發(fā)布時間：2021-02-25 22:03

　　不定根誘導(dǎo)是蘋果矮化砧木繁育的關(guān)鍵環(huán)節(jié),在調(diào)控不定根發(fā)生方面,蘋果中相關(guān)研究多集中生長素等傳統(tǒng)五大激素上,有關(guān)多胺等新型激素對不定根誘導(dǎo)調(diào)控研究較為薄弱,鑒于此,本研究以蘋果砧木‘圓葉海棠’（Malus prunifolia var.ringo）組培苗為主要試材,進(jìn)行外源亞精胺處理,研究亞精胺調(diào)控蘋果砧木不定根發(fā)生的調(diào)控效應(yīng),解析內(nèi)源激素變化規(guī)律,檢測相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平的改變,篩選關(guān)鍵基因,并利用煙草異源表達(dá)系統(tǒng)分析其調(diào)控不定根發(fā)生的功能,為蘋果產(chǎn)業(yè)中蘋果砧木的高效繁育提供理論指導(dǎo)。主要研究結(jié)果如下:1. 外源亞精胺處理后,根據(jù)不定根形成過程中的解剖學(xué)觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)亞精胺處理促進(jìn)了蘋果砧木‘圓葉海棠’的不定根形成,誘導(dǎo)了內(nèi)源激素生長素（IAA）和玉米素（ZR）在1d、3d和8d的含量上升,內(nèi)源激素脫落酸（ABA）和赤霉素（GA₃）在3d時顯著下降。亞精胺處理促進(jìn)了亞精胺（Spd）信號通路基因Md SAMDC1,Md PAO和Md SPDS6的相對表達(dá),提高了生長素通路基因Md ARF7,Md ARF19,Md IAA3,Md IAA14和Md IAA23的表達(dá),促... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

處理30天后，蘋果砧木基部AR形成的形態(tài)學(xué)觀察Fig2-2MorphologicalobservationsofARformationinbasalpartofMalusprunifoliavar.ringo

西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文122.2結(jié)果與分析2.2.1亞精胺處理對不同基因型蘋果的不定根形成的影響用亞精胺處理基因型蘋果如‘M26’、‘SH6’、‘GL3’和‘圓葉海棠’的試驗。培養(yǎng)30天后，不定根表型如下圖2-1所示。生根能力較好的‘圓葉海棠’品種的組培苗組中不定根最長，數(shù)目最多，而生根能力較差的‘SH6’和‘M26’品種的組培苗組中生根率很低且不定根數(shù)目較少、根長較短。圖2-1外源亞精胺處理30天不同基因型蘋果莖基部AR形成的形態(tài)學(xué)觀察Fig2-1MorphologicalobservationsofARformationinbasalpartofdifferentapplesafter30daysoftreatments2.2.2Spd，IBA及其抑制劑對蘋果不定根形成的影響將組培幼苗在含1mg/LIBA，1mg/LIBA+103mol/LD-Arg，2×105mol/LSpd，2×105mol/LSpd+2×105mol/LNPA，2×105mol/LSpd+1mg/LIBA的五組生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天。不定根表型結(jié)果如下圖2-2所示。IBA處理組中的不定根比Spd處理組中形成的不定根更粗。相較于IBA+D-Arg處理組，IBA處理組中的不定根也更長。IBA+D-Arg處理組中的組培苗不定根比IBA處理組和Spd處理組的不定根都更短小，并且比Spd處理組中的不定根更粗。與IBA處理組和IBA+D-Arg處理組相比，Spd處理組的不定根會更長且更細(xì)。Spd+NPA處理組沒有生根。Spd+IBA這一組處理中顯示出粗而長的不定根。圖2-2處理30天后，蘋果砧木基部AR形成的形態(tài)學(xué)觀察Fig2-2MorphologicalobservationsofARformationinbasalpartofMalusprunifoliavar.ringoapplerootstockafter30daysoftreatments

第二章外源亞精胺調(diào)控砧木‘圓葉海棠’不定根發(fā)生的效應(yīng)132.2.3不定根形態(tài)變化觀察試驗觀察到Spd處理對AR形成過程的影響。對照組的表型用于所有實驗測量參數(shù)的空白對照。Spd處理第8天后，能看見莖基部的AR發(fā)生，而對照組中并沒有出現(xiàn)AR（圖2-3A）。16天后，與未經(jīng)Spd處理的組相比，經(jīng)Spd處理過的組培苗產(chǎn)生的AR明顯增加（圖2-3A）。運用石蠟包埋的切片樣品進(jìn)行AR形成過程中的解剖學(xué)觀察，并使用光學(xué)顯微鏡（NikonEclipseE100）觀察莖基部不定根的變化。解剖學(xué)觀察結(jié)果如圖2-3B所示。在0天的切片橫截面上，顯示出皮質(zhì)（co），髓實質(zhì)（pi）和血管環(huán)（r）的存在。在第5天，能看見具有密集細(xì)胞質(zhì)和大細(xì)胞核的小細(xì)胞（smallcellswithadensecytoplasmandalargenucleus），即發(fā)育中的根分生組織的分生細(xì)胞（meristematiccells，mc）。8天后，在含有Spd的生根培養(yǎng)基中出現(xiàn)的第一根分生組織（firstrootmeristems，me）比對照組中的多。在第11天，Spd處理組中的包含根皮層的根體細(xì)胞數(shù)（cellsoftherootbodycontainingrootcortex，ro）比對照組多。16天后，用Spd處理過的植物中顯示出比對照組明顯更多的AR（圖2-3A）。圖2-3‘圓葉海棠’中ARs形成過程中的形態(tài)學(xué)觀察(A)和解剖學(xué)觀察(B)（Scalebars=100μm）Fig2-3Morphologicalobservations(A)andAnatomicalobservationsofARsformationinMalusprunifoliavar.ringoapplerootstock(Scalebars=100μminFig.B)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]蘋果砧木M9快繁技術(shù)的建立及試管苗生根進(jìn)程解剖研究[J]. 余亮,王飛.  西北林學(xué)院學(xué)報. 2013(04)
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[9]我國矮砧蘋果生產(chǎn)現(xiàn)狀與發(fā)展緩慢的原因分析及建議[J]. 李丙智,韓明玉,張林森,雷小明.  煙臺果樹. 2010(02)
[10]我國蘋果栽培模式的沿革與思考[J]. 孫建設(shè).  農(nóng)民科技培訓(xùn). 2008(02)

博士論文
[1]蘋果多胺和脯氨酸合成代謝相關(guān)基因的功能鑒定[D]. 王慶蓮.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]蘋果砧木不定根發(fā)育轉(zhuǎn)錄組及候選基因MdRRs和MdCRFs篩選與表達(dá)分析[D]. 李珂.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018



本文編號：3051644