小泛素相關(guān)修飾物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修飾,也稱SUMO化修飾,是一種重要的轉(zhuǎn)錄翻譯后修飾,指SUMO以ATP依賴的方式共價(jià)結(jié)合細(xì)胞內(nèi)靶蛋白中的賴氨酸殘基的過程。SUMO化修飾參與許多生物學(xué)過程,如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)和細(xì)胞周期調(diào)控等,在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要的作用。糖類作為生物體重要的營養(yǎng)元素之一,與哺乳動(dòng)物相比,魚類對(duì)于膳食糖類的利用能力相對(duì)較低。然而,日糧投喂黃顙魚碳水化合物可以起蛋白質(zhì)節(jié)約效應(yīng)。目前,SUMO化修飾在魚類上研究較少,關(guān)于飼料葡萄糖對(duì)魚類SUMO化修飾的研究仍處于空白水平。基于SUMO家族蛋白在哺乳動(dòng)物及一些模式生物中進(jìn)化較為保守,葡萄糖是否介導(dǎo)了某些脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)錄因子,或者關(guān)鍵基因的SUMO化修飾而參與魚類脂質(zhì)代謝的調(diào)控?具體機(jī)理又是什么?以黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)為試驗(yàn)魚,通過基因克隆技術(shù),獲得10個(gè)SUMO化修飾關(guān)鍵基因的c DNA序列,分析目的基因的基本分子特征,并進(jìn)行生物信息學(xué)解析。然后,探討了體內(nèi)外糖水平對(duì)黃顙魚肝臟SUMO化修飾關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 SUMO化修飾的研究進(jìn)展
        1.1 SUMO化修飾關(guān)鍵基因
        1.2 SUMO化修飾的功能
        1.3 魚類SUMO化修飾研究進(jìn)展
    2 SUMO化修飾對(duì)脂質(zhì)代謝影響的研究進(jìn)展
    3 糖類對(duì)SUMO化修飾影響的研究進(jìn)展
    4 本研究的目的及意義
第二章 黃顙魚SUMO化修飾關(guān)鍵基因的分子特征及組織分布
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)魚的飼養(yǎng)及樣品采集
        2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3 SUMO化修飾關(guān)鍵基因c DNA序列的克隆
        2.4 SUMO化修飾關(guān)鍵基因序列分析
        2.5 SUMO化修飾關(guān)鍵基因的組織表達(dá)分析
        2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 黃顙魚SUMO化修飾關(guān)鍵基因c DNA序列特征
        3.2 黃顙魚SUMO化修飾關(guān)鍵基因氨基酸序列特征
        3.3 黃顙魚SUMO化修飾關(guān)鍵基因氨基酸序列系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.4 黃顙魚SUMO化修飾關(guān)鍵基因組織分布水平
    4 討論
第三章 糖水平對(duì)黃顙魚肝臟SUMO化修飾關(guān)鍵基因的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.1.1 黃顙魚攝食不同糖水平飼料的養(yǎng)殖試驗(yàn)
            2.1.2 不同葡萄糖水平孵育黃顙魚肝細(xì)胞試驗(yàn)
                2.1.2.1 黃顙魚肝細(xì)胞分離及培養(yǎng)
                2.1.2.2 細(xì)胞活力測定
        2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3 樣品分析
            2.2.1 基因轉(zhuǎn)錄活性分析
        2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 飼料糖水平對(duì)黃顙魚肝臟SUMO化修飾基因轉(zhuǎn)錄活性的影響
        3.2 葡萄糖孵育對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞活力的影響
        3.3 葡萄糖孵育對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞SUMO化修飾基因轉(zhuǎn)錄活性的影響
    4 討論
第四章 葡萄糖介導(dǎo)SUMO化修飾調(diào)控黃顙魚肝臟脂質(zhì)代謝
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2 黃顙魚肝臟細(xì)胞的分離及培養(yǎng)
        2.3 細(xì)胞酶活力分析
        2.4 細(xì)胞活力及脂質(zhì)蓄積分析
        2.5 定量PCR
        2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
        2.7 蛋白質(zhì)免疫沉淀分析SUMO化修飾水平
        2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 葡萄糖對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞活力的影響
        3.2 葡萄糖對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響
        3.3 葡萄糖對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝基因表達(dá)及酶活性的影響
        3.4 葡萄糖對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞LXRα/SREBP1/SCD1 蛋白表達(dá)的影響
        3.5 葡萄糖對(duì)黃顙魚肝細(xì)胞SREBP1的SUMO化修飾水平的影響
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3864125