【摘要】：番茄青枯病作為一種世界范圍內(nèi)的毀滅性土傳病害,對我國番茄生產(chǎn)造成了巨大的損失,因此,迫切需要探索有效防控番茄青枯病的措施。生物防控作為控制植物病害的有效措施,近年來受到人們的高度重視。放線菌作為活性天然物質(zhì)和藥物的主要微生物來源,是人們最早研究并應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)踐中的生防微生物。許多研究表明,拮抗微生物和有機(jī)肥料結(jié)合制備的生物有機(jī)肥比單一的拮抗微生物菌劑能更有效地防控植物土傳病害。本研究從多年連作的番茄根際土壤中分離篩選得到一株對番茄青枯菌(R.solanacearum ZJ3721)(簡稱青枯菌)具有顯著抑制作用的放線菌菌株,對其進(jìn)行鑒定,優(yōu)化發(fā)酵條件,并制備放線菌生物有機(jī)肥,驗(yàn)證其對番茄青枯病的實(shí)際防控效果。主要研究結(jié)果如下:1.采取江蘇省南京市麒麟鎮(zhèn)的番茄連作土壤樣品,以本實(shí)驗(yàn)室保存的番茄青枯菌R.solanacearum ZJ3721為指示菌,初篩分離純化得到6株對番茄青枯病菌有較好拮抗效果的放線菌菌株,分別編號為F5、F6、F14、F18、F27、F41,其中菌株F6、F18表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑菌作用。通過比較各菌株發(fā)酵濾液對番茄青枯菌的抑菌作用進(jìn)行復(fù)篩,選擇菌株F18作為實(shí)驗(yàn)菌株。菌株F18除對番茄青枯菌具有抑制作用之外,還對大麗輪枝菌,煙草根腐病病原菌,黃瓜、棉花、香蕉枯萎病菌均具有較強(qiáng)的抑制作用。2.通過對放線菌F18的形態(tài)及培養(yǎng)特征觀察、生理生化特性測定,以及16SrRNA基因序列分析,菌株F18屬于鏈霉菌屬Streptomyces。3.通過對菌株F18液體發(fā)酵培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化發(fā)現(xiàn),最適培養(yǎng)基成分為:可溶性淀粉 1%,大豆蛋白胨 0.4%,K2HPO4 0.05%,MgS04 0.05%,NaCl 0.05%,FeS040.01‰。使用有機(jī)氮源的發(fā)酵液比使用無機(jī)氮源表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑菌活性。最適發(fā)酵條件為:pH8;培養(yǎng)溫度28℃;裝液量65mL/250mL;接種量6%;搖床轉(zhuǎn)速180rpm;發(fā)酵時(shí)間132h。發(fā)酵條件優(yōu)化后培養(yǎng)得到的發(fā)酵濾液對番茄青枯菌的抑菌能力進(jìn)一步提高。菌株F18產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)主要為胞外代謝產(chǎn)物,水溶性強(qiáng),可溶于甲醇和乙醇,難溶于其他有機(jī)溶劑。4.本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)加入體積質(zhì)量比為10%的氨基酸酸解液的有機(jī)肥有利于菌株F18的生長繁殖和抑菌活性物質(zhì)的產(chǎn)生,在堆肥中加入氨基酸酸解液5天后接入F18菌懸液,菌株F18的生長狀況最好。盆栽和田間試驗(yàn)結(jié)果表明,氨基酸有機(jī)肥有利于菌株F18在土壤中的定殖,含有菌株F18的生物有機(jī)肥對青枯菌具有一定的抑制作用,并對植物生長具有一定的促進(jìn)作用,對番茄青枯病表現(xiàn)出較好的防控效果,且防控效果優(yōu)于單純向土壤里灌施F18菌懸液。
【圖文】：

圖１－１技術(shù)路線逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ邋Ｒｏａｄｍａｐ逡逑

．２菌株Ｆ１８對病原菌的抑制效果測定逡逑采用對峙培養(yǎng)法觀察測定Ｆ１８菌株對病原菌的抑制效果。將Ｆ１８菌株和病原分別涂布在ＰＤＡ平板上，于２８°Ｃ恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)７ｄ。分別用直徑為５ｍｍ器制成相同大小的菌塊，，將拮抗放線菌Ｆ１８菌塊接種于ＰＤＡ平板中央，再將原菌以每皿３個(gè)菌塊的數(shù)量接種于放線菌Ｆ１８菌塊一定距離的周圍，于２８°Ｃ養(yǎng)箱倒]培養(yǎng)７？１０ｄ．觀察測定菌株所產(chǎn)的抑菌圈ｍ徑大小。逡逑結(jié)果分析逡逑１拮抗放線菌的初篩逡逑分離純化得到６株對番茄青枯病菌有比較好拮抗效果的放線菌菌株，分別編、Ｆ６、Ｆ１４、Ｆ１８、Ｆ２７、Ｆ４１，其中邋Ｆ６、Ｆ１８、Ｆ２７、Ｆ４１邋來源于番茄根際土壤，兩株則來源于番茄十．體十。逡逑
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S436.412.15

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 伍善東;雷平;郭照輝;黃軍;程偉;付祖姣;單世平;;1株番茄青枯病內(nèi)生拮抗細(xì)菌的分離鑒定及盆栽防效[J];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2016年06期

2 李煥玲;;番茄青枯病的發(fā)生與綜合防治技術(shù)[J];北方園藝;2014年05期

3 王昌喜;鐘春梅;姚永才;;番茄青枯病的發(fā)病特點(diǎn)與防治關(guān)鍵[J];現(xiàn)代園藝;2013年19期

4 周天錄;;番茄青枯病咋防治[J];農(nóng)家參謀;2012年06期

5 彭應(yīng)錦;;番茄青枯病的診斷與防治[J];西北園藝(蔬菜�？�);2009年03期

6 王漢榮;茹水江;王連平;方麗;任海英;馮忠民;;嫁接防治番茄青枯病的研究[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2009年03期

7 李冰;賓飛燕;;番茄青枯病防治技術(shù)[J];農(nóng)家之友(理論版);2009年05期

8 黃天云;趙興愛;蔣雪榮;;嫁接番茄青枯病的防治措施[J];農(nóng)業(yè)科技通訊;2009年09期

9 付玉林;陳會寬;趙梅花;溫淑敏;;番茄青枯病的發(fā)生規(guī)律與防治措施[J];北京農(nóng)業(yè);2009年30期

10 賈慧春;;番茄青枯病的發(fā)生與防治[J];現(xiàn)代園藝;2008年09期

相關(guān)會議論文 前10條

1 汪國平;林明寶;吳定華;曾憲銘;;廣東省番茄青枯病及抗病育種研究概況[A];全國蔬菜遺傳育種學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2002年

2 張海利;陳永兵;徐堅(jiān);;番茄青枯病生物防治進(jìn)展[A];中國園藝學(xué)會十屆二次理事會暨學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2007年

3 趙娜;蔡昆爭;汪國平;王勇;;家畜堆肥對番茄青枯病的控制作用及其與土壤微生物活性的關(guān)系[A];第五屆中國青年生態(tài)學(xué)工作者學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 蔣佳峰;李玲;何昕;申民

本文編號：2654723