干旱是植物生長(zhǎng)的主要非生物脅迫之一,對(duì)葡萄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有嚴(yán)重的影響。篩選高抗旱葡萄砧木并加以利用,并研究葡萄抗旱相關(guān)基因,對(duì)葡萄抗旱具有重要的應(yīng)用價(jià)值和理論價(jià)值。本研究采用不同水分梯度對(duì)5種葡萄砧木進(jìn)行干旱脅迫處理,利用綜合評(píng)價(jià)體系篩選出一個(gè)較耐旱的砧木品種;基于葡萄基因組,分析葡萄LEA基因家族,比較其在滲透脅迫下的差異表達(dá),篩選出響應(yīng)最劇烈的目標(biāo)基因,通過(guò)克隆目標(biāo)基因并穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化葡萄砧木’41B’懸浮細(xì)胞,研究目標(biāo)基因的功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.利用主成分分析、隸屬函數(shù)分析和聚類分析,綜合評(píng)價(jià)出’110R’在5個(gè)待試砧木品種中的耐旱性最強(qiáng),其耐旱性綜合評(píng)價(jià)值（D值）最大,為0.871;結(jié)合灰色關(guān)聯(lián)度分析獲得與葡萄砧木耐旱性關(guān)聯(lián)度較高的指標(biāo)有抗氧化酶活性、葉片光合指數(shù)、膜質(zhì)過(guò)氧化水平和生物量,這些指標(biāo)均可作為首要的葡萄耐旱性評(píng)價(jià)鑒定指標(biāo)。2.通過(guò)隱馬爾科夫模型和BLAST以及保守結(jié)構(gòu)域的分析從葡萄基因組中鑒定出52個(gè)LRA基因。根據(jù)滲透脅迫下的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),對(duì)52個(gè)LEA基因進(jìn)行差異表達(dá)分析,發(fā)現(xiàn)有23個(gè)基因在滲透脅迫下表達(dá)量顯著上調(diào),熒光定量PCR驗(yàn)證發(fā)現(xiàn):葡萄LEA11基因在滲透脅... 

【文章來(lái)源】：寧夏大學(xué)寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－丨葡萄ＬＥＡ基因系統(tǒng)進(jìn)化分析??Ｆｉｇ?３－１?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＬＥＡ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｖｉｔｉｓ??

??利用ＧＳＤＳ在線軟件分析ＬＥＡ家族中各成員的基因結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示，每個(gè)ＬＥＡ基因都含有不等??數(shù)量的內(nèi)含子和外顯子，且葡萄ＬＥＡ基因結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單，所含的內(nèi)含子數(shù)量均不超過(guò)２個(gè)（圖３－??２）。在?ＬＥＡ－１，?ＬＥＡ－３，?ＬＥＡ－５，?ＬＥＡ－６?和?ｄｅｈｙｄｒｉｎ?基因亞家族中，除了?和?基因??結(jié)構(gòu)中含有２個(gè)內(nèi)含子外，其他所有成員基因結(jié)構(gòu)中均含有１個(gè)內(nèi)含子；在ＳＭＰ亞家族中，所有成員??基因結(jié)構(gòu)中含有２個(gè)內(nèi)含子；在ＬＥＡ－２亞家族中，多數(shù)基因結(jié)構(gòu)中只含１個(gè)內(nèi)含子。??圖３－丨葡萄ＬＥＡ基因系統(tǒng)進(jìn)化分析??Ｆｉｇ?３－１?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＬＥＡ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｖｉｔｉｓ??－２０－??

