番茄（Solanum lycopersicum）是世界上廣泛種植的蔬菜之一,是研究呼吸躍變型果實(shí)的模式植物。各種植物激素參與調(diào)控番茄果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程。細(xì)胞分裂素能夠促進(jìn)果實(shí)的細(xì)胞分裂,使果實(shí)增大、增加果實(shí)重量、延緩果實(shí)衰老、提高果實(shí)產(chǎn)量等。為了研究?jī)?nèi)源細(xì)胞分裂素對(duì)番茄果實(shí)的影響,本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了番茄果實(shí)特異性啟動(dòng)子Tfm7驅(qū)動(dòng)擬南芥（Arabidopsis thaliana）細(xì)胞分裂素氧化酶2基因（cytokinin oxidase, AtCKX2）的表達(dá)載體,通過(guò)農(nóng)桿菌（Agrobacterium tumefaciens）轉(zhuǎn)化的方法獲得轉(zhuǎn)基因植株。利用啟動(dòng)子Tfm7和目的基因AtCKX2的特異性引物,對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行驗(yàn)證,PCR結(jié)果表明啟動(dòng)子Tfm7和目的基因AtCKX2已經(jīng)轉(zhuǎn)進(jìn)番茄植株內(nèi)。qRT-PCR結(jié)果顯示:AtCKX2基因在番茄植株的葉片內(nèi)不表達(dá),在授粉后的花中表達(dá)。AtCKX2基因在授粉花后5 d的果實(shí)中表達(dá)量最高,隨著果實(shí)的發(fā)育,AtCKX2基因的表達(dá)量逐漸下降,在果實(shí)發(fā)育后期表達(dá)量最低。對(duì)番茄果實(shí)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)中內(nèi)源細(xì)胞分裂素玉米素（zeatin, ZT）、... 

【文章來(lái)源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

番茄植株的表型與基因鑒定

可溶性糖和可溶性蛋白是果實(shí)品質(zhì)的重要指標(biāo)。野生型和轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)中可溶性糖含量分別為64.02和54.32 mg/g(圖5A)，轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)內(nèi)可溶性糖含量顯著性降低了15.2%(P<0.05)。野生型和轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)中的可溶性蛋白含量分別為36.78和24.60 mg/g(圖5B)，轉(zhuǎn)基因果實(shí)可溶性蛋白的含量顯著性減少了33.12%(P<0.05)�？傻味ㄋ岫仁欠压麑�(shí)風(fēng)味的重要指標(biāo)，轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)中可滴定酸的含量顯著性高于野生型，可滴定酸的含量提高了72.9%(P<0.05)(圖5C)。簡(jiǎn)單地測(cè)量果實(shí)的糖和酸含量并不能真正體現(xiàn)果實(shí)的口感和風(fēng)味，還需要進(jìn)行糖酸度的比較，才能體現(xiàn)果實(shí)口感和風(fēng)味的變化。在本研究中，番茄果實(shí)的糖酸比為可溶性糖含量與可滴定酸含量的比值，可溶性糖含量/可滴定酸含量比值越大，說(shuō)明果實(shí)內(nèi)糖含量多，口感越偏甜。野生型植株果實(shí)糖酸比是轉(zhuǎn)基因植株果實(shí)糖酸比的2.04倍(P<0.05)(圖5D)，表明內(nèi)源細(xì)胞分裂素水平降低的轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)的糖酸比下降。結(jié)果顯示內(nèi)源細(xì)胞分裂素的降低影響了番茄果實(shí)的品質(zhì)。圖3 番茄果實(shí)中內(nèi)源細(xì)胞分裂素的含量

番茄果實(shí)中內(nèi)源細(xì)胞分裂素的含量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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