本研究以馬氏珠母貝（Pinctada martensii）為研究對象，利用本實驗室構建的珍珠囊轉(zhuǎn)錄組和植核后6個時期珍珠囊的數(shù)字基因表達譜數(shù)據(jù)庫。從中篩選出熱休克蛋白基因和Toll樣受體基因的Unigene片段。應用cDNA末端快速擴增（RACE）技術從馬氏珠母貝外套膜中克隆了熱休克蛋白60基因（PmHSP60）、熱休克蛋白90基因（PmHSP90）、Toll樣受體4基因（PmTLR4）、Toll-like protein基因（PmTLP）的cDNA序列全長，對其進行了生物信息學分析。并分析了四個基因的組織表達及在應激后不同時間點的表達。結果如下： 1.四個免疫基因cDNA全長的獲取及其序列分析：PMHSP60基因cDNA全長為2495bp，開放閱讀框為1734bp。PmHSP90基因cDNA全長為2584bp，開放閱讀框為2160bp，編碼719個氨基酸。PmTLR4基因cDNA全長3138bp，開放閱讀框2697bp，編碼899個氨基酸。PmTLP基因cDNA全長為2214bp，其中開放閱讀框為2043bp，編碼681個氨基酸。同源性比對分析發(fā)現(xiàn)，PmHSP60和PmHSP90與其...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1TLR的兩種結構

熱休克蛋白60家族也是一個具有高度保守性的基因家族。在真核生物細胞中，主要存在線粒體，可以作為伴侶蛋白分子參與蛋白質(zhì)的折疊以及亞細胞轉(zhuǎn)運。近年來的研究表明，熱休克蛋白60也可作為一個危險信號作用于天然免疫系統(tǒng)。通過激活單核白細胞、巨噬細胞等多種免疫細胞,并誘導產(chǎn)生一系列....

圖1-2Toll樣受體信號通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor

圖1-2Toll樣受體信號通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor在海洋動物在各個門中，很多TLRs已被確定（附錄Ⅰ[97]）。在軟體動物eguen等人在太平洋牡蠣的EST序列中發(fā)現(xiàn)三個與TLR通路信號分子（MyDAF....

圖2-1pMD19-TVector克隆位點示意圖

圖2-1pMD19-TVector克隆位點示意圖Fig.2-1SketchmapofpMD19-TVectorcloningsites)轉(zhuǎn)化將將連接好的產(chǎn)物加入到已在冰上溶解的含100μLDH5α感受態(tài)細胞的管子輕吹打均勻；冰上放置30min（此時....

圖2-23.RACE原理(引自Clontech技術手冊)

143'RACE第一輪PCR以上述合成的cDNA第一鏈（for3’RACE）為模板，利用GSP-3’outer引物的通用引物（UniversalPrimerAMix，UPM)進行PCR反應。1)PCR反應體系：PremixTaq7.5μLcDNA第....

本文編號：3898628