２０００ｂｐ??二７５０ｂｐ??圖３－３樣品總ＲＮＡ凝膠電泳圖??Ｆｉｇ?３－３?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅ??１：非脅迫條件下植物葉片總ＲＮＡ?２：脅迫條件下植物葉片總ＲＮＡ?Ｍ：?ＤＬ２０００?Ｍａｒｋｅｒ??１：?Ｔｈｅ?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅ?ｏｆ?ｇｒａｐｅ?ｌｅａｖｅｓ?ｉｎ?ｃｏｎｔｒｏｌ．?２：?Ｔｈｅ?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅ?ｏｆ?ｇｒａｐｅ?ｌｅａｖｅｓ?ｉｎ?ＰＥＧ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?Ｍ：?ＤＬ２０００?Ｍａｒｋｅｒ．??３．３．４葡萄ＺＭ基因在滲透脅迫下的表達(dá)模式分析??基因的表達(dá)模式與基因功能密切關(guān)聯(lián)，為了探索葡萄家族基因的潛在功能，利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序??對(duì)基因在滲透脅迫下的表達(dá)模式進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，將‘１１０Ｒ’組培苗在８％ＰＥＧ處理１２?ｈ后，有??２３個(gè)葡萄基因表達(dá)量上調(diào)（圖３－３），其中葡萄ＺＭ２７，??基因的表達(dá)量顯著上調(diào)；７個(gè)葡萄基因表達(dá)量下調(diào)，其中葡萄??乙似似，１似０２，?Ｌ￡＾３（５基因的表達(dá)量顯著下調(diào)。??基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，選取在滲透脅迫下表達(dá)量上調(diào)的５個(gè)葡萄基因（葡萄７２，１＾??刀，采用熒光定量ＰＣＲ，分析８％ＰＥＧ處理‘１１０Ｒ’組培苗Ｏｈ，?２ｈ，４ｈ，８ｈ，?１２ｈ和??２４ｈ時(shí)的基因差異表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]26個(gè)葡萄砧木品種耐旱性評(píng)價(jià)[J]. 李敏敏,袁軍偉,韓斌,劉長(zhǎng)江,孫艷,尹勇剛,賈楠,郭紫娟,趙勝建.  西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(04)
[2]5種葡萄砧木耐旱性評(píng)價(jià)及鑒定指標(biāo)的篩選[J]. 仝倩,施明,賀建勛,徐美隆.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2018(09)
[3]甘肅西部抗旱型玉米品種的綜合評(píng)價(jià)及篩選[J]. 張雪婷,楊文雄,柳娜,楊長(zhǎng)剛,王世紅,王新永.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2018(07)
[4]干旱脅迫下亞精胺對(duì)玉米幼苗抗旱性影響的生理生化機(jī)制[J]. 李麗杰,顧萬(wàn)榮,孟瑤,王悅力,穆君怡,李晶,魏湜.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2018(02)
[5]燕麥萌發(fā)期抗旱指標(biāo)體系構(gòu)建及綜合評(píng)價(jià)[J]. 張宇君,趙麗麗,王普昶,陳超,康芙蓉.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2017(11)
[6]PEG模擬干旱脅迫下花生品種萌發(fā)特性與抗旱性評(píng)價(jià)[J]. 崔宏亮,姚慶,李利民,苗昊翠.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2017(07)
[7]高糖脅迫下槲皮素對(duì)釀酒酵母胞內(nèi)損傷的保護(hù)作用與機(jī)制[J]. 徐曉丹,潘宇,柯尊麗,周志欽.  食品科學(xué). 2017(12)
[8]兩種煙草幼苗葉片對(duì)不同強(qiáng)度干旱脅迫的生理響應(yīng)比較[J]. 邵惠芳,陳征,許嘉陽(yáng),范藝寬,黃五星,張海樅,許自成.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(12)
[9]馬尾松谷胱甘肽過(guò)氧化物酶PmGPX6基因cDNA克隆及轉(zhuǎn)化擬南芥耐旱性初步研究[J]. 蔡瓊,丁貴杰,文曉鵬.  林業(yè)科學(xué)研究. 2016(06)
[10]大豆種質(zhì)資源苗期抗旱性評(píng)價(jià)[J]. 臧紫薇,趙雪,李海燕,李文濱,韓英鵬.  大豆科學(xué). 2016(06)

博士論文
[1]水旱條件下小麥產(chǎn)量性狀和抗旱性的全基因組關(guān)聯(lián)分析[D]. 屈春艷.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018

碩士論文
[1]葡萄砧木的抗旱與抗寒性評(píng)價(jià)[D]. 郝停停.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]四種葡萄砧木抗旱、耐鹽堿性的比較研究[D]. 孫茜.寧夏大學(xué) 2014
[3]歐李抗旱耐鹽的生理機(jī)制研究與快速繁殖體系的建立[D]. 陳書明.東北林業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3331855