發(fā)布時間：2025-01-06 23:10

　　很多養(yǎng)殖魚類的生長具有二態(tài)性,如羅非魚的雄性比雌性生長快50%,單性養(yǎng)殖成為提高水產(chǎn)養(yǎng)殖效益的有效手段之一,性別決定研究為性控育種提供理論基礎。迄今為止,已在多種魚類中發(fā)現(xiàn)其性別決定基因,這些基因能決定相關物種雄性性別。然而對魚類雌性性別決定基因的鑒定還鮮有報道。Foxl2是Fox基因家族的成員,哺乳動物缺失Foxl2會發(fā)生由雌向雄的部分或完全性逆轉(zhuǎn),說明Foxl2參與哺乳動物雌性性別決定或維持。魚類中研究結(jié)果表明,foxl2表達存在性差,在卵巢表達高于精巢,前期研究結(jié)果顯示,在XX羅非魚(XY型性別決定系統(tǒng))中過表達foxl2顯負性突變體或敲降foxl2都會性逆轉(zhuǎn)為雄性,近期在斑馬魚中突變foxl2也會導致由雌向雄性逆轉(zhuǎn),表明Foxl2參與了魚類雌性性別決定,但其作用機制還不清晰。cyp19a1a編碼的芳香化酶是雌激素合成關鍵限速酶,已證明Foxl2能直接與cyp19a1a啟動子結(jié)合,促進其轉(zhuǎn)錄。前期結(jié)果顯示在XX羅非魚中敲降Cyp19a1a導致由雌向雄性逆轉(zhuǎn),近期在斑馬魚和青鳉中的突變實驗也得到相同結(jié)果。另外,雌激素在哺乳動物雄性生殖中也扮演了重要角色,阻斷雌激素通路導致雄性小鼠輸精...

【文章頁數(shù)】：148 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1 脊椎動物性別決定
        1.1 哺乳類性別決定
        1.2 鳥類性別決定
        1.3 爬行類性別決定
        1.4 兩棲類性別決定
        1.5 魚類性別決定
    2 脊椎動物性別決定通路
        2.1 雄性通路
        2.2 雌性通路
            2.2.1 Foxl2
            2.2.2 Cyp19a1a
    3 雌激素與雄性生殖的關系
        3.1 雄性生殖系統(tǒng)組成
        3.2 雌激素在雄性生殖系統(tǒng)中的作用
            3.2.1 Cyp19a1在雄性生殖系統(tǒng)中的表達和功能
            3.2.2 雌激素受體在雄性生殖系統(tǒng)中的表達和功能
        3.3 雌激素作用機理
    4 科學問題的提出和本研究目的意義
第二章 Foxl2在尼羅羅非魚雌性性別決定中的功能研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑
        2.3 主要儀器
        2.4 方法
            2.4.1 foxl2純合突變魚的獲得
            2.4.2 免疫組化
            2.4.3 Westernblot
            2.4.4 Real-timePCR
            2.4.5 血清類固醇激素水平測定
            2.4.6 E2回救foxl2XX純合突變表型
            2.4.7 啟動子分析
            2.4.8 生殖細胞數(shù)量估計
            2.4.9 統(tǒng)計檢驗
    3 結(jié)果
        3.1 foxl2純合突變魚的獲得
        3.2 純合突變foxl2導致XX個體性逆轉(zhuǎn)
        3.3 foxl2XX純合突變魚中血清雌激素水平降低
        3.4 E2回救Foxl2突變引起的性逆轉(zhuǎn)
        3.5 foxl2XX純合突變魚中血清雄激素水平升高
        3.6 foxl2XX純合突變魚早期性腺生殖細胞數(shù)量減少
    4 討論
        4.1 Foxl2是重要的雌性性別決定基因
        4.2 Foxl2抑制雄性通路基因表達
        4.3 Foxl2調(diào)節(jié)類固醇激素合成
    附圖
第三章 Cyp19a1a在尼羅羅非魚雌性性別決定中的功能研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑
        2.3 主要儀器
        2.4 方法
            2.4.1 cyp19a1a純合突變魚的獲得
            2.4.2 免疫組化
            2.4.3 Westernblot
            2.4.4 Real-timePCR
            2.4.5 血清E2水平測定
            2.4.6 E2回救cyp19a1aXX純合突變表型
            2.4.7 生殖細胞數(shù)量估計
            2.4.8 統(tǒng)計檢驗
    3 結(jié)果
        3.1 cyp19a1a純合突變魚的獲得
        3.2 cyp19a1aXX純合突變魚出現(xiàn)性逆轉(zhuǎn)
        3.3 E2回救Cyp19a1a缺失引起的性逆轉(zhuǎn)
        3.4 cyp19a1aXX純合突變魚早期性腺生殖細胞數(shù)量減少
    4 討論
        4.1 Cyp19a1a在性別決定和維持中的作用
        4.2 Cyp19a1a與生殖細胞命運的關系
        4.3 基因突變導致羅非魚性別決定基因和性染色體的轉(zhuǎn)換
    附圖
第四章 Cyp19a1b在雄性尼羅羅非魚生殖中的作用
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑
        2.3 主要儀器
        2.4 方法
            2.4.1 cyp19a1b純合突變魚的獲得
            2.4.2 血清類固醇激素水平測定
            2.4.3 育性檢測
            2.4.4 性腺形態(tài)和表型分析
            2.4.5 精子特征分析
            2.4.6 Real-timePCR
            2.4.7 統(tǒng)計檢驗
    3 結(jié)果
        3.1 cyp19a1b純合突變魚的獲得
        3.2 純合突變cyp19a1b導致XY個體輸精管堵塞和不育
        3.3 cyp19a1bXY純合突變魚精子發(fā)生正常
        3.4 純合突變cyp19a1b導致輸精管內(nèi)離子交換障礙
        3.5 純合突變cyp19a1b導致XY精巢退化
    4 討論
        4.1 阻斷雌激素合成引發(fā)XY羅非魚不育
        4.2 雌激素調(diào)節(jié)輸精管內(nèi)離子交換
        4.3 輸精管長期堵塞引發(fā)性腺退化
結(jié)論
本研究的主要創(chuàng)新點
本研究的不足與展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的主要論文
在讀期間參加科研情況



本文編號：4024126