柑橘黃龍病（Citrus Huanglongbing,簡稱HLB）是由候選韌皮部桿菌（Candidatus Liberibacter spp.）所引起的一種柑橘生產(chǎn)上的毀滅性病。隨著全球柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,在亞洲、非洲、美洲等柑橘主產(chǎn)區(qū)均有該病發(fā)生,幾乎危害柑橘屬的所有栽培品種,嚴(yán)重影響了柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。淀粉代謝異常是黃龍病菌感染柑橘后出現(xiàn)的最主要現(xiàn)象,柑橘染病后,在葉和莖中出現(xiàn)明顯的淀粉累積。本研究以砂糖橘為植物材料,從柑橘糖代謝過程中的顆粒結(jié)合淀粉合成酶（Granule-bound starch synthase,GBSS）、腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（ADP-glucose pyrophosphorylase,AGPase）和淀粉分解酶（Amylolytic enzyme）入手,分析砂糖橘被黃龍病菌亞洲種（“Ca.L.asiaticus”）侵染后,植株體內(nèi)淀粉合成、分解相關(guān)酶類的變化情況,進(jìn)一步揭示砂糖橘感病葉片累積淀粉這一病理變化的機(jī)制。黃龍病菌的分子檢測技術(shù)需要熟練的技術(shù)人員,昂貴的儀器設(shè)備和試劑等,不適合在田間大規(guī)模的檢測。如果能夠掌握黃龍病菌侵染引起植株變化的特性,研制一... 

【文章來源】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

快速檢測技術(shù)的實驗步驟圖

圖 2 快速檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)注：紅線左側(cè)為陽性樣品檢測結(jié)果圖，紅線右側(cè)為陰性樣品檢測結(jié)果圖3 結(jié)果與分析3.1 黃龍病菌侵染寄主植物造成淀粉積累的機(jī)理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘葉片中“Ca. L. asiaticus”的濃度變化利用實時熒光定量 PCR 對溫室中嫁接染病的砂糖橘葉片和健康對照砂糖橘進(jìn)行逐月連續(xù)檢測，研究葉片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度變化，根據(jù)重復(fù)三次的 Ct 值的平均值算出樣品中黃龍病菌的拷貝數(shù)（圖 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份證實“Ca. Lasiaticus”陽性，此時的菌拷貝數(shù)為 8.96×104GECN/g 柑橘組織，隨后在 5、6、7 月份菌拷貝數(shù)緩慢增長至 1.25×105GECN/g 柑橘組織，然后在 8 月份出現(xiàn)大幅度增長，達(dá)到 8.50×105GECN/g 柑橘組織，9 月份菌拷貝數(shù)小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘組

紅線右側(cè)為陰性樣品檢測結(jié)果圖3 結(jié)果與分析3.1 黃龍病菌侵染寄主植物造成淀粉積累的機(jī)理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘葉片中“Ca. L. asiaticus”的濃度變化利用實時熒光定量 PCR 對溫室中嫁接染病的砂糖橘葉片和健康對照砂糖橘進(jìn)行逐月連續(xù)檢測，研究葉片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度變化，根據(jù)重復(fù)三次的 Ct 值的平均值算出樣品中黃龍病菌的拷貝數(shù)（圖 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份證實“Ca. L.asiaticus”陽性，此時的菌拷貝數(shù)為 8.96×104GECN/g 柑橘組織，隨后在 5、6、7 月份菌拷貝數(shù)緩慢增長至 1.25×105GECN/g 柑橘組織，然后在 8 月份出現(xiàn)大幅度增長，達(dá)到 8.50×105GECN/g 柑橘組織，9 月份菌拷貝數(shù)小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘組織

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于分子技術(shù)的柑橘黃龍病研究進(jìn)展[J]. 許美容,戴澤翰,孔維文,鄧曉玲.  果樹學(xué)報. 2015(02)
[2]廣東柑橘黃龍病發(fā)生情況與防控對策淺析[J]. 周春娜,吳仕豪,曹俐.  中國植保導(dǎo)刊. 2015(01)
[3]不同柑橘品種對黃龍病的抗性鑒定[J]. 劉登全,崔朝宇,蔣軍喜,龍瓏.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2014(01)
[4]柑橘黃龍病研究進(jìn)展[J]. 程春振,曾繼吾,鐘云,閆化學(xué),姜波,鐘廣炎.  園藝學(xué)報. 2013(09)
[5]柑橘黃龍病診斷方法的研究進(jìn)展[J]. 高玉霞,盧占軍,劉志芳,鐘八蓮.  贛南師范學(xué)院學(xué)報. 2013(03)
[6]柑橘黃龍病病原菌非洲種和美洲種23S-5S rDNA序列的克隆及分析[J]. 廖惠紅,李楊瑞,楊麗濤,徐寧.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(17)
[7]有百年歷史的日益嚴(yán)重的毀滅性柑桔病害——黃龍病[J]. J·seph Marie Bove,付惠敏,陳傳武,白先進(jìn),趙學(xué)源.  廣西農(nóng)學(xué)報. 2011(04)
[8]中國柑橘黃龍病發(fā)生情況及防治現(xiàn)狀[J]. 李雪燕,項宇,胡文召.  中國植保導(dǎo)刊. 2011(04)
[9]常規(guī)和巢式PCR對柑橘黃龍病菌的檢測靈敏度比較[J]. 鹿連明,胡秀榮,張利平,黃振東,陳國慶.  熱帶作物學(xué)報. 2010(08)
[10]柑橘黃龍病病原研究進(jìn)展[J]. 胡文召,周常勇.  植物保護(hù). 2010(03)

博士論文
[1]Candidatus liberibacter asiaticus誘導(dǎo)的柑橘轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白組學(xué)研究[D]. 鐘云.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]柑橘宿主對黃龍病病原菌侵染的應(yīng)答機(jī)制[D]. 樊晶.重慶大學(xué) 2010

碩士論文
[1]柑橘黃龍病菌侵染對甜橙葉片糖代謝的影響研究[D]. 吳越.西南大學(xué) 2014
[2]缺硼對柑橘生理生化的影響[D]. 韓霜.福建農(nóng)林大學(xué) 2007



本文編號：3301019