發(fā)布時間：2024-02-22 03:25

　　致病性嗜水氣單胞菌是引起水生生物和獸畜敗血癥、人類腹瀉和傷口感染的重要病原菌之一,不僅為水產(chǎn)養(yǎng)殖帶來的巨大的經(jīng)濟損失,同時嚴(yán)重影響著人獸的公共健康。淡水魚易受嗜水氣單胞菌感染,該病通常以抗生素來控制,但抗生素的過度使用使該菌的耐藥性不斷上升并呈現(xiàn)多重耐藥趨勢。這不僅影響水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,也為該病的防治工作帶來較大困難,同時嚴(yán)重影響著水產(chǎn)品的質(zhì)量和生態(tài)環(huán)境,給食品安全和社會公共衛(wèi)生安全帶來極大的挑戰(zhàn)。掌握水產(chǎn)品中致病嗜水氣單胞菌的分布及耐藥情況,可為尋找安全、有效的防控方法奠定基礎(chǔ)。本研究于2014-2015年采集多種魚類(包括健康魚和發(fā)病魚)的鰓拭子、腸道內(nèi)容物及淡水魚養(yǎng)殖區(qū)水樣369份,應(yīng)用選擇培養(yǎng)基對嗜水氣單胞菌進行初步分離,并利用PCR方法檢測毒力基因,同時采用普通PCR方法、16SrRNA測序、國標(biāo)方法及生化鑒定對攜帶毒力基因的氣單胞菌進行鑒定,鑒定后進行MLST分型;從樣品中分離培養(yǎng)獲得363株氣單胞菌,篩選得到40株攜帶毒力基因的氣單胞菌。其中發(fā)病魚毒力基因陽性株分離率為32%(15/50),健康魚毒力基因陽性株分離率為7.7%(24/313);種屬鑒定中,經(jīng)PCR方法鑒定...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1嗜水氣單胞菌在RS上的生長形態(tài)

離培養(yǎng)培養(yǎng)基初步分離、RYAN培養(yǎng)基二次純化后得到363株疑似嗜水氣菌株均為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短桿菌。嗜水氣單胞菌在選擇培N上形態(tài)見圖3.1和圖3.2。

圖3.2嗜水氣單胞菌在RYAN上的生長形態(tài)

圖3.4嗜FigroL(782bpb表3Table3-4位基因gy15127172322嗜水氣單胞菌g.3.4PCRpp)；3：gltA(6bp)；7：陰性-440株嗜水TheresultsyrBgroL5022429771617918831122....

圖3.4嗜Fi嗜水氣單胞菌g.3.4PCRp菌多位點序列

標(biāo)準(zhǔn)曲的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲38.879和線的建立定量PCR方曲線(圖3y=-3.19x方法10倍梯3.6)，16Sx+38.567，梯度稀釋的rDNA基標(biāo)準(zhǔn)曲線的的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒進基因及aer的相關(guān)系數(shù)進行檢測，rA基因擴R2達(dá)到0.根據(jù)結(jié)擴增方.998和

圖3.6熒熒光定量PCRR標(biāo)準(zhǔn)曲線

量PCRA基因水氣單胞CR方法R方法擴增沙因及氣溶素基胞菌ATCC法的特異性沙門氏菌、基因，檢測C7966的模。腸球菌和大測結(jié)果為陰性模板呈現(xiàn)了大腸桿菌等性，與陰性良好的擴增等12種菌的性對照結(jié)果一增曲線，證明的嗜水氣一致（圖明了本雙

本文編號：3906319