番茄（Solanum Lycopersicum L.）屬喜溫果菜類蔬菜,在13³3℃可正常生長(zhǎng),低溫逆境會(huì)降低番茄果實(shí)的產(chǎn)量與品質(zhì)。已有研究表明,棉子糖寡糖在植物抗低溫逆境脅迫中具有重要作用,沙冬青（A.nanus）棉子糖寡糖代謝的關(guān)鍵酶-肌醇半乳糖苷酶（AnGolSs）超表達(dá)番茄植株抗寒性顯著提高。本試驗(yàn)分析了番茄肌醇半乳糖苷合成酶（SlGolSs）在低溫逆境下的表達(dá)水平,并通過外源施用棉子糖寡糖代謝相關(guān)物質(zhì)研究了SlGolSs及其他棉子糖代謝關(guān)鍵酶表達(dá)的影響,明確棉子糖家族寡糖對(duì)番茄低溫抗性的提升作用;在大腸桿菌中進(jìn)行SlGolSs蛋白原核表達(dá),分析肌醇半乳糖苷合成酶在低溫脅迫下的作用;最終將篩選確定的SlGolSs在番茄中過表達(dá),以期提高番茄的低溫抗性。論文主要結(jié)論如下:（1）利用qRT-PCR分析了低溫處理后番茄根、莖、葉SlGolS1,2,3,4基因表達(dá)水平,低溫處理下SlGolS2,4在番茄根、莖、葉中高效表達(dá),且隨處理時(shí)間逐漸升高。說明SlGolS2,4與番茄植株低溫響應(yīng)密切相關(guān)。（2）外源噴施棉子糖、蔗糖、肌醇、肌醇半乳糖苷（Gol）、亞胺糖1-脫... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

低溫應(yīng)答轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)（劉輝等,2014）

0h 4℃ 24h 4℃ 48h圖 2 低溫（4℃）處理番茄的表型變化Fig.2 Phenotypic changes of tomato treated on 4°C低溫處理下，在觀察番茄表型變化的同時(shí)，分別在 0h、12h、24h 和 48h 取幼苗的根、莖和葉，提取總 RNA，反轉(zhuǎn)錄得到 cDNA，實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)測(cè)定 SlGolS1,2,3,4基因表達(dá)量。由圖 3 可以看出，隨著低溫處理時(shí)間增加，番茄 SlGolS 各個(gè)基因的變化趨勢(shì)各不相同，SlGolS1 在番茄根、莖和葉中的變化趨勢(shì)相似，都是在處理 12h 后升高，隨后隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)而降低；SlGolS2 在番茄的根、莖和葉中的表達(dá)量都是隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增大，在低溫處理 48h 后，根、莖和葉的基因表達(dá)量已經(jīng)達(dá)到未處理時(shí)的 10 倍以上；SlGolS3 在番茄的根、葉片和莖中的表達(dá)量都是隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)逐漸降低，其中根的表達(dá)量下降幅度最明顯，處理 48h 時(shí)已經(jīng)下降到未處理時(shí)的 1/10；SlGolS4 在番茄的根、葉片和莖中的表達(dá)量都隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增大，且在根和莖中的增大幅度較為顯著。當(dāng)番茄遭受低溫脅迫時(shí) SlGolS2,4 高效表達(dá)，而 SlGolS1/3 表達(dá)量降低，這說明只有

圖 4 低溫（4℃）處理噴施棉子糖寡糖的番茄表型變化Fig.4 Phenotypic changes of tomato sprayed with RFOs at low temperature （4 °C）從左至右依次為 CK、Gol、DGJ、Gol+DGJ、肌醇、蔗糖、棉子糖，每株噴施 20mL，吸收 12h 后進(jìn)行 4°C 處理From the bottom to the right, CK（spray distilled water）, Galactinol, DGJ（inhibitor）, Galactinol + DGJ, inositol, sucrose,raffinose, spray about 20mL per plant, absorb 12h after spraying, and heat treatment at 4°C.3.2.1 低溫脅迫下外源噴施棉子糖寡糖對(duì)相對(duì)電導(dǎo)率的影響植物在逆境脅迫條件下，細(xì)胞膜會(huì)因受到破壞而導(dǎo)致膜透性增大，選擇透性的功能受到嚴(yán)重影響，電解質(zhì)從胞內(nèi)滲到胞外，從而使環(huán)境介質(zhì)的電導(dǎo)率增大。因此植物遭受脅迫嚴(yán)重與否，可以直接從環(huán)境介質(zhì)電導(dǎo)率上體現(xiàn)。如圖 5 所示，在低溫處理前，葉片電導(dǎo)率只有 10.313%，而在 4℃處理 48h 后，未噴施寡糖的 CK 電導(dǎo)率大幅度升高，是低溫處理前的 4.5 倍，噴施寡糖的 6 個(gè)處理雖然和 CK-0h 相比有所升高，但與 CK 相比均達(dá)到極顯著差異水平（P<0.01），電導(dǎo)率都在 25%以下，其中 DGJ 和 Gol 處理最低，都在 16%以下。這說明外施 DGJ 和 Gol 能夠減少電解質(zhì)的外滲，從而使細(xì)胞滲透勢(shì)維持在較穩(wěn)定的狀態(tài)。50%60%y（%）相對(duì)電導(dǎo)率

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]低溫脅迫對(duì)西瓜種子萌發(fā)的影響[D]. 蔣莉莉.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
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本文編號(hào)：3301014