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青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達(dá)與其重組蛋白活性分析

發(fā)布時(shí)間:2024-11-03 10:32
  青蛤是我國(guó)重要的海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,鑒于其具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和鮮美的口味,因此青蛤的增養(yǎng)殖在水產(chǎn)行業(yè)中具有重要的地位。但是,近年來(lái)由于國(guó)內(nèi)沿海地區(qū)采取高密度、高投餌和高產(chǎn)出的養(yǎng)殖方式,使青蛤的種質(zhì)嚴(yán)重衰退、抗病力逐步下降,加之養(yǎng)殖區(qū)域水質(zhì)污染嚴(yán)重,連年出現(xiàn)了養(yǎng)殖青蛤的病害和大規(guī)模死亡現(xiàn)象。本研究通過(guò)對(duì)青蛤免疫相關(guān)因子絲氨酸蛋白酶抑制劑的表達(dá)研究,從分子水平上初步揭示其免疫作用機(jī)制及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式,為探索青蛤的免疫抗病機(jī)制、建立青蛤的健康養(yǎng)殖途徑提供了有價(jià)值的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。文章首先介紹了青蛤的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和相關(guān)研究背景,闡述了我國(guó)當(dāng)前貝類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)中普遍存在的問(wèn)題及其原因。重點(diǎn)說(shuō)明了病原微生物—鰻弧菌對(duì)青蛤養(yǎng)殖的危害,并且分析了鰻弧菌的致病機(jī)理和防治方法。該部分還介紹了絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的結(jié)構(gòu)及其在貝類(lèi)免疫調(diào)節(jié)中的重要作用。研究者通過(guò)SMART高通量測(cè)序的方法構(gòu)建了青蛤的cDNA文庫(kù),使用生物信息學(xué)分析方法,得到了青蛤絲氨酸蛋白酶抑制劑(SPI)基因序列的全長(zhǎng)。結(jié)果顯示,青蛤SPI基因全長(zhǎng)587bp,開(kāi)放閱讀框?yàn)?56bp,編碼151個(gè)氨基酸,其蛋白質(zhì)理論分子量為16.850KD,理論等電點(diǎn)pI...

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達(dá)與其重組蛋白活性分析



將預(yù)測(cè)的青蛤氦基酸序列(Cs)與菲律賓蛤仔故p/?arwm)、2種??中帶蛤?qū)匍L(zhǎng)牡蝴(Croymyfrea?g/gos1)的?Kazal?家族絲氨酸??蛋白酶抑制劑氨基酸序列進(jìn)行同源性分析比對(duì)(圖2.2),結(jié)果發(fā)現(xiàn)Kazal家族的基??因序列中富含半胱氨酸。由于動(dòng)物體內(nèi)半胱氨酸具....


青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達(dá)與其重組蛋白活性分析



2.3.4青蛤Kazal-SPI氨基酸系統(tǒng)學(xué)分析??將青蛤的Kazal型SPI基因與其他13個(gè)物種(見(jiàn)表2.1)的相關(guān)氨基酸序列??進(jìn)行比對(duì),利用鄰接法構(gòu)建了分子系統(tǒng)樹(shù)(圖2.5),采用bootstrap?1000個(gè)循環(huán)檢??驗(yàn)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的置信度。結(jié)果表明,青蛤Kazal型SPI與....


青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達(dá)與其重組蛋白活性分析



圖3.1青蛤總RNA電泳1?The?electrophoretogram?of?total?一鏈的合成??NA經(jīng)反轉(zhuǎn)后的cDNA模板進(jìn)物為一條345bp左右的條帶,


青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達(dá)與其重組蛋白活性分析



血?閉殼肌?肝臟?外套膜?腮??組織名稱(chēng)??圖3.3?SPI基因在青蛤不同組織中的表達(dá)情況??28??



本文編號(hào):4011129

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