遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)屬腸桿菌科,是魚類愛德華氏菌病的主要病原,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。研究發(fā)現(xiàn)遲緩愛德華氏菌可以借助多種毒力相關因子以主動攻擊或被動吞噬的方式入侵宿主細胞,但具體機制并未闡明。組蛋白樣類核結(jié)構蛋白H-NS (Histone-like nucleoid structuring protein)是廣泛分布于革蘭氏陰性菌中的一類重要的全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,參與調(diào)控多種與毒力、代謝、環(huán)境應激反應等相關基因的表達。前期研究發(fā)現(xiàn),H-NS對T6SS效應子EvpP具有調(diào)控作用。本課題基于比較蛋白組學分析篩選遲緩愛德華氏菌中受到H-NS調(diào)控的蛋白。在此基礎上,重點研究H-NS調(diào)控遲緩愛德華氏菌T6SS效應子EvpB和EvpC的分子機制。首先,通過雙向電泳技術比較野生株E. tarda EIB202與hns突變株在蛋白質(zhì)組上的差異,鑒定出7個蛋白的表達受到H-NS的調(diào)控,分別與應激反應、代謝合成、膜結(jié)構及毒力有關,其中包括E. tarda的T6SS效應子EvpB和EvpC。通過qRT-PCR實驗,驗證了H-NS對EvpB和EvpC具有調(diào)控作用。其次,...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２?￡．?中不同毒力調(diào)控系統(tǒng)么間的關系｜Ｍ｜??

從而引起系統(tǒng)性的感染。系統(tǒng)研究毒力相關因子的時序性表達與其感??染過程的關系將有助于闡明其致病機制。Ｌｅｕｎｇ等是出沈／感染宿主的過程可??分為六步（圖１．１）：第一步，細菌利用其鞭毛運動至宿主上皮細胞；第二步，細菌利用黏??附素黏附在上皮細胞表面并啟動感染；第王步，借助侵染樣蛋....

圖１．４?Ｈ－ＮＳ髙親和性結(jié)合的ＤＮＡ序列１＂１??

識別并結(jié)合高ＡＴ含量ＤＮＡ序列的機制仍然不清楚。Ｂｏｕｆｆａｒｔｉｇｕｅｓ等ｔ４２ｌ通過分析沙口氏??菌Ｈ－ＮＳ在ｐｗＦ啟動子區(qū)域內(nèi)結(jié)合位點的特點提出了一個由１０個核昔酸組成的高親和??性序列（圖１．４）。Ｌａｎｇ等利用染色質(zhì)免疫共沉淀技術在全基因組上檢測Ｈ－ＮＳ的結(jié)合??位點發(fā)....

圖２．１不同￡？．伯ｚＹ／ａ菌株的胞外蛋白譜??Ｆｉｇ，?２．１?ＥｘｔｒａｃｅＨａｒ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｆｉｇｕｒｅ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?左．／饑切

帶的灰度可Ｗ看出Ｅｖｐｌ和ＥｖｐＰ的胞外分泌量明顯較ＥｖｐＣ小。相對于野生株Ｅ舊２０２，??突變株Ａ２９６８、過表達株１５０５＾和巧６８＾的胞外圖譜基本上沒有差異，主要的蛋白條帶??灰度值基本一致（圖２．１）。??ＥＩＢ２０２?Ａ２９６８?２％８〇＝?１５０５班??Ｉ去＾?——Ｅ....

圖２．２野生?

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