中國大鯢(Andrias davidianus),俗稱娃娃魚,為我國特有珍稀兩棲動物,主要分布于四川、湖北、湖南、貴州、陜西等省份,已列入國家二級保護動物名錄,并被列入CITES公約附錄Ⅰ中。近些年,各地相繼對大鯢人工繁殖和養(yǎng)殖技術展開了研究,推動了全國大鯢養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。然而,隨著大鯢養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大及養(yǎng)殖集約化程度的不斷提高,大鯢病害問題日趨嚴重,給大鯢養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經濟損失。本研究取患病瀕死大鯢肝臟分離細菌,利用Biolog微生物鑒定系統(tǒng)及16SrDNA序列分析對純培養(yǎng)細菌進行鑒定,然后進行健康大鯢人工感染試驗,通過其病征及病原菌再分離鑒定確定病原菌,同時對該病原菌進行藥物敏感試驗。從患病瀕死大鯢肝臟中分離到一株病原菌YZ01,經Biolog微生物鑒定系統(tǒng)的鑒定及16S rDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育分析表明,該病原菌為類志賀鄰單胞菌,且通過人工感染試驗,可致健康大鯢與自然患病大鯢相同的癥狀并再次分離到該病原菌。藥物敏感試驗表明,該菌株對頭孢曲松、頭孢噻肟、氯霉素和頭孢呋辛等18種藥物敏感。本研究以福爾馬林滅活的大鯢嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)作為免疫...

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【學位級別】：碩士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1 中國大鯢
        1.1 大鯢資源
        1.2 大鯢的生物學特性
        1.3 大鯢的價值及養(yǎng)殖現狀
    2 大鯢病害研究進展
        2.1 大鯢細菌性疾病
            2.1.1 大鯢細菌性敗血癥
            2.1.2 大鯢腹水病
            2.1.3 大鯢赤皮病
            2.1.4 大鯢腸炎病
        2.2 大鯢真菌性疾病
        2.3 大鯢寄生蟲疾病
            2.3.1 吸蟲病
            2.3.2 線蟲病
        2.4 大鯢病毒性疾病
        2.5 大鯢非寄生性疾病
    3 血液指標研究
        3.1 血細胞參數
            3.1.1 紅細胞參數
            3.1.2 白細胞參數
        3.2 酶學指標
            3.2.1 溶菌酶
            3.2.2 超氧化物歧化酶
            3.2.3 過氧化氫酶
            3.2.4 堿性磷酸酶
            3.2.5 酸性磷酸酶
            3.2.6 酚氧化酶
    4 疫苗免疫佐劑的應用研究
        4.1 鋁鹽佐劑
        4.2 油乳佐劑
        4.3 蜂膠佐劑
        4.4 微生物佐劑
            4.4.1 細菌毒素
            4.4.2 葡聚糖
            4.4.3 分枝桿菌菌苗
            4.4.4 肽聚糖
        4.5 分子佐劑
            4.5.1 細胞因子
            4.5.2 熱休克蛋白
            4.5.3 CpG-DNA佐劑
        4.6 其他佐劑
            4.6.1 維生素E和硒
            4.6.2 中藥多糖
            4.6.3 免疫刺激復合物
    5 研究目的和意義
第二章 患病大鯢類志賀鄰單胞菌的分離與鑒定
    1 材料及方法
        1.1 材料
            1.1.1 試驗動物及飼養(yǎng)條件
            1.1.2 主要試劑和儀器
        1.2 病原菌分離及培養(yǎng)
        1.3 人工感染試驗
        1.4 Biolog微生物自動鑒定儀
        1.5 16S rDNA序列的擴增與測序
        1.6 序列分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構建
        1.7 藥敏試驗
    2 結果
        2.1 病原菌的菌落形態(tài)特征
        2.2 人工感染試驗
        2.3 Biolog微生物自動鑒定
        2.4 序列分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構建
        2.5 藥敏試驗
    3 討論
第三章 嗜水氣單胞菌滅活疫苗免疫后大鯢外周血免疫指標的變化研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗大鯢與暫養(yǎng)
        1.2 供試菌株及其培養(yǎng)
        1.3 免疫原與吞噬原的制備
        1.4 滅活疫苗的安全性試驗
        1.5 免疫與采血
        1.6 免疫指標檢測
        1.7 攻毒感染試驗
        1.8 實驗數據分析
    2 結果
        2.1 無菌檢驗與魚體安全性試驗
        2.2 血細胞計數
        2.3 白細胞分類計數
        2.4 吞噬細胞吞噬活性
        2.5 血清抗體效價
        2.6 相對免疫保護力
    3 討論
第四章 不同佐劑對大鯢嗜水氣單胞菌滅活疫苗免疫效果的比較研究
    1 材料與方法
        1.1 菌種來源
        1.2 試驗動物
        1.3 免疫原的制備
        1.4 滅活疫苗的安全性試驗
        1.5 佐劑疫苗制備
            1.5.1 蜂膠佐劑疫苗的制備
            1.5.2 弗氏佐劑疫苗的制備
            1.5.3 鋁膠佐劑疫苗的制備
            1.5.4 不含佐劑疫苗的制備
        1.6 免疫與采血
        1.7 血清抗體效價檢測
        1.8 攻毒感染試驗
    2 結果
        2.1 疫苗無菌檢驗與安全性試驗
        2.2 血清抗體效價
        2.3 相對免疫保護力
    3 分析與討論
總結
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3990956