??ＩｎＤｅｌｘ２ｃ對(duì)２０５０棵Ｆ２進(jìn)行分析，篩選重組單株（圖１．２），得到６０個(gè)系，經(jīng)過??繁種最終得到５０個(gè)重組單株。重組單株Ｆ３代經(jīng)過篩選得到純合亞系（圖１．５），??進(jìn)一步繁種最終得到５０個(gè)亞系，各系編號(hào)分別為：１２、３８７、２８４、１２１、１０７５、??６、?４８０、?Ｘ２、?２２１、?３６０、?４６８、?９４４、?５２、?５５８、?１

利用開發(fā)的１９對(duì)分子標(biāo)記以及ＣＡＰＳ標(biāo)記ＧＰ３９，?ＲＦＬＰ標(biāo)記ＴＧ９和??ＣｔｏＢ－ｌ－Ｋ３?（來源于番前在線數(shù)據(jù)庫（ｈｔｔｐｓ：／／ｓｏｌｇｅｎｏｍｉｃｓ．ｎｅｔ／）），對(duì)上述５０個(gè)亞??系以及漸滲系ＩＬ９－１－２、ＩＬ９－２－５的基因型進(jìn)行了分析（圖１．３），確定了各個(gè)株系??的交換位點(diǎn)，共找到１３個(gè)交換位點(diǎn)。對(duì)這些交換位點(diǎn)進(jìn)行簡單計(jì)算，發(fā)現(xiàn)最小??的片段只有０．１６?Ｍｂ左右，最大片段幾乎覆蓋整個(gè)ＩＬ９－１滲入?yún)^(qū)段，其他亞系滲??入的片段大小不等，具有較好的多態(tài)性（圖１．４）。??？２：工之?ＣＬＬｌ－Ｔ－ｃ〇Ｃ〇ｔ－Ｃ〇ＴｔＣＮＪ?奪?Ｔ－寸寸寸寸??ｌｎＤｅｌ１４０??ｌｎＤｅｌ３０６?Ｉ??ｌｎＤｅｌｘ２ｃ?Ｉ??圖１．３部分亞系基因型分析??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：輪回親本Ｍ８２，?Ｐ：潘那利，Ｆｐ?Ｍ和Ｐ的雜交??Ｆｉｇ．?１．３?Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?ｓｕｂ－ＩＬｓ??（Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ，?Ｍ８２：?ｔｈｅ?ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ?ｐａｒｅｎｔ?Ｍ８２；?Ｐ：?Ｓ．?ｐｅｎｎｅｌｌｉｉ?ＬＡ０７１６，?Ｆｉ：?Ｆ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]蠟梅胚胎晚期豐富蛋白基因CpLEA的克隆及表達(dá)分析[J]. 馬婧,孫文婷,王晶,眭順照,李名揚(yáng).  園藝學(xué)報(bào). 2014(08)
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[6]中國作物新基因發(fā)掘:現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)與展望[J]. 邱麗娟,郭勇,黎裕,王曉波,周國安,劉章雄,周時(shí)榮,李新海,馬有志,王建康,萬建民.  作物學(xué)報(bào). 2011(01)
[7]利用Solanum pennellii LA716漸滲系群體對(duì)番茄苗期耐鹽QTLs進(jìn)行定位及QTL效應(yīng)的初步分析[J]. 余慶輝,劉磊,王柏柯,楊生保,楊濤,李君明,侯喜林.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(04)
[8]生物自由基與植物膜傷害[J]. 王寶山.  植物生理學(xué)通訊. 1988(02)

博士論文
[1]基于潘那利番茄漸滲系發(fā)掘干旱脅迫響應(yīng)基因及功能分析[D]. 弓鵬娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]番茄MYB轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及其表達(dá)分析[D]. 劉淑君.浙江師范大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3442